MAPK在慢性髓细胞白血病K562细胞株信号转导中的作用

背景与目的:近年研究表明,ras-MAPK信号传导通路在慢性髓细胞白血病(CML)的发生和发展中起着重要作用。本研究拟探讨丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)在CML信号传导中的作用及其作用机理。方法:用脂质体转染法将MAPK的反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASO)导入CML细胞株K562细胞中,通过细胞增殖、DNA合成、MAPK含量和MAPK活性变化检测MAPKASO对K562细胞的作用。结果:MAPKASO可明显抑制细胞增殖、DNA合成、MAPK含量和MAPK活性,其抑制率分别为51.8%、57.1%、45.3%和61.6%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MAPK在CML信号转导中起重要,极有可能成为治疗CML的新靶点。

PD98059对慢性髓细胞白血病Ras-MAPK信号转导的作用

目的:探讨PD98059对慢性髓细胞白血病信号转导的作用及其作用机制。方法:将PD98059加入慢性髓细胞白血病细胞系K562细胞中,通过细胞活力、DNA合成、集落形成和MAPK活性的变化,观察PD98059对慢性髓细胞白血病信号转导的作用。结果:PD98059可明显抑制K562细胞活力、DNA合成、集落形成和MAPK活性(与对照组比较,P<0.05),其抑制作用具有浓度依赖性。结论:PD98059可通过阻断Ras-MAPK信号通路而发挥其抑制作用。Ras-MAPK通路极有可能成为CML治疗的新靶点。

反义寡聚脱氧核苷酸对白血病K562细胞株生物特性的影响

目的：探讨反义核酸对白血病Ｋ５６２细胞株的影响。方法：用人工合成的ｂｃｒ３／ａｂ１２反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｂ）及无义寡聚脱氧核苷酸（Ｎ－ＯＤＮ）处理人急性红白血病细胞株Ｋ５６２细胞系，以观察Ｋ５６２细胞的生长及其ｂｃｒ３／ａｂ１２癌基因的表达。结果：ＡＳＯ－ｂ能抑制体外培养的Ｋ５６２细胞的生长（抑制率为５３．８３±１０．７８，Ｐ＜０．０５），集落形成（４０μＭ的ＡＳＯ－ｂ的抑制率为８８．９，Ｐ＜０．０５），ＤＮＡ及Ｐ２１０蛋白的合成（１２ｈ抑制率分别为７９．６８±１３．５３，６０．３３，Ｐ＜０．０５）；而对照组对Ｋ５６２细胞则无明显的影响。结论：提示ｂｃｒ３／ａｂ１２癌基因是维持Ｋ５６２细胞恶性生长表型的主要因素，也为慢性髓系白血病的治疗指出了新的方向。

反义寡核苷酸对K562细胞株恶性表型逆转作用的研究

用人工合成的ｂｃｒ３／ａｂＬ２反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｂ）及无关寡聚脱氧核苷酸（Ｎ－ＯＤＮ）处理人急性红白血病细胞株Ｋ５６２细胞，结果造成了细胞恶性行为的改变。表现为细胞生长减慢、Ｐ２１０蛋白表达受抑、ＤＮＡ的合成减少及集落形成能力下降，从而证明了反义核酸在癌基因表达上的调控和抑制细胞恶性行为的作用。

线粒体途径在慢性髓系白血病信号转导中的作用

本研究旨在探讨线粒体途径在慢性髓系白血病(CML)信号转导中的作用。用脂质体转染法将bcr3/abl2反义寡核苷酸(ASO)导入CML细胞系K562细胞中;用MTT法检测bcr3/abl2ASO对K562细胞活力的影响;流式细胞术(FCM)分析测定细胞凋亡率;荧光染料罗丹明123染色分析细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的变化;Westernblot检测线粒体凋亡信号转导通路相关蛋白细胞色素C(CytC)的表达。结果表明,2μmol/Lbcr3/abl2ASO与K562细胞作用24小时后,可明显抑制K562细胞活力,其抑制率为65.7%;可诱导细胞凋亡,凋亡率为16.9%;可下调K562细胞线粒体ΔΨm,有38.33%的细胞出现线粒体ΔΨm下降;可增强CytC的表达,激光光度扫描仪测得其表达光密度值由2.33±0.3升高到4.78±0.1。结论:线粒体途径通过介导凋亡信号而在CML信号转导中发挥重要作用。

