阻断SP/NK1R信号轴可抑制小鼠黑色素瘤增殖

目的:探讨阻断SP/NK1R信号轴对小鼠黑色素瘤生长的影响及可能作用途径。方法:建立瞬时接种B16F10细胞形成原位黑色素瘤的小鼠模型,腹腔注射给予NK1R拮抗剂阿瑞匹坦(5 mg/kg)进行干预。给药5次后取小鼠胸腺、脾脏和皮肤黑色素瘤组织,计算各组小鼠体重变化、肿瘤增长变化、胸腺指数和脾脏指数;采用免疫荧光染色考察黑色素瘤组织中细胞增殖和凋亡情况;并观察肿瘤组织中浸润效应CD8 T细胞的表达情况。结果:给予阿瑞匹坦拮抗NK1R对各组小鼠体重没有明显影响,但能显著抑制原位黑色素瘤的增殖;阻断SP/NK1R信号轴能够引起小鼠胸腺指数显著升高,但对脾脏指数没有明显影响;免疫荧光染色结果显示给予阿瑞匹坦能够显著抑制黑色素瘤细胞在体内的增殖,并显著促进其凋亡;同时,拮抗NK1R能够显著增加肿瘤浸润效应CD8 T细胞的数目。结论:阻断SP/NK1R信号轴可以显著抑制小鼠中黑色素瘤细胞的增殖,并促进肿瘤细胞凋亡,这一作用可能是通过促进CD8 T细胞浸润,增强抗肿瘤免疫来实现的。

黑素干细胞及其在白癜风复色过程中的作用研究进展

黑素干细胞具有无限自我更新能力,在一定条件(如伤口愈合、基因毒性药物处理和紫外线照射等)的刺激下,细胞或组织会通过再生来修复受损,即招募干细胞来分化为成熟的黑素细胞。近年来有研究发现黑素干细胞可作为皮肤和毛发的黑素细胞库,这为许多色素紊乱性疾病的治疗带来了新的希望。本文主要对黑素干细胞进行了介绍,并对黑素干细胞再生的关键信号通路、与邻近细胞之间的串扰及其在白癜风复色过程中的作用进行讨论。

肝窦内皮细胞在NAFLD疾病中的作用

非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是一种发病率较高的常见慢性肝病,其发病机制较为复杂,为药物研发带来困难。肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells, LSECs)位于肝血窦表面,是肝脏与血液接触的第一道防线,也是肝脏中含量最多的非实质细胞。LSECs作为肝脏内高度特化的内皮细胞,由于其独特的结构以及功能在NAFLD的发生与进展中都扮演了重要的角色,并且可以为NAFLD药物研发带来新思路。本文主要针对LSECs及其功能障碍在NAFLD中参与到的发病机制进行综述,并对以改善LSECs功能障碍为靶点的药物进行介绍。

华蟾素通过调控M2型巨噬细胞极化抑制结直肠癌转移

目的探讨华蟾素通过调控M2型巨噬细胞极化抑制结直肠癌转移的作用。方法将THP-1诱导成M0型巨噬细胞,收集HCT116细胞的条件培养基,刺激M0型巨噬细胞,通过流式细胞术、RT-qPCR、ELISA实验观察M2型巨噬细胞极化状态;收集M0型巨噬细胞和HCT116-Mφ细胞的条件培养基,刺激HCT116细胞,通过划痕实验和Transwell实验观察迁移和侵袭能力;用CCK-8实验检测华蟾素对HCT116细胞活力的影响;收集HCT116和HCT116+华蟾素的条件培养基,刺激M0型巨噬细胞,通过流式细胞术、RT-qPCR、ELISA实验观察M2型巨噬细胞极化状态;收集HCT116-Mφ细胞和(HCT116+华蟾素)-Mφ细胞的条件培养基,刺激HCT116细胞,通过划痕实验和Transwell实验观察迁移和侵袭能力的改变。结果M0型巨噬细胞在HCT116细胞的条件培养基刺激后,形态变成梭形的细胞,CD11b^(+)CD206^(+)细胞比例增高,M2型巨噬细胞标志物白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β(TGF-β)表达升高;HCT116细胞在HCT116-Mφ细胞的条件培养基刺激后,细胞迁移和侵袭能力明显增强;加入华蟾素之后,不仅M2型巨噬细胞极化比例降低,M2型巨噬细胞介导的促转移效应也受到抑制。结论HCT116细胞可以诱导M2型巨噬细胞极化,而华蟾素可通过抑制M2型巨噬细胞极化,进而抑制M2型巨噬细胞介导的肿瘤转移。

