外泌体调节神经炎症作用机制的研究进展

神经炎症与多种中枢神经系统(central nervous system,CNS)疾病的发病机制有关。外泌体是一种来源丰富、结构和功能具有高度特异性的细胞外囊泡,可通过调节神经炎症小体NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3、炎症因子、神经胶质细胞活化状态以及血脑屏障完整性促进或抑制神经炎症。外泌体可作为多种CNS疾病的生物标志物用来辅助疾病的早期诊断,对疾病早期预防具有潜在价值。此外,外泌体还可作为药物载体靶向递送药物到脑实质,其工程化水平对CNS疾病具有潜在治疗效果。本文就外泌体的形成、调节神经炎症的作用机制以及对CNS疾病的治疗作用研究进展进行综述,以期能拓展神经炎症疾病的治疗思路。

从“虚损生积”论治真性红细胞增多症

真性红细胞增多症是以红细胞系统异常增殖为主的一种慢性骨髓增殖性疾病,临床多表现为面色潮红如醉酒貌、皮肤黏膜红紫、眼结膜充血、皮肤瘙痒,还具有血栓反复形成、出血倾向,严重者可导致心肌梗死、中风、骨髓纤维化、白血病等。中医认为该病属于“积聚”“血积”范畴。尚晓玲教授归纳了临床治疗真性红细胞增多症的经验,从“虚损生积”角度提出了自己的见解,总结出了三个重要中医病机,即为:精亏气虚,虚损生积;因积生痹,血瘀痰阻;痹阻毒蕴,瘀毒互结,尤其重视虚损生积这一环节,确立了补虚消积,解毒化瘀的治法,遣方用药方面多在归肾丸、二至丸基础上加减化裁,随症加减,达到良好临床效果,为中医药治疗真性红细胞症临床诊疗提供了思路。

益肾达络饮缓解EAE模型小鼠神经系统炎症的机制研究

目的研究益肾达络饮抑制β-制动蛋白1(β-arrestin1)表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠炎症因子、环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨益肾达络饮治疗EAE的机制。方法采用随机数字表法将60只小鼠分为正常组、模型组、中药组(益肾达络饮20 g/kg)、阳性对照组(醋酸泼尼松3.9 mg/kg)、β-arrestin1 siRNA腺相关病毒(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠均制备EAE模型。AAV-β组、AAV-β+中药组小鼠通过尾静脉注射AAV-β干扰β-arrestin1蛋白的表达。造模第8天开始每天灌胃相应药液/生理盐水1次,连续14 d。检测小鼠神经功能评分,观察小鼠脑和脊髓组织的病理形态学变化,检测小鼠血清中炎症因子[白细胞介素2(IL-2)、IL-23、γ干扰素(IFN-γ)]水平,检测小鼠脑和脊髓组织中β-arrestin1、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠神经功能评分、血清中炎症因子水平以及脑、脊髓组织中β-arrestin1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);脑和脊髓组织中PKA、CREB、cAMP蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);脑和脊髓组织中大部分神经元可见胞体皱缩深染及炎症细胞聚集现象,且存在不同程度的脱髓鞘改变。与模型组比较,各给药组小鼠神经功能评分、脑和脊髓组织的病理形态学变化及大部分指标(除AAV-β组脑组织中的CREB、cAMP蛋白外)均显著逆转(P<0.05或P<0.01)。与AAV-β组比较,AAV-β+中药组小鼠神经功能评分、血清中IFN-γ水平、脊髓中β-arrestin1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),脑与脊髓组织中PKA、cAMP蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论益肾达络饮可能是通过抑制中枢神经系统中β-arrestin1的表达,进而激活cAMP/PKA/CREB信号通路,减轻神经系统炎症,最终缓解EAE的症状。