MAPK反义寡核苷酸对K562细胞系的增殖抑制作用

目的 :探讨MAPK在慢性髓细胞白血病 (CML)信号转导中的作用及其作用机制 .方法 :用脂质体转染法将MAPKASO导入K5 6 2细胞中 ,通过集落形成、DNA合成、蛋白质含量和MAPK活性的变化检测MAPKASO对K5 6 2细胞的作用 .结果 :MAPKASO可明显抑制细胞集落形成、DNA合成、蛋白质含量和MAPK活性 ,其抑制率分别为 4 6 .1% ,5 7.1% ,4 3.2 %和 6 2 .0 % ,与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) .结论 :MAPK在CML信号转导中起重要作用 。

bcr3/abl2和c-myb基因反义寡核苷酸联用对慢性髓细胞白血病的作用

目的 探讨多癌基因反义寡核苷酸对慢性髓细胞白血病 (CML )的作用及其相互作用的影响 .方法 用台盼蓝拒染、集落形成、逆转录 -多聚酶链反应及流式细胞仪技术研究反义寡核苷酸对 K5 6 2细胞株和 CML 骨髓细胞的作用 .结果 c- myb反义寡核苷酸通过促进 CML 细胞凋亡 ,发挥对 bcr/abl反义寡核苷酸的协同作用 .结论 多癌基因反义核酸的联合应用可为

拓朴替康诱导K562细胞凋亡时p38MAPK的变化

目的:探讨拓朴替康诱导K562细胞凋亡的相关信号转导途径。方法:0.1μmol/L的拓朴替康处理K562细胞24h时,通过流式细胞仪(FCM)和片段DNA含量检测研究拓朴替康对靶细胞的促凋亡活性;采用免疫印迹法和γ-32P掺入法测定拓朴替康对p38MAPK含量及其活性的影响。结果:FCM检测发现在K562细胞周期图中出现一凋亡峰,凋亡细胞比率为16.9%,凋亡细胞特有的片段DNA含量为(45.9±1.0)%;p38MAPK含量及其活性明显升高,分别为对照组的4.9倍和4.1倍。结论:拓朴替康诱导K562细胞凋亡可能通过激活p38MAPK来实现。

丝裂原活化蛋白激酶在慢性粒细胞白血病发病中的作用

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在慢性粒细胞白血病(CML)发病中的作用及其作用机理。方法:用脂质体转染法将MAPK反义寡核苷酸(ASO)导入CML细胞中,通过细胞集落形成、蛋白质含量、MAPK活性和MAPK表达的变化检测MAPK ASO对CML细胞的作用。结果:MAPK ASO可明显抑制细胞集落形成、蛋白质含量、MAPK活性和MAPK表达,其抑制率(%)分别为41.6、46.4、50.0和43.2,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论:MAPK在CML发病中起重要,有可能成为治疗CML的新靶点。

p38MAPK在慢性髓细胞白血病信号转导中的作用

目的:探讨p38MAPK在慢性髓细胞白血病(CML)信号转导中的作用。方法:用脂质体转染法将bcr3/abl2反义寡核苷酸(ASO)导入K562细胞中,通过细胞凋亡、p38MAPK活性、p38MAPK表达和p38MAPK含量的变化,检测p38MAPK在CML信号转导中的作用。结果:bcr3/abl2ASO作用K562细胞24h后凋亡细胞比率、p38MAPK活性、p38MAPK表达和p38MAPK含量明显增加,分别为对照组的3.6、3.3、2.7和1.8倍,与对照组之间均差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:p38MAPK通过介导凋亡信号而在CML信号转导中起重要作用。

