大黄泻下效应的药理学新解释

大黄以"泻下"效应著称,其效应部位在结肠、且与"水"密切相关,对大黄蒽醌衍生物构效关系分析证实,具有1,8-二羟基且在2,3,6或7位没有羟基的蒽醌苷(emodin,rhein,chrysophanol)能产生较强的"水泻作用";结肠上皮细胞AQP丰富表达,AQPs表达异常可能导致结肠对水的吸收减少和/或肠液分泌增加,这可能是以结肠为主要药理效应部位的药物(泻下药)重要的效应分子之一,为大黄"泻下"功效的药理效应机制研究提供了新视角。大黄这一"水泻作用"是否与结肠AQP变化有关。通过对中医药理论、大黄功效与药理和AQPs研究资料分析,认为大黄对结肠AQP的调节效应可能是其"泻下"功效的药理学新解释,亦可能是大黄具有多重功效的缘由。

大黄蒽醌衍生物对大鼠结肠及LoVo细胞水通道蛋白4表达的调节效应

目的探讨大黄总蒽醌对SD大鼠的泻下效应及对结肠水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达的影响及大黄酸、大黄素对体外培养LoVo细胞AQP4的调节效应。方法雄性SD大鼠24只随机分为正常对照组、大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组,分别予大黄总蒽醌悬液或蒸馏水灌胃5天,观察大鼠结肠粪便含水量;应用Western blot、RT-PCR方法观察其近端结肠AQP4表达的变化。体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸/大黄素含药培养液作用24 h及大黄酸/大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间作用,采用Western blot及RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达。结果大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组作用后,大鼠结肠内粪便含水量明显增加,同时其近端结肠AQP4表达降低且表现为量效关系。大黄酸/大黄素能够显著下调体外培养LoVo细胞的AQP4蛋白及mRNA表达,且表现为剂量-效应及时间-效应关系。结论大黄总蒽醌在发挥泻下作用的同时,能够有效下调大鼠近端结肠AQP4的表达;大黄酸、大黄素可抑制体外培养Lo- Vo细胞AQP4的表达,可能是大黄泻下作用机制之一。

RP-HPLC测定正常人口服复方川芎汤剂后血清中游离的阿魏酸

目的：建立一种测定正常人ｐｏ复方川芎汤剂后血清中游离阿魏酸（ＦＡ）浓度的方法。方法：采用高效液相色谱法，以香豆素为内标（４２μｇ·ｍｌ－１），甲醇醋酸水（３８∶０．３∶６１．７）为流动相，ＬｉｃｈｒｏｓｏｒｂＲＰ１８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）为分析柱，紫外检测波长为３２０ｎｍ。取５００μｌ血清，加入内标，水浴（９０℃）５ｍｉｎ，超微搅拌器搅拌１５ｓ，离心（３０００ｒ·ｍｉｎ－１）１５ｍｉｎ取上清液进样分析。结果：ＦＡ的检测限为６ｎｇ·ｍｌ－１（Ｓ／Ｎ＝３．５），最低检出血清浓度为８．８ｎｇ·ｍｌ－１，线性范围为１７．６ｎｇ·ｍｌ－１～１４０８．０ｎｇ·ｍｌ－１，ｒ＝０．９９９５，方法平均回收率为（９９．０４±２．２６）％，日内精密度ＲＳＤ≤４．１０％，日间精密度ＲＳＤ≤５．８２％。结论：本法简便、快速、灵敏，内源性物质及复方各组分药物不干扰测定。另还测定了正常人应用本口服液后的药动学参数。

大黄酸对LoVo细胞水通道蛋白4表达的调节效应

目的:探讨大黄酸对体外培养LoVo细胞水通道蛋白4(AQP4)的调节效应。方法:体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸含药培养液处理24 h及大黄酸含药培养液(20 mg/L)处理不同时间,其中不同浓度分为大黄酸高(40 mg/L)、中(20 mg/L)、低(10 mg/L)剂量组和正常对照组;不同作用时间分为3、6、12、24、48 h组和正常对照组。采用免疫细胞化学方法观察LoVo细胞AQP4蛋白表达定位,采用Western blotting及半定量RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达。结果:AQP4主要表达于LoVo细胞的细胞膜上,在细胞浆也有少量表达。随着大黄酸用药剂量增加,AQP4表达持续下降;大黄酸低剂量组与正常对照组比较,AQP4表达下降但无显著性差异;大黄酸中、高剂量组,AQP4表达则呈显著性下降。在时间效应方面,大黄酸3、6 h组AQP4表达无显著性下降,但在12、24、48 h组则显著下降;同时研究发现,AQP4表达下降的程度与大黄酸剂量及大黄酸作用时间均存在相关性。结论:大黄酸可抑制LoVo细胞AQP4基因转录与翻译,提示大黄酸对AQP4表达的调节可能与大黄的泻下作用有关。