参茸复方对自身免疫性脑脊髓炎小鼠DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号通路的影响

目的:探讨参茸复方对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号通路的影响。方法:将60只C57 BL/6雌性小鼠分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松(3.9 mg/kg)组及参茸复方高(54.6 g/kg)、中(27.3 g/kg)、低(13.65 g/kg)剂量组,除正常对照组外,剩余5组均制备EAE模型,免疫7 d后灌胃给药,正常对照组和模型组均灌胃相应体积生理盐水,给药体积均为10 mL/kg,连续给药14 d。自免疫当天起,每日对小鼠进行神经功能评分;HE染色检测各组小鼠脑和脊髓组织的细胞形态及炎性反应;免疫组化和Western Blotting检测各组小鼠脑和脊髓中DOR、β-arrestin1、Bcl-2蛋白表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠神经功能评分显著降低(P<0.05或P<0.01)。组织病理学检查结果显示,模型组脑和脊髓组织有大量炎性细胞聚集,核固缩明显,各给药组脑和脊髓组织病理改变均有不同程度改善。免疫组化及Western Blotting结果显示,与模型组比较,除参茸复方低剂量组外各给药组脑和脊髓组织DOR蛋白表达显著升高,β-arrestin1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:参茸复方具有缓解EAE进展的作用,其机制与DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号通路有关。

益肾达络饮对DPCPX干预下EAE小鼠H3K9ac、H4K5ac表达的影响

目的观察益肾达络饮在腺苷A1受体(adenosine A1 receptor,A1AR)抑制剂1,3-二丙-8-环戊黄嘌呤(8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine,DPCPX)干预下对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的治疗作用及对组蛋白H3第9位赖氨酸乙酰化(histone H3 lysine residue 9 acetylation,H3K9ac)、组蛋白H4第5位赖氨酸乙酰化(histone H4 lysine residue 5 acetylation,H4K5ac)的影响。方法将60只C57BL/6J雌性小鼠随机平均分成6组。除正常对照组外,其余组均制作EAE模型。从造模第8天开始,模型组、DPCPX组予0.9%氯化钠溶液灌胃,西药组予醋酸泼尼松混悬液灌胃,中药组、DPCPX+中药组予益肾达络饮药液灌胃,连续给药14 d。每日记录各组小鼠的神经功能评分,运用Western Blot检测各组小鼠脑及脊髓中A1AR、H3K9ac、H4K5ac的表达水平,免疫组化观察脑及脊髓中H3K9ac、H4K5ac的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组最高平均神经功能评分与第21天评分均显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药组、DPCPX+中药组、西药组最高平均神经功能评分与第21天评分均显著下降(P<0.05)。Western Blot结果显示,与正常对照组比较,模型组脑与脊髓组织中A1AR显著下降(P<0.01),H3K9ac、H4K5ac显著升高(P<0.05);与模型组比较,DPCPX组脑中A1AR显著下降(P<0.05),脑与脊髓中H3K9ac、H4K5ac显著升高(P<0.05);中药组脊髓中A1AR表达量显著升高(P<0.05),脑中H3K9ac、H4K5ac显著下降(P<0.05);DPCPX+中药组脑与脊髓中A1AR显著升高(P<0.05),脑中H3K9ac显著升高(P<0.05),H4K5ac显著下降(P<0.05),脊髓中H4K5ac显著升高(P<0.05);西药组脊髓中A1AR显著升高(P<0.01),脑中H3K9ac显著下降(P<0.01),H4K5ac显著升高(P<0.05);免疫组化显示,与正常对照组比较,模型组脑与脊髓组织H3K9ac、H4K5ac表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,DPCPX组脑与脊髓组织H3K9ac、H4K5ac表达量显著升高(P<0.05),中药组、西药组脑与脊髓组织H3K9ac、H4K5ac表达量显著降低(P<0.05)。结论益肾达络饮可能通过活化A1AR,抑制组蛋白H3、H4的乙酰化水平,调节EAE小鼠的表观遗传修饰,从而降低EAE小鼠的神经功能评分。

星形胶质细胞的区域异质性对多发性硬化髓鞘再生的影响

多发性硬化(MS)是发生于中枢神经系统的脱髓鞘疾病,髓鞘再生终止所引起的神经变性是疾病进展的重要原因。星形胶质细胞(ASTRs)在髓鞘再生中发挥着重要作用,其在灰质和白质存在明显的区域异质性。本文对ASTRs在健康和反应性状态下的区域异质性,以及这种异质性对MS髓鞘再生的影响进行综述,以期为髓鞘再生的治疗提供思路。

