牛轮状病毒HSX-21内蒙株的分离鉴定与基因型分析

本研究采集内蒙古自治区呼和浩特市某牛场腹泻犊牛粪样,对其进行牛轮状病毒分离鉴定和遗传进化分析。将RT-PCR检测阳性的腹泻粪样接种于MA104细胞,盲传4代后分离得到一株出现明显细胞病变的毒株,命名为HSX-21;对分离的毒株进行VP7多重半套式PCR鉴定基因型,将分离毒株测序得到的VP6、VP7和VP4基因进行遗传进化分析。结果表明分离到的毒株基因型为A群G6P[1]型,VP6基因与美国分离株NCDV同源性高达99.7%,VP7基因与英国分离株RF同源性高达99.9%;VP4基因与中国分离株NMG17044同源性高达98.8%。通过对牛轮状病毒的分离和基因型的确定,可为有效的防控本地区牛轮状病毒感染提供前期基础和理论依据。

产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌多重荧光定量PCR方法的建立及应用

为了建立能同时检测产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的多重荧光定量PCR方法,试验根据GenBank中产肠毒素大肠杆菌ST和LT基因及沙门氏菌invA基因序列设计引物和探针,通过优化扩增体系中引物和探针剂量建立检测产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的多重荧光定量PCR方法,分析该方法的特异性、敏感性和重复性,用建立的方法对85份临床样品进行检测,并与实验室传统血清学分离鉴定方法进行比较。结果表明:在ST基因的最佳引物和探针剂量为0.4μL、0.8μL,LT基因的最佳引物和探针剂量为0.6μL、1.0μL,invA基因的最佳引物和探针剂量为1.0μL、1.2μL时,扩增曲线良好,ST基因、LT基因、invA基因的标准曲线回归方程相关系数(R2)分别为0.975,0.968,0.915,扩增曲线具有良好线性关系;建立的多重荧光定量方法对铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等细菌核酸无交叉反应;组内重复变异系数均低于2%,且产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的最低检出浓度均为1×10^(1)copies/μL;从85份临床样品中检出产肠毒素大肠杆菌20份,沙门氏菌阳性样品10份,双阳性样品2份,与实验室传统血清学分离鉴定方法的符合率为94.12%。说明试验建立的多重荧光定量PCR方法的特异性好、敏感性强,稳定性高,具有良好的使用前景。

内蒙古自治区部分地区规模化牛场牛冠状病毒流行病学调查

为了解内蒙古地区规模化牛场牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)的流行情况,试验分别采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法对2020年采自内蒙古部分地区规模化牛场的500份血液样本的BCoV抗体和580份粪便样本的BCoV抗原进行检测,对不同地区、月龄和季节的BCoV抗体和抗原阳性率进行统计。结果表明:500份血液样本的BCoV抗体总阳性率为48.80%,其中呼和浩特市为51.50%,鄂尔多斯市为48.33%,巴彦淖尔市为45.00%;0~2月龄、3~6月龄、7~18月龄、18月龄以上牛血液样本的BCoV抗体阳性率分别为55.29%、40.00%、35.00%、52.94%;春季、夏季、秋季、冬季牛血液样本的BCoV抗体阳性率分别为67.22%、16.67%、23.75%、52.22%。580份粪便样本的BCoV抗原总阳性率为18.79%,其中呼和浩特市为16.79%,鄂尔多斯市为14.44%,巴彦淖尔市为30.00%;不同月龄牛均存在不同程度的BCoV感染,0~2月龄、3~6月龄、7~18月龄、18月龄以上牛粪便样本的BCoV抗原阳性率分别为34.42%、10.00%、11.76%、8.42%;春季、夏季、秋季、冬季牛粪便样本的BCoV抗原阳性率分别为25.94%、1.67%、15.29%、16.84%。说明内蒙古地区BCoV呈普遍流行趋势,在春季牛更易感染BCoV,0~2月龄牛更易感染BCoV,因此应做好内蒙古地区BCoV的防控工作,并加强对易感牛群BCoV的血清学、病原学监测,实时调整疫病防控措施,减少牛腹泻疾病的发生。