大黄素对LoVo细胞水通道蛋白2表达的调节效应

目的探讨大黄素对体外培养LoVo细胞水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)表达的调节效应。方法体外培养LoVo细胞并予不同质量浓度大黄素含药培养液24 h处理及大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间处理,采用免疫细胞化学方法观察LoVo细胞AQP2蛋白表达位置并初步观察AQP2蛋白表达的变化趋势,采用Western blotting及半定量RT-PCR检测AQP2蛋白及mRNA的表达。结果AQP2表达于LoVo细胞的细胞膜,且与大黄素用药浓度及用药时间存在着相关性。进一步的Western blotting证实,不同质量浓度大黄素含药培养液均可抑制AQP2蛋白的表达,药物质量浓度愈大,AQP2蛋白的表达愈低,其中大黄素20 mg/L组及40 mg/L组AQP2蛋白表达显著性降低;大黄素作用3、6 h组,AQP2蛋白表达上升,但与对照组比较,无显著差异;作用12、24、48 h组,AQP2蛋白表达呈进行性下降趋势。半定量RT-PCR结果显示,随着大黄素质量浓度的增加,AQP2 mRNA表达呈进行性下降趋势;在时间-效应方面,随着用药时间的延长,AQP2 mRNA表达呈进行性下降趋势。结论大黄素可抑制LoVo细胞AQP2基因转录与翻译,这提示大黄素对AQP2表达的调节效应可能与大黄的泻下作用有关。

正常人口服川芎单煎汤剂后体内阿魏酸的药代动力学研究

采用反相高效液相色谱法测定了正常人单剂量口服川芎单煎剂后体内阿魏酸(FA)的经时浓度。汤剂中 FA 含量为0.7895±0.0090mg/g(川芎生药量),给药剂量为1g(川芎生药量)/kg,药代动力学参数值为:Ka=0.0912±0.0494/min;Ke=0.0605±0.0118/min;t_(1/2)(Ka)=7.6028±1.0736min;t_(1/2)(Ke)=11.4604±3.2316min;T(peak)=17.7491±1.1418min;C(max)=334.6694±58.8826ng/ml;AUC=12423.6211±4446.6597(ng/ml)min;CL/F(s)=0.0036±0.0013mg/min(ng/ml);V/F(c)=0.0586±0.0183mg/(ng/ml)。结果表明 FA 的体内分布和代谢符合单室模型。

合成红景天苷的新途径

以对溴苯酚为原料，选择烯丙基保护酚羟基，制备了２（４烯丙氧苯基）乙醇（２）．后者经成苷及脱乙酰基得到中间体（３），采用并改进氯化钯／氯化亚铜法脱除（３）中的烯丙基，合成了红景天苷（４）．

配伍熟地可增加汤剂中阿魏酸的煎出率

用反相高效液相色谱法测定了川芎单煎剂，川芎、丹参合煎剂，川芎、当归合煎剂及改味四物场中阿魏酸的含量。结果表明，各组汤剂中阿魏酸的含量有显著差异（P＜0．001），配伍熟地对阿魏酸的溶出具有助溶作用。