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎MCP-1的影响

[目的]研究益肾达络饮对髓鞘蛋白脂质蛋白多肽(PLP139-151)诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内趋化因子(MCP-1)的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。[方法]采用免疫组化、地高辛标记的寡核苷酸探针原位杂交技术熏测定各组小鼠中枢神经组织中MCP-1蛋白和MCP-1mRNA的含量。[结果]正常组与模型组、激素组、中药组MCP-1蛋白、MCP-1mRNA含量相比较均有极显著性差异(P<0.01),中药组、激素组与模型组MCP-1蛋白、MCP-1mRNA含量相比较均有极显著性差异(P<0.01);中药组、激素组相比较有显著性差异(P<0.05)。[结论]益肾达络饮在蛋白、分子水平能降低MCP-1含量,其对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能与下调MCP-1熏抑制单个核细胞的趋化性熏减轻炎性浸润,抑制局部炎症有一定关系。

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎β淀粉样前体蛋白的影响

目的:研究中药复方益肾达络饮对PLP139-151诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内轴突病变标记物β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。方法:采用免疫组化技术,测定各组小鼠中枢神经组织中APP蛋白含量。结果:APP蛋白表达正常组与模型组、激素组、中药组比较均有极显著性差异(P值均<0.01),模型组与中药组比较有极显著性差异(P值均<0.01),与激素组比较有显著性差异(P<0.05),激素组与中药组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:EAE小鼠APP表达升高,提示存在轴索损害。醋酸泼尼松、益肾达络饮均降低EAE小鼠中枢神经组织内APP的表达,且益肾达络饮优于醋酸泼尼松。益肾达络饮自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能与下调APP、抑制轴突变性有一定关系。

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠p38的变化及益肾达络饮的影响

目的:研究中药复方益肾达络饮对PLP139-151诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内p38的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。方法:采用免疫组化技术,测定各组小鼠中枢神经组织中p38蛋白含量。结果:p38表达正常组与模型组、激素组、中药组比较均有极显著性差异(P值均<0.01);与模型组比较,激素组有显著性差异(P<0.05),中药组有极显著性差异(P<0.01);激素组与中药组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:EAE小鼠p38表达升高,提示EAE病变过程中可能激活p38MAPK信号转导通路。醋酸泼尼松、益肾达络饮均能降低EAE小鼠中枢神经组织内p38的表达,且益肾达络饮优于醋酸泼尼松。益肾达络饮对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能通过下调p38,抑制p38MAPK活化,从而改善机体免疫紊乱。

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠CREB、P-CREB表达的影响

目的观察中药复方益肾达络饮治疗的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经系统中c AMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平,探讨其对小鼠中枢神经损伤的可能作用机制。方法建立小鼠EAE动物模型,采用蛋白免疫印迹技术检测正常对照组、模型组、中药组、激素组、中药加激素组、抑制剂组小鼠脑和脊髓中CREB、P-CREB的表达量,并计算CREB磷酸化水平(P-CREB/CREB)。结果在脑组织中,中药组P-CREB相对表达量及CREB磷酸化水平(P-CREB/CREB)与其余各组比较均显著升高(P<0.01);中药组、中药加+激素组和激素组CREB磷酸化水平依次降低(两两比较P<0.01)。在脊髓组织中,中药组P-CREB相对表达量均高于模型组(P<0.01)、对照组(P<0.05)和抑制剂组(P<0.05);中药组、中药+激素组及激素组CREB磷酸化水平均高于模型组(P<0.05),这3组之间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益肾达络饮对EAE的治疗作用可能与升高CREB的磷酸化水平有关。

益肾达络饮对EAE小鼠NgR、Gap-43表达的影响

目的:运用形态学检测技术,探讨益肾达络饮对EAE小鼠中枢神经损伤后神经再生的作用。方法:采用免疫组化方法测定各组小鼠脑组织中NgR、Gap-43的含量,旨在了解NgR在EAE发生后的作用和益肾达络饮对神经再生的作用情况。结果:NgR表达正常组和中药组差异有统计学意义(P<0.05),与其余组差异有极显著统计学意义(P值均<0.01);模型组和激素组、中药组均差异有极显著统计学意义(P值均<0.01);激素组和中药组差异无统计学意义,提示模型组神经再生受抑制程度明显;Gap-43表达在正常组和模型组差异无统计学意义,正常组和激素组、中药组差异有极显著统计学意义(P值均<0.01);模型组和中药组、激素组差异有极显著统计学意义(P值<0.01);激素组和中药组差异有极显著统计学意义(P值<0.01)。结论:益肾达络饮有一定程度促进轴突再生的作用且优于激素组。