反义核酸对白血病细胞化疗药物敏感性的影响

1目的 解决白血病化疗过程中药物的副作用和白血病细胞的抗药性。2方法 将人工合成的与 C-myb基因起始密码子 2～ 7互补的反义寡聚脱氧核苷酸 (ASO)和化疗药物阿糖胞苷 (Ara- c)联合作用于急性粒细胞白血病 (AML)细胞 ,观察其对细胞活力、DNA合成、集落形成和凋亡的影响。 3结果 ASO可明显提高白血病细胞对化疗药物的敏感性。 4结论

bcr基因重排与白血病

Ｐｈ染色体为慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的特异标记染色体，存在于９５％的ＣＭＬ患者中。近年来随着分子生物学的进展，已阐明Ｐｈ染色体所导致的ｂｃｒ／ａｂｌ基因重排是某些白血病发病的关键因素。本文复习了国内外有关文献。

广东汉族人群HLA-ABDR基因频率分析

目的 检测广东汉族人群HLA -A ,B ,DRB1基因频率 ,分析该人群HLA等位基因多态性及其特点。方法 肾移植、骨髓移植供者 4 0 4例 ,抗凝血提取DNA ,半量全自动PCR -RSSO分型检测HLA -A ,B ,DRB1基因型。结果 在中分辨水平检出HLA -A等位基因 15个 ,HLA -B等位基因 31个 ,HLA -DRB1等位基因 13个。广东汉族人群HLA -A 11(0 .3342 ) ,A 0 2 (0 . 30 87) ,A 2 4 (0 . 2 2 16 ) ;HLA -B 6 0 (0 16 81) ,B 4 6 (0 . 16 81) ;HLA-DRB1 0 9(0. 175 5 ) , DRB1 15 (0 .14 90 ) ,DRB1 12 (0 . 1192 ) ,DRB1 14 (0 1192 ) ,DRB1 0 4 (0 .10 6 7)具有较高的基因频率分布 (>0. 10 )。Hardy -Weinberg平衡检验 :HLA -A(χ2 =6 0 .35 ,υ =5 4 ,P >0 1) ,B(χ2 =173. 6 7,υ =4 6 5 ,P >0 . 1) ,DRB1(χ2 =78. 4 6 ,υ =78,P >0 . 5 ) ,期望值和观察值吻合良好。结论 广东汉族群体HLA基因具有较为丰富的多态性 ,该人群HLA -A、B、DRB1等位基因处于遗传平衡状态 ,其基因频率分布具有地区性遗传特征。

Survivin、caspase-3在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

背景与目的:Survivin是新近发现的凋亡抑制因子,在肿瘤的发生中起重要作用。Survivin在多种肿瘤组织广泛表达而在正常成人组织不表达,可直接抑制caspase-3和caspase-7活性。本研究旨在通过检测survivin、caspase-3蛋白在不同恶性度非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinslymphoma,NHL)组织中的表达,探讨二者与NHL发病的关系及其临床意义。方法:应用免疫组织化学EnVisionsystem法检测NHL患者组织标本survivin、caspase-3蛋白的表达。结果:Survivin及caspase-3在54例NHL中的阳性率分别为51.9%(28/54)和83.3%(45/54)。Survivin在低度恶性组NHL中的表达(19.0%,4/21)低于中-高度恶性组(72.7%,24/33),两组之间有显著性差异(P<0.05);caspase-3表达也有同样规律。Survivin及caspase-3的共同表达率为46.3%(25/54)。结论:NHL中有survivin过度表达。

bcr_3/abl_2反义寡核苷酸诱导慢性髓细胞白血病凋亡作用的研究

目的 探讨癌基因bcr_3/abl_2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASO)对慢性髓细胞白血病(CML)的作用及其作用机理.方法 通过形态学观察、流式细胞仪(FCM)检测和片断DNA含量测定等技术研究ASO对15例初发CML的作用.结果 bcr_3/abl_2 ASO(ASO-ba)可诱导CML细胞凋亡.结论 ASO技术可为CML治疗提供一项新手段.