中药“指纹药剂学”中关键性技术研究

探讨中药“指纹 药剂学”中关键性技术 ,商榷其科学性、先进性、实用性及其可行性。总结有关研究工作和文献资料 。

改良萃取——高效液相色谱法监测亲代活体肝移植患者全血中CsA

目的:建立一种改良萃取-高效液相色谱(HPLC)法测定全血中环孢菌素A(Csa)浓度.研究亲代活体肝移植患者全血中Csa浓度的早期变化及影响因素.方法:血样经两种复合溶剂分三步萃取后,以Kromasil C_(18)(150 mm×4.6mm,5μm)为分析柱,乙腈-甲醇-水-异丙醇(5.7:2.4;1.8:O.1)为流动相,71℃柱温下进行色谱分离.采用二氢奎尼(DQI))为内标,在 212nm处紫外定量检测.结果:全血中Csa最终最低检测浓度为26.0 μg/L,线性范围为52.μg/L～1248.0 μg/L.,r—0.9986,方法平均回收率为(99.12士4.31)%,日内RSI)≤4.6%(n=6),日间RSI)≤6.23%(n=6).结论;本法快速、灵敏、专一性强、内源性物质及其它各药组分不干扰测定.本法被用于亲代活体肝移植患者术后体内血药浓度的分析测定.结果表明:亲代活体肝移植患者术后早期全血中CSA浓度变化所受影响因素较复杂,

医院制剂皮肤刺激性的试验

目的 :考查 18种医院外用非标准制剂对皮肤的刺激性 ,进行医院制剂药物的安全性评价 ,为合理用药提供资料。方法 :制剂在短期接触家兔皮肤后 ,在规定的时间内研究其对家兔皮肤所产生的刺激反应及其他不良反应。结果 :中度刺激的受试药 2种 ,轻度刺激的 8种 ,无刺激反应的 8种。结论 :提示临床应用对皮肤有中度刺激 ,且刺激分值较高者 ,应改善制剂以减轻不良反应 ;对破损皮肤有刺激反应者 ,应尽量避免或慎用于患者的皮肤破损处。

反相高效液相色谱柱前衍生荧光法测定肠粘膜中的谷氨酰胺

以邻苯二甲醛及３－巯基丙酸为衍生试剂，５０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（ｐＨ７．０）－乙腈（９４∶６，Ｖ／Ｖ）为流动相，在ＬｉｃｈｒｏｓｏｒｂＲＰ１８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍｉ．ｄ．，５μｍ）柱上，研究并建立了测定动物肠粘膜中谷氨酰胺（Ｇｌｎ）的柱前衍生荧光ＲＰ－ＨＰＬＣ法。样品与衍生剂按４∶１进行衍生反应，Ｅｘ＝２３０ｎｍ，Ｅｍ＝３８９ｎｍ；流速为２．０ｍＬ／ｍｉｎ。Ｇｌｎ的保留时间为３．１５８ｍｉｎ，检测限为２５μｍｏｌ／Ｌ（Ｓ／Ｎ＝３．５），线性范围为５０～３２００μｍｏｌ／Ｌ，ｒ＝０．９９９６，日间精密度ＲＳＤ值均不大于６．９７％。对ＳＤ大鼠肠粘膜屏障损伤防治中有关Ｇｌｎ的指标进行了测定，证明方法具有快速、灵敏及简便等特点。

胆红素IX_α及其异构体的HPLC快速测定方法

目的：建立一种快速测定胆红素ＩＸα及其异构体的相对含量的方法．方法：采用高效液相色谱法，以ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）为分析柱，以乙腈∶甲醇∶醋酸铵－醋酸ｐＨ＝４．７（１∶７∶２Ｖ／Ｖ／Ｖ）为流动相，检测波长λ：４５０ｎｍ；流速：２．０ｍｌ／ｍｉｎ，可直接分离测定３个胆红素异构体．结果：对４批胆红素样品中３个异构体的相对含量用归一法处理进行了测定，胆红素ＩＸαｔＲ＝１３．１８ｍｉｎ，胆红素ＸⅢαｔＲ＝９．６５ｍｉｎ，胆红素ⅢαｔＲ＝１７．３５ｍｉｎ，胆红素异构体的分离度（Ｒ）分别为Ｒ１＝１．８０，Ｒ２＝２．０４．结论：本法快速、准确、灵敏、重现性好，可适用于胆红素对照品、胆红素的制备纯度鉴定及中药中胆红素的质量控制，对血清及胆汁中胆红素的测定也具有实际应用价值．