房地产品牌的网络营销模式探讨

网络品牌有两个方面的含义:一是通过互联网手段建立起来的品牌;二是互联网对网下既有品牌的影响。我国房地产品牌的网络营销以及网络品牌建设应主要采取垂直类专业性房地产网站营销策略、房地产品牌网络公关策略、房地产品牌网络富媒体广告策略以及房地产品牌搜索引擎优化策略等。

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎IFN-γ、IL-4的影响

采用ELISA方法,观察益肾达络饮对PLP139151诱导的高敏感品系SJL小鼠自身免疫性脑脊髓炎的症状、中枢神经系统内细胞因子IFNγ、IL4的影响。结果发现益肾达络饮对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能与抑制局部炎症,促进Th1/Th2比例平衡,有一定关系。

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠ICAM-1的影响

目的:研究益肾达络饮对PLP139-151诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内趋化因子ICAM-1的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。方法:采用免疫组化、地高辛标记的寡核苷酸探针原位杂交技术,测定各组小鼠中枢神经组织中ICAM-1蛋白及mRNA的含量。结果:ICAM-1蛋白及mRNA表达一致性较好,模型组、激素组、中药组与正常组相比较均有极显著性差异(P值均<0.01),模型组与中药组比较有极显著性差异(P值均<0.01),模型组与激素组比较有显著性差异(P值均<0.05),激素组与中药组比较没有差异(P值均>0.05)。结论:益肾达络饮在蛋白、分子水平能降低ICAM-1含量,其对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能与下调ICAM-1,抑制抑制内皮细胞与白细胞的黏附,干扰自身反应性T细胞及活化巨噬细胞的迁移有关。

论在线交易中的消费者权益保护

电子商务市场是建立在消费者信赖和认可基础上的,而目前有8成以上的网民认为“网上退换货没有保障”和“付款的安全性无法保证”。在系统的电子商务法尚未出台之前,当务之急是如何结合电子商务发展的实际情况,完善《消费者权益保护法》,真正实现对消费者权益的法律保护。

汽车品牌的网络营销模式探讨

据调查，在美国有75％的消费者会在购车之前，先去网络上浏览产品的相关信息，而其中45％的用户会直接到销售店去购买汽车。在国内大中城市，汽车消费者购车之前也首先从互联网上查找需求信息。由此可见网络是汽车消费者最重要的信息来源。

汽车品牌的网络营销

在美国有75％的消费者会在购车之前先去网络上浏览产品的相关信息，其中45％的用户在查阅了汽车产品的信息后，会直接到销售店购买汽车。我国的汽车消费者需要信息时，首先想到的也是在互联网上查找。可见网络是汽车消费者重要的信息来源，各大汽车制造商对网络营销也格外重视。但是我国的汽车行业目前还没有形成一个规范、高效、普遍应用的网络营销模式，对汽车品牌网络营销的研究还较少。

大鼠高脂饮食、颈动脉电击损伤复合因素所致动脉粥样硬化模型的研究

目的建立一个简单易行、价格低廉、有典型病理改变的大鼠动脉粥样硬化模型。方法通过对大鼠4、6、8、12周取材,进行颈动脉HE染色以及用ELISA方法测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C指标来判断模型制备情况。结果血脂:从实验4周末开始,假手术组、钳夹组、电击1组、电击2组、电击3组大鼠血清TC、TG和LDL-C均明显高于正常组(P <0.05),HDL-C较正常组明显降低(P <0.05)。病理变化:电击2组可以见到动脉内皮细胞脱落,大量平滑肌细胞移行至内膜下,血管壁向管腔内凸出,形成斑块,呈现典型的AS病理变化。结论利用高脂饮食、维生素D_2负荷加颈动脉电击损伤可以建立动脉粥样硬化模型。

论WTO规则与我国民族自治地方立法的发展

2001年12月11日我国正式成为WTO的成员国。建立健全与WTO规则和我国加入WTO承诺相一致的法律体系是加入WTO后的重要任务。对于民族地区而言,应当按照"三个代表"的要求,正确分析加入WTO给中国少数民族和民族地区带来的机遇和挑战,使得民族自治地方立法和中央立法保持一致,符合WTO规则和我国加入WTO的承诺,不断提高立法质量,以促进民族地区政治、经济、文化的发展。