靶标酶在研究杀虫活性构效关系中的应用

运用已建立的乙酰胆碱酯酶 (ACh E)活力分析规范化筛选模型 ,研究 N-甲基取代苯基氨基甲酸酯类化合物和含硅氨基甲酸酯类新系列化合物与 ACh E酶抑制中量 (I50 )构效关系的规律 ,并以 CASAR软件进行 QSAR分析 ,所得结果迅速反馈给化学合成 ,为高效低毒新杀虫剂的创制提供有益的信息和科学依据。

害虫拒食行为调控物质的筛选模型研究

以亚洲玉米螟 (Ostrinia furnacalis)幼虫为试材 ,以电生理技术顶端记录法 ,确定栓锥感受器是拒食活性的靶标器官 ,建立拒食活性物质规范化的筛选模型 ,作为检测合成或半合成的克罗烷二萜类化合物的拒食活性。结果表明 :既可抑制其糖电位诱发侧栓锥感受器的脉冲频率 ,亦可直接诱发中栓锥感受器特定细胞引起的脉冲频率变化 ,且与拒食行为生测法的结果基本吻合 ,成正相关。利用离体的味觉感受靶标器官的电生理方法 ,可以定性或定量检测拒食活性 ,研究构效关系 ,具有快速、灵敏。

酯酶同功酶在分析亚洲玉米螟抗药性中的应用

以聚丙烯酰胺凝胶电泳法对室内选育的亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis(Guenèe))抗杀灭菊酯和抗呋喃丹品系的酯酶同功酶进行分析,并与感性品系比较,差异十分明显,为鉴别害虫抗药性的遗传变异提供了有价值的依据,并从方法学的几个侧面进行探讨,为广泛研究害虫抗药性机理做一些基础工作。

靶标酶AChE作为筛选模型的规范化研究

以美洲大蠊（ＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａＬ）中枢神经系统的乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）作为筛选模型，采用Ｇｏｒｕｎ等改进的Ｅｌｌｍａｎ比色法，建立测定ＡＣｈＥ比活力的条件并改进，使方法规范化，在国内外尚无报导．并且初步测定２０个Ｎ－甲基取代苯基氨基甲酸脂类化合物对ＡＣｈＥ抑制活力，其差异显著，可用于追踪、检测和评估生物活性．此法的优点是灵敏度高、重复性强、省药省时，可为定向合成靶标的抑制性物质和构效关系的研究提供信息和科学依据．

电生理技术检测植物源信息素的拒食效应研究

以电生理技术首次研究亚洲玉米螟幼虫味觉感受器,通过其糖电位变化追踪几种植物源(如了哥王、白藓根、黄杜鹃、九里香)中活性组分的拒食效应.此法灵敏度高、仅需少量药样及试虫,与生物测定的拒食作用相吻合.作为定性检测手段是可行的.天然产物中具有生理活性物质,是潜在的源泉,有待探索与利用.现代化电生理技术用于此领域,尚有广阔的前景.

美洲大蠊初孵若虫在杀虫活性研究中的应用初探

本文运用并改进的瓶底药膜法,测定了灭多威、硫双灭多威和14个含硅氨基甲酸酯新化合物对美洲大蠊初孵若虫的触杀活性(LC_(50)),并且在确认了若虫之间的生化均一性的基础上,对胆碱酯酶以活体(in vivo)与离体(in vitro)方法测定活力的最佳反应体系及化合物的抑制作用从而提出初孵若虫作为筛选与毒理研究模型的可行性。

无公害农药——昆虫几丁质抑制剂

纵观农药开发及应用的历程,合成的有机化合物作为杀虫剂,因易工业化,成本低,药效高,而在植保中发挥了重要的作用。但同时也因品种少或滥用而走向其反面。近代热衷于安全性(或无公害)活性物质的探索与研制,已成为克服其它化学农药弊端的必然趋势。

紫背金盘提取物对四种鳞翅目害虫作用活性的初步研究

紫背金盘(A(?)(?)(Makine))提取物对菜青虫(P(?)(?)(L.))小菜蛾(P(?)xylostella(L.))斜纹夜蛾(Prode(?)ia Iit(?)(Fabricius))和粘虫(M(?) aeparola (Walker))的幼虫均有显著的抑制生长发育和拒食作用,甲醇提取物及其氯仿提取物对五龄菜青虫的拒食中浓度(AFC_(50))分别为0.31％和0.12％;抑制生长发育有效中量(ED_(50))分别为1.36mg/g和0.34mg/g.氯仿萃取物对3—4龄小菜蛾的AFC_(50)为0.23％,EC_(50)=为0.29％(饲喂法)和0.22％(点滴法)。杀虫活性成分是易溶于氯仿的弱极性物质,分离提纯工作仍在进行中。