蟾毒灵抑制M2型巨噬细胞介导的结直肠癌迁移和上皮间质转化

目的探讨蟾毒灵(BU)抑制M2型巨噬细胞介导结直肠癌转移的作用。方法用佛波酯(PMA)诱导人急性白血病单核细胞(THP-1)分化为M0型巨噬细胞,48h后用含有白细胞介素-4(IL-4)和IL-13的培养基处理M0型巨噬细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、形态学、实时荧光定量(RT-qPCR)实验观察其表面标志物和形态变化,RT-PCR和ELISA实验检测M2型巨噬细胞的表面标志物转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10。通过ELISA实验比较M2型巨噬细胞和结直肠癌细胞HCT116上清液中IL-6分泌水平,通过Transwell实验、划痕实验、RT-qPCR和Western blot实验检测条件培养基对结直肠癌细胞HCT116的的影响。在条件培养基中加入BU后,通过Western blot、Transwell实验、划痕实验、和RT-qPCR实验观察可以HCT116中AKT/PI3K蛋白以及迁移和上皮间质转化能力的变化。结果将THP-1成功诱导成为M2型巨噬细胞。M2型巨噬细胞通过分泌IL-6激活了HCT116中AKT/PI3K蛋白磷酸化,促进了其迁移和上皮间质转化能力。BU可以抑制M2巨噬细胞介导的HCT116迁移和上皮间质转化。结论M2型巨噬细胞释放IL-6激活了结直肠癌细胞AKT/PI3K信号通路,促进了其迁移和上皮间质化。此外,BU可以抑制其促迁移和上皮间质化作用。

细胞膜仿生修饰的纳米粒在癌症光疗中的研究进展

目的传统的光疗剂容易被免疫系统识别、血液循环快速清除和在肿瘤部位聚集较低等问题进一步降低了光疗疗效。采用细胞膜仿生修饰已成为一种潜在的改善策略,因此,对细胞膜仿生修饰纳米粒在癌症光疗中的应用进行综述。方法通过查阅近五年的相关文献,对细胞膜修饰纳米粒在癌症光疗中的应用进行分类和总结。结果不同来源的细胞膜可运用多种制备手段包裹在纳米粒表面,且不会改变其光物理性质。修饰后的纳米粒还赋予了诸多生理学功能,如免疫逃逸、延长体内循环时间、同源靶向等。结论本文综述了红细胞、肿瘤细胞、干细胞、血小板或巨噬细胞等几种典型细胞膜的优劣势,旨在为细胞膜仿生策略用于癌症光疗中的发展提供新思路。

基于16sRNA测序分析亚油酸对小鼠肠道菌群的影响

目的探究亚油酸(LA)对小鼠肠道菌群多样性和结构的影响。方法将7周12只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(CTRL组)和亚油酸组(LA组)。在补充LA饮食前1 d,对LA组撤去正常粮食,禁食一晚,以便LA组小鼠更易接受LA饮食,且于实验记录当天给予LA,随时保持饲料更新,保证小鼠能自由饮食到造模结束。于造模12周后收集小鼠粪便,每2只小鼠粪便进行混合采样,后续进行16sRNA高通量测序分析肠道菌群结构、Alpha多样性、Beta多样性等分析。结果通过16sRNA高通量测序发现,LA干预后肠道菌群的丰富度及多样性受损;主成分分析结果表明,CTRL组与LA组菌群组成相差较多。在门水平中,LA组放线菌门相对丰富度增加(P<0.01);在属水平中,LA组杜氏乳杆菌属相对丰富度下降(P<0.05),双歧杆菌、粪杆菌属和丹毒丝菌属相对丰富度升高(均P<0.01)。结论LA干预后降低小鼠肠道菌群的丰富度与多样性,且调整肠道菌群的结构。LA干预后的肠道菌群中有益菌及致病菌存在差异,为LA的生物活性化合物的疗法和以肠道微生物为靶点的治疗调整提供一定的依据。