内蒙古部分地区致犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌的调查研究

为了阐明内蒙古部分地区致犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌的流行情况,该研究以内蒙古自治区乌兰察布和鄂尔多斯地区部分牛场腹泻病例为研究对象,采集患病犊牛样本,采用PCR方法检测产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli,ETEC)的ST和LT基因进行ETEC菌株鉴定。研究结果显示,乌兰察布地区ETEC检测总阳性率为11.71%,鄂尔多斯地区ETEC总阳性率为9.44%,其中0~2月龄阳性率为21.49%,2~6月龄阳性率为5%,6~18月龄阳性率为0。由此可知,乌兰察布地区ETEC检测总阳性率高于鄂尔多斯地区,两个地区ETEC的流行情况和感染情况均以0~2月龄犊牛为主,为进一步开展犊牛腹泻疾病的防控提供了依据。

牛副结核病的研究进展

牛副结核病是在世界范围内流行的、以牛肉芽肿性肠炎和进行性消瘦为主要特征的传染病,给畜牧生产造成了严重危害和巨大经济损失。牛副结核病由副结核分枝杆菌引起,致病机制复杂,传播方式多种多样,病原体难以分离培养。对牛副结核病的致病机制及其致病菌躲避免疫系统方式进行综述,提出病料去污处理方法研究能更好地为分离培养和研究副结核分枝杆菌提供帮助,以期为牛副结核病的预防诊断和治疗提供理论指导。

牛昏睡嗜血杆菌病的研究进展

近年来,牛昏睡嗜血杆菌病在世界各国的检出率逐渐增加。牛昏睡嗜血杆菌病是由昏睡嗜血杆菌引起的以神经系统、呼吸道、生殖道、败血症为主要症状的疾病,给畜牧业带来了严重危害和巨大的经济损失。昏睡嗜血杆菌是引起牛多系统疾病的病原,是一种革兰氏阴性多型性小型球杆菌。牛昏睡嗜血杆菌的致病机制复杂,传播途径多种多样,病原体分离培养较为困难。对牛昏睡嗜血杆菌的病原特性、流行病学调查、致病机理以及毒力因子四个方面进行综述,以期为后续分离培养和进一步研究提供理论基础。

内蒙古自治区通辽市部分规模化牛场BCoV流行病学调查

从内蒙古自治区通辽市部分规模化养牛场采集粪样350份、血样325份,分别采用RT-PCR和ELISA方法进行牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)的分子流行病学调查,了解内蒙古自治区通辽市规模化养殖场牛冠状病毒的流行状况,以期为通辽地区养牛场牛冠状病毒病的防控提供参考。结果显示:抗原总阳性率为22.86%,抗体总阳性率为7.69%。在采集的样品中,0~2月龄犊牛的抗原阳性率最高,达57.50%,抗体阳性率最高,达19.00%,表明通辽地区牛冠状病毒流行率较高,及时采取科学有效的防控措施是很有必要的。

内蒙古巴彦淖尔市部分规模化牛场产肠毒素大肠杆菌F5流行病学调查

为了解内蒙古巴彦淖尔地区规模养殖场由产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F5菌毛引起的腹泻流行情况,采集巴彦淖尔市规模化养牛场284份血样和300份粪样,采用ELISA和PCR方法进行了产肠毒素大肠杆菌F5抗体及分子流行病学调查,结果显示:产肠毒素大肠杆菌F5抗体总阳性率为6.34%,抗原总阳性率为27.00%;在采集的样品中,0~2月龄犊牛的抗原阳性率最高,为20.67%,抗体阳性率为4.23%,表明巴彦淖尔地区ETEC F5在0~2月龄犊牛中流行,应进一步开展犊牛腹泻疾病的防控。

牛轮状病毒及检测方法的研究进展

牛轮状病毒可引起牛严重腹泻、脱水、排出水样稀粪,是一种在世界范围内流行的传染病,严重影响犊牛健康。该病毒感染率高,流行广泛,基因型众多,确诊及防控困难。研究牛轮状病毒检测方法能够更好地掌握牛轮状病毒各基因型的的流行状况,根据流行率高的基因型制备疫苗。本文综述牛轮状病毒的病原特性、流行病学调查、临床症状、病理变化及感染机制,介绍牛轮状病毒的检测方法,以期为牛轮状病毒的研究提供参考。