光活化多炔类化合物对蚊幼虫的毒力

采用自制的光活化实验装置 ,测定了 11个合成的多炔类化合物对致倦库蚊Culexquinque fasciatus 4龄幼虫的光活化毒力 ,发现部分化合物在近紫外光照射条件下 ,能明显地提高光活化毒杀效应 ,测得化合物 5(1 苯基 4 (3,4 亚甲基二氧 )苯基 丁二炔 )光照与未光照处理LC50 分别是0 35μg/mL和 8 89μg/mL。实验中发现蚊虫先接触药后 ,再进行光照处理 ,才能较好地发挥毒效 ,而且毒杀效应与光照时间呈正相关。模拟田间试验表明 ,太阳光能显著提高化合物 5毒杀蚊幼虫的药效。利用抗氧化剂进行猝灭作用试验 ,间接地证明化合物 5的光活毒杀机理是与过氧化作用有关。分析结构与活性关系 ,发现二苯基 丁二炔衍生物比二烷基取代丁二炔活性高 ,苯基上不同取代基也影响光活毒杀效果 ,它们的活性顺序是 :亚甲基二氧基 >甲氧基 >邻硝基 >间硝基>

一类新型酰基脲化合物的设计、合成及生物活性

设计并合成了21个新型含呋喃环的双酰基脲化合物，经IR、1HNMR、MS和元素分析确证其结构．初步生物活性测定结果表明，该类化合物具有几丁质抑制活性．

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟Na^+-K^+-ATPase的抑制作用

以棉铃虫 H elicoverpa armigera和亚洲玉米螟 Ostrinia furnacalis为试虫 ,建立 Na+- K+-ATPase最佳反应系统 ,研究典型光活化毒素 α-三噻吩 (简称 α- T)对 Na+- K+- ATPase的影响。棉铃虫 Na+- K+- ATPase活力最佳测试条件为酶源蛋白浓度 6μg/ m L ,反应温度 35～ 4 0℃ ,反应时间6min;亚洲玉米螟则为酶源蛋白浓度 8μg/ m L,反应温度 35℃ ,反应时间 6min。近紫外光照 (30 0～4 0 0 nm )对棉铃虫和亚洲玉米螟离体 Na+- K+- ATPase活力基本没有影响 ,但对活体活力有很强的抑制作用。光照和无光照条件下 ,α- T对两种昆虫离体和活体 Na+- K+- ATPase活力均有不同程度的抑制作用。光照组 α- T对亚洲玉米螟 Na+- K+- ATPase的抑制率高于无光照组 ,且处理浓度或剂量越高 ,其抑制率越大 ;对棉铃虫 Na+- K+-

克罗烷二萜的昆虫拒食活性及构效关系研究

以饲料柱称重法测定25个克罗烷二萜新化合物对亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis（Guenee）5龄幼虫的拒食活性，并进行构效关系分析。结果表明：立体效应对拒食活性意义重大；C9边链、C18位的酯基对活性具有一定影响；C4处的螺环氧结构看来并非活性所必需。且在250μg／mL时选择法测定中，活性最高的化合物拒食率为57．9％，而500μg／mL时非选择法测定中拒食率为43．2％。

美洲大蠊Na^+-K^+-ATPase作为筛选靶标的初步研究

以美洲大蠊 (Periplanata americana)雄性成虫的中枢神经系统为试材 ,对 Na+ -K+ - ATPase作为农药筛选靶标进行了初步研究 ,表明 Na+ - K+ - ATPase活力测定的最适反应条件是 :酶源蛋白浓度 8.5μg/ m L,温度 30℃ ,p H7.4 ,反应时间 15min。同时以最佳反应系统初步研究了几种拟除虫菊酯 (南开菊酯、氯氰菊酯、溴灭菊酯、氰戊菊酯、二氯苯醚菊酯、胺菊酯 )对 Na+ - K+ - ATPase离体活性的影响 ,结果显示出不同程度的抑制作用。并对其用作农药筛选靶标的可能性进行了探讨。

光活化毒素α-T对棉铃虫和亚洲玉米螟离体水解酶系的影响

研究了典型光活化毒素α-T对棉铃虫和亚洲玉米螟羧酸酯酶 (Car E)、酸性磷酸酯酶 (AP)、碱性磷酸酯酶 (ALP)等水解酶离体活性的影响 .结果表明 ,高浓度 α-T可使棉铃虫 Car E、ALP和亚洲玉米螟 ALP活性降低 ,诱导棉铃虫 AP活性升高 ,但不影响亚洲玉米螟 Car E、AP活性 .光照下高浓度 α-T对两种昆虫 Car E、AP、ALP离体活性均有抑制作用 .

