miR-218调控DKK2在结核感染机制中的初步研究

目的探讨miR-218调控DKK2参与结核感染的分子机制。方法选择62例结核病患者(结核组)和64例健康体检者(对照组)作为研究对象,采用逆转录-荧光定量PCR检测miR-218及其靶基因DKK2的表达水平;在结核感染细胞模型中,分别在6、12、24h检测miR-218、DKK2及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的表达水平。结果与对照组比较,miR-218在结核组的表达显著下调(P<0.05),DKK2明显上调(P<0.05)。在结核感染细胞模型中,6h时miR-218的表达显著下降而DKK2表达明显升高(P<0.05);随时间延长两者的表达水平与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);在24h时TNF-α表达增高(P<0.05),IL-6出现表达下调(P<0.05)。结论结核分枝杆菌可能通过诱导宿主miR-218表达下调,靶向抑制DKK2作用减弱,Wnt通路活性降低,进而打破免疫调节平衡促进结核病的发生。

P2X7受体在类风湿关节炎中的诊断价值及炎症反应中的作用

目的研究P2X7受体在类风湿关节炎中诊断价值及在炎症反应中作用。方法以骨关节置换病人滑膜组织为对照组(n=25),类风湿关节炎患者滑膜组织为病例组(n=25),qRT-PCR法检测骨关节置换病人和类风湿关节炎患者滑膜组织中P2X7受体相对表达;特异性敲低P2X7受体的小分子干扰RNA干扰P2X7受体研究其对炎症细胞因子分泌作用;ELISA检测炎症细胞因子白细胞介素IL-1β、IL-6、IL-8水平。结果类风湿关节炎患者滑膜组织P2X7受体水平明显高于骨关节置换手术患者滑膜组织P2X7受体水平,其对类风湿关节炎诊断具有较好的价值;类风湿关节炎患者滑膜组织P2X7受体水平与血清中炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8水平呈正相关,且有统计学意义(P<0.001);干扰P2X7受体后明显抑制MH7A滑膜细胞的IL-1β和IL-6分泌。结论类风湿关节炎患者滑膜组织P2X7受体水平升高,对类风湿关节炎具有诊断价值,阻断P2X7受体后抑制炎症细胞因子的分泌和炎症反应。

中国西南地区170例杜氏/贝氏肌营养不良症dystrophin基因变异谱分析

目的构建中国西南地区杜氏/贝氏肌营养不良症（DMD/BMD）dystrophin基因变异谱,探讨dystrophin基因型与临床表型之间的关系。方法采用多重连接探针扩增技术（multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA）对170例DMD/BMD患者进行dystrophin基因分析,其中3例怀疑点突变患者采用Sanger测序分析基因突变位点。结果 Dystrophin基因突变MLPA检出率为72.94%,其中基因缺失、重复及点突变所占比例分别为62.35%（106/170）,8.82%（15/170）及1.76%（3/170）。共发现64种不同类型突变,连续外显子44~55缺失突变型占全部缺失型患者的75.47%。大部分5′端断裂点集中在2个热区（主热区：内含子43~55;次热区：内含子1~20）。基因型-表型分析显示DMD/BMD严重程度与基因缺失型或重复型无关,而与改变开放阅读框架型突变有关（r=0.640,P〈0.001）。结论连续外显子缺失或重复是dystrophin基因突变的主要类型,DMD/BMD严重程度与其改变开放阅读框架型突变有关。