全身热疗系统治疗恶性血液病15例:加温、测温和控温技术的安全、顺应及有效性观察

目的:探讨恶性血液病患者对于全身加温治疗的耐受性,验证全身加温治疗的顺应性、安全性及有效性。方法:实验于2005-04/2005-07在南方医科大学珠江医院血液科完成。选择恶性血液病患者15例,均自愿参加观察。应用广东威尔医学科技股份有限公司开发研制的WELLRAY光子热疗智能系统,对患者进行全身加温治疗。治疗前保留导尿,外周静脉插管,联接心电监护,固定体表等温度感受器,关舱加温至直肠内温度40～41℃,保持恒温2h,同时监测多部位体表、空气、治疗床的温度变化,同时行心电监护,加温治疗前及治疗24h后行血液常规和生化等各项指标检查。于全身热疗前及治疗24h后分别应用Karnofsky(KPS)评分评价患者的生活质量,评分范围0～100分,100分正常,无症状及体征;10分病危,临近死亡;0分死亡。结果:纳入患者15例,全部进入结果分析,无脱落。①15例恶性血液病患者均能耐受40℃,120min的加热过程,具有良好的顺应性。②全身加温治疗24h后,患者的临床症状、体征明显好转,KPS评分平均提高10分。③全身加温治疗前及治疗24h后,患者的血常规和生化等检查指标比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:全身热疗系统可以用于恶性血液病的全身加热治疗,治疗过程是安全的,值得在临床上进一步推广应用;而且能显著提高恶性血液病患者的生活质量及临床症状体征,初步显示其有效性,但长期疗效评价正在进行中。

21例造血干细胞移植术后医院感染临床分析

目的分析造血干细胞移植术后医院感染的发病率和高危因素,探讨其防治策略。方法回顾分析21例造血干细胞移植术后医院感染的临床资料。结果21例患者中15例发生医院感染,感染率为71.4%;检查分离出细菌15株,真菌4株;高危因素为各种侵入性操作、激素和抗菌药物的不合理应用等。结论造血干细胞移植术后医院感染发生率高、预后差,除减少各种侵入性操作、合理应用激素和抗菌药物外,关键在于早期发现与治疗,更重要的是注重全环境保护。

慢性髓系白血病反义技术治疗的新进展

慢性髓系白血病反义技术治疗的新进展尚振川１综述孙秉中２审校慢性髓系白血病（ＣＭＬ）是髓系干细胞起源的恶性增殖的克隆性疾病，占白血病的２０％，占年发病率的１／１０万［１］。目前化疗和放疗是治疗ＣＭＬ的主要方法，目的在于缓解症状。骨髓移植（ＢＭＴ）在慢粒...

广东汉族人群杀伤免疫球蛋白样受体基因的表达频率

目的检测杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)基因在广东汉族人群中的分布。方法对96例广东汉族以SSP法检测其KIR表型,统计不同KIR基因在人群中的表现频率,并与白种人、北印度人、日本人比较。结果不同KIR的表现表率分别为:2DL1(0.85)、2DL2(0.12)、2DL3(0.58)、2DL4(1)、2DL5(0.24)、3DL1(0.96)、3DL2(1)、3DL3(1)、2DP1(0.97)、2DP2(0.98)、2DS1(0.10)、2DS2(0.30)、2DS3(0.02)、2DS4(0.28)、1D(0.65)、2DS5(0.19)、3DS1(0.23)。比较同一HLA配体相应的KIR,抑制性KIR频率均高于活化性KIR。与白种人和北印度人相比,除KIR2DS4外,广东汉族人群的活化性KIR频率均较低。结论不同KIR基因在广东汉族人中有不同的表达频率。与其他人种比较,KIR基因的分布有着明显的种族差异。