植物成分化妆品中24种香豆素的测定与来源分析

呋喃香豆素和部分简单香豆素禁止在化妆品中添加和使用,但可能会通过植物性原料引入化妆品中。为研究化妆品中存在的香豆素类成分及含量,建立了化妆品中24种香豆素类成分的液相色谱-串联质谱检测方法。选择32份样品用甲醇提取,通过甲醇-水(含体积分数0.05%甲酸)流动相,C_(18)色谱柱分离,在ESI+模式下检测,测得蛇床子素等8种目标组分,质量比含量范围为0.02~24.7 mg/kg。根据标识配料表信息,对相关植物性原料进行了检测,检出14种香豆素类成分,质量比含量范围为0.12~117.4 mg/kg。提示应进一步评估相关植物原料的安全限量要求。

七种增白中药在体外对酪氨酸酶的影响

酪氨酸酶为黑色素生成过程的关键酶，控制其活力即可控制黑色素生成量。用酪氨酸酶对常用增白中药进行筛选，有７种中药有不同程度的抑制作用，其中白茯苓、白鲜皮、白蒺藜有显著抑制作用（Ｋｉ分别为２．１３×１０￣（－２），２．２６×１０￣（－２），１．８６×１０￣（－２）ｇ／ｍｌ）。白茯苓、白鲜皮为竞争型抑制，白蒺藜为混合型抑制。通过抑制酪氨酸酶活性来减少黑色素生成量，可能是增白中药的作用机制之一。

抗色素美容方剂在体外对黑色素聚合过程的影响

本文基于皮肤色素形成的生化反应聚合过程的生理基础，体外模拟聚合过程测定抗色素美容方剂及其所会主药：白术、白蒺藜、当归、川芎对多巴自氧聚合、紫外线促多巴聚合和促黑色素分解作用的影响。结果表明：抗色素美容方剂及四味主药对多巴聚合的阻碍率为：９９．８％、９８．１％、７６．３％、８９．１％、９７．７％；抗紫外线催化率为：８１．２％、８２．６％、４９．８％、１４．６％、５５．６％；促黑色素分解率为：６１．５％、３２．３％、３６．５％、３７．０％、４２．０％。经相乘效果比较均有叠加性。该药为纯中药复方制剂，在治疗色素沉着类皮肤病有很好的应用前景。

“肠道菌群–肠–肝轴”在非酒精性脂肪肝病中的作用研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指在无异常酒精摄入的情况下,以肝细胞脂质蓄积为主要病理改变并伴有慢性炎症反应的代谢性疾病,被认为是代谢综合征的主要肝脏表现。研究发现,在肠道和肝脏之间的存在着物质和信号的双向通信,具有功能上的协同性,而在NAFLD的发生发展过程中,肠道菌群及其代谢物也发生不同程度的改变并通过肠–肝轴影响着NAFLD的疾病进程。因此,本文将主要从肠道菌群–肠–肝轴的结构组成和肠道菌群–肠–肝轴在NAFLD发病中的机制进行综述,为NAFLD的预防和治疗提供新的见解。

蟾毒灵通过激活内质网应激通路诱导HCT116细胞凋亡

目的研究蟾毒灵对人结直肠癌细胞HCT116增殖及凋亡的影响,并探讨内质网应激(ERS)在此过程中的作用。方法采用CCK-8法测定蟾毒灵对HCT116细胞增殖活性的影响;不同浓度蟾毒灵作用HCT116细胞48 h后,采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况,用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况,同时用Western blot法检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达情况;将HCT116细胞分为对照组、蟾毒灵组和联合组(蟾毒灵+4-苯基丁酸),Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达变化。结果CCK-8法检测结果显示蟾毒灵对HCT116细胞的增殖活性有抑制作用;细胞凋亡实验表明蟾毒灵能引起HCT116细胞的凋亡;Western blot实验结果显示,蟾毒灵能够上调促凋亡蛋白Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,同时也能诱导ERS并激活PERK/eIF2α/CHOP通路;当蟾毒灵联合4-苯基丁酸后,蟾毒灵的促凋亡作用得到了抑制。结论蟾毒灵能有效地抑制HCT116的增殖活性,并能诱发HCT116的凋亡,而该作用在一定程度上是通过激活ERS来实现的。