快速测定组织、血浆中谷氨酰胺及其临床意义

目的 :为基础研究和临床应用研究建立快速、准确、经济的测定大鼠血浆及小肠、肝和肌肉组织内谷氨酰胺水平的方法。 方法 :采用反相高效液相色谱柱前衍生荧光法 (RP- HPL C) ,衍生剂为邻苯二甲醛和 3-巯基丙酸 ,流动相为磷酸缓冲液 -乙腈 (V/ V,94∶ 6 ) ,L ichrosorb C18柱 ,样品与衍生剂按 4∶ 1进行衍生反应 ,激发波长 =2 30nm ,荧光检测波长 =389nm ,流速为 2 .0 ml/ min。 结果 :谷氨酰胺的保留时间为 3.15 8min,检测限为 2 5μm ol/ L(S/ N =3.5 )。线性范围 5 0～ 32 0 0μm ol/ L ,r=0 .9996。日间精密度 RSD值均不大于 6 .97%。 结论 :应用 RP-HPL C能准确、快速、灵敏地测定正常及辐射性肠粘膜损伤的大鼠血浆及组织的谷氨酰胺水平 。

RP-HPLC法测定煎剂中阿魏酸

建立了测定煎剂中阿魏酸含量的反相高效液相色谱法，以香豆素为内标，以LichrosorbC18为分析柱，流动相为甲醇－醋酸－水（38：0．3：61．7），检测波长为320um，平均回收率为99．94％±3．67％，日间RSD小于2．77％；测定川芎单煎剂，川芎与丹参、川芎与当归合煎剂及川芎、当归分煎合液等制剂中阿魏酸含量，结果表明单煎制剂和分煎合液中阿魏酸含量较高。

环氧二十碳三烯酸在心血管疾病防治中的研究进展

花生四烯酸通过细胞色素P4502J2(CYP2J2)代谢为环氧二十碳三烯酸(EETs)。EETs半衰期较短,可由可溶性表氧化水解酶(s EH)代谢成活性相对较弱的双羟二十碳三烯酸(DHETs)。CYP2J2是在心血管组织包括心脏和血管内皮细胞中高表达。CYP2J2和它的代谢产物EETs已被证实对心血管系统有不同范围的影响,包括炎症的调节、血管张力、细胞增殖、血管生成和代谢。本文将就EETs防治心血管疾病的作用进行简单综述。

鞘内吗啡对大鼠足底皮下蜜蜂毒诱致伤害性反应的抑制作用

目的:在脊髓水平了解经典的镇痛剂吗啡对新型组织病理性痛模型—蜜蜂毒试验的多种痛行为学反应的抑制作用。方法:实验于2003-01/10在第四军医大学神经科学研究所疼痛研究中心行为学实验室进行。30只大鼠随机分为正常对照组(n=5),鞘内生理盐水对照组(n=7)和鞘内吗啡给药组(n=18),鞘内吗啡给药组根据吗啡剂量又分为0.33nmol组(n=7)、3.3nmol组(n=6)、33nmol组(n=5)。给大鼠鞘内注射不同剂量的吗啡,观察对大鼠足底皮下注入蜜蜂毒诱致的持续性自发痛反应、热和机械性痛敏的抑制效果。结果:①鞘内预先注射三个剂量的吗啡对大鼠皮下给予每50μL0.2mg蜜蜂毒诱致的同侧后肢自发缩足反射次数产生了剂量依赖性的抑制作用。容积均为10μL的0.33,3.3和33nmol吗啡给药组,1h内大鼠每5min的自发缩足反射次数分别是(29.48±2.84),(19.90±2.35)和(5.81±1.04)次,与生理盐水对照组犤每5min(43.28±3.28)次犦比较差异均具有显著性意义(P<0.05),抑制率分别为(32±7)%,(54±5)%和(86±2)%。②大鼠皮下注射蜜蜂毒还诱致原发性热和机械性痛敏和继发性热痛敏,表现为注射部位和对侧对称部位热刺激潜伏期缩短,注射部位机械刺激阈值下降。与对照组比较,鞘内吗啡能显著延长同侧和对侧的热刺激潜伏期缩短,减少机械刺激阈值下降(P<0.

鞣酸软膏制剂的改进

鞣酸为收敛药,能沉淀蛋白质,主要用于局部。其软膏制剂可用于渗出性溃疡、烫伤、湿疹、褥疮、痔疮及防止婴儿尿布疹等。常用处方为:鞣酸100g,甘油100g, 亚硫酸氢钠2g,蒸馏水10ml,羊毛脂50g,凡士林加至1000g。制法是取干燥亚硫酸氢钠用蒸馏水溶解后。