抑太保对亚洲玉米螟表皮酚氧化酶及几丁质酶活力的影响

采用饲喂法,抑太保(Atabron,IKI-7899)对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis幼虫的LC_(50)约是灭幼脲Ⅰ号的1/10。体内和体外实验表明,抑太保及灭幼脲Ⅰ号均能导致幼虫表皮酚氧化酶及几丁质酶活力显著增高。与对照相比,饲喂抑太保及灭幼脲Ⅰ号,五龄幼虫表皮酚氧化酶活力分别增长276.00％和28.00％、几丁质酶活力分别增长42.25％和13.62％;腹腔注射抑太保及灭幼脲Ⅰ号,五龄幼虫表皮酚氧化酶活力分别增长74.86％和37.98％、几丁质酶活力分别增长68.18％和28.86％。我们认为,酚氧化酶及几丁质酶活力的增高应是抑太保及灭幼脲Ⅰ号导致玉米螟死亡的重要原因。

猪毛蒿精油光活化抑制稗草生长及作用机理

采用小杯法,测定猪毛蒿精油在0 1～10 0mg/L质量浓度范围内,对稗草光活化抑制根、茎伸长的效果.结果表明:光照与非光照猪毛蒿精油均表现对稗草根伸长的抑制活性,光照显示更强抑制效果,特别对茎长的抑制活性更为显著.利用生化酶学方法,测定精油对稗草细胞保护酶活力的影响.结果表明:在0 1～10 0mg/L浓度范围内,猪毛蒿精油能诱导激活GST、GSH Px和POD,而且光照可显著提高3种酶的活力.但对SOD则具有抑制活性.电镜观察,猪毛蒿精油可引起稗草愈伤组织细胞结构的严重损伤.

追踪检测拒食活性物质新的生测方法

本文研究植物源次生物质仿生半合成类似物对亚洲玉米螟五龄幼虫的拒食活性，通过改变人工饲料配方和状态，发展建立一种“饲料柱称重法”作为追踪检测新生测方法，以川楝素、紫雪花素和１０个新克罗烷二萜化合物的拒食活性进行比较。

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对棉铃虫Helicoverpaarmigera和亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响。结果表明:近紫外光照(300～400nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟幼虫GSTs活性无显著影响,但两种昆虫GSTs对α-T的反应不同。无光照条件下,α-T对亚洲玉米螟离体GSTs活性没有影响,而高浓度α-T能抑制棉铃虫离体GSTs活性;高剂量α-T可使两种昆虫活体GSTs活性升高。光照条件下,高浓度和高剂量α-T抑制棉铃虫GSTs活性,而不影响亚洲玉米螟离体GSTs活性,但低剂量α-T抑制其活体活性,而高剂量α-T则诱导其活性增加。棉铃虫和亚洲玉米螟GSTs对α-T反应的差异,可能与它们对药剂的敏感性以及药剂在两者体内的穿透、运转、贮藏、代谢等生理特性上的差异有关。

多炔化合物氧化胁迫下稗草细胞保护酶系的反应

用多炔类化合物1-苯基-4-(3,4-亚甲二氧)-苯基丁二炔(简称化合物5)处理稗草(Echinochloacrusgalli)愈伤组织,经紫外光(320～400nm)照射后,诱导细胞内形成氧化胁迫环境。利用生化酶学方法,测定几种保护酶系在氧化环境下的活性变化。发现经化合物5和照光处理后,可诱导激活细胞内的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化物酶(POD)的活性,而超氧化歧化酶(SOD)则表现为活性受抑制。以0.1～10mg/L的浓度处理,所测GST、GSH-Px和POD的照光诱导活性明显高于未经照光处理的活性。其中以10mg/L的浓度处理,照光所提高3种酶活性的百分率分别为10.47%、113.68%和166.68%。以1mg/L和10mg/L的浓度处理,照光对SOD的抑制百分率分别为50.25%和76.46%。测定结果表明:在外源光敏物质引起细胞内的氧化胁迫环境下,可激活细胞内保护酶的活性,用于抵御氧化逆境对细胞的损伤。而SOD则可能是化合物5光活化抑制稗草生长的生化作用靶标酶之一。

茶尺蠖性信息素生物学综合研究

为了搞清茶尺蠖(Ectropis obliqua Prout)性信息素的化学结构,首次对其腺体部位、释放规律、提取方法及合成样品的生物活性进行综合研究。茶尺蠖雌蛾性信息素腺体的部位经形态解剖、生物测定、触角电位(简称EAG)多种方法确定在腹部第8与第(9+10)节的节间膜处。15-20℃下,雌蛾在2日龄进入暗周期6-8h期间释放性信息素最强,此时切取腺体用二氯甲烷萃取、正已烷淋洗腺体及PORAPAK Q吸附气体二氯甲烷解吸三种方法,均可提取杂质较少、生物活性较高的粗提物。用GC/MC(气相色谱·质谱分析仪)分析,经EAG追踪活性组分,仿生合成的5种性信息素中,(z,z)-3,9-6,7-环氧-18碳二烯具有30-47％的雄蛾求偶反应率;(z,z,z)-3,6,9-22碳三烯、(z,z,z)-3,6-9-24碳三烯、(z,z)-9,12-18碳二烯醛的等量混合物对雄蛾具有27％的引诱率,田间也诱到少量雄蛾。