关于中药有效部位活性筛选的新思路探讨——毛菊苣有效提取部位多靶点治疗的研究

我国中药的发展目前正处在加速现代化研究的进程中，但中药药效物质基础研究相对薄弱及中药治疗中复杂的多靶点问题依然是制约中药走向国际的因素，这不仅贯穿于中药现代化基础研究的全过程，更是中药实现现代化的关键问题。由于中药药效物质基础的研究难度大，如何通过科学量化的确定物质控制指标筛选有效部位，同时兼顾中医药理论多靶点，弱活性协同作用的整体性和特殊性，这是中药药效物质基础研究和筛选中的共性技术，这是限制了中药的发展的关键技术。因此要提高中药研究的现代化水平，必须探索新的研究思路和方法。

秋水仙碱肝损伤机制探讨

目的研究秋水仙碱、秋水仙总碱提取物染毒SD大鼠肝损伤机制。方法 70只SD大鼠随机分为7组,连续灌胃染毒28 d后,分析大鼠血清生化指标,观察肝脏组织病理变化。免疫组织化学方法检测肝脏多药耐药蛋白Ⅱ(MRP2)蛋白表达水平,Western blot法检测肝脏法尼醇受体(FXR)、胆固醇7-α羟化酶(CYP7A1)、胆盐输出泵(BSEP)蛋白表达量。结果与正常组比较,大鼠染毒28 d后,秋水仙碱各组ALT活性明显升高,其中6.0 mg.kg-1剂量组TBA浓度和ALP活性高出对照组2倍以上;肝组织可见多处小灶性坏死,严重水肿伴有脂肪变性;CYP7A1表达上调,BSEP和MRP2表达下调。秋水仙总碱组大鼠,肝功能受损,但血清TBA含量和ALP活性无变化;肝组织病变。结论秋水仙碱和秋水仙总碱染毒28 d均可导致大鼠肝功能损伤,肝组织病变,且秋水仙碱致肝毒更严重。肝脏病理条件下,秋水仙碱和对乙酰氨基酚对大鼠胆汁酸合成、转运调控机制相似,并推断秋水仙碱致肝损伤主要是引起了严重的肝内胆汁淤积。

皮质酮与慢性不可预见性应激诱导的两种抑郁症模型比较

目的从行为学及分子水平比较皮质酮(CORT)与慢性不可预见性应激(CUMS)诱导的抑郁症模型的异同,为抑郁症发病机制研究及抗抑郁药物的筛选与评价模型提供一定的参考。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组(Ctrl)、慢性不可预见应激组(CUMS)和皮质酮注射应激组(CORT)组,制作应激模型21d,期间每3d对小鼠进行称重。21d模型制作结束后,对小鼠进行行为学测试,并于第22天,通过眼眶取血收集动物血清,并用ELISA法测定血清皮质酮含量。眼眶取血后脱颈椎处死动物,取出动物的胸腺和脾脏进行称重,计算脏器指数;取出脑组织,置于液氮罐保存,尼氏(Nissl)染色法观察小鼠大脑海马区神经元损伤情况;采用Western blotting、RT-PCR方法测定抑郁症相关蛋白及基因的表达。结果与对照组相比,两种抑郁症模型组开场实验中的行为学指标均改变,强迫游泳和悬尾实验的累积不动时间显著升高。两个模型组的胸腺指数无明显变化,而CORT组的脾脏指数较对照组下降。CUMS和CORT组小鼠血清皮质酮含量高于对照组,CORT组与CUMS组相比有升高趋势,但差异无显著性。CUMS和CORT两种模型均使海马CA1、CA3和DG区神经元密度降低,CORT模型变化更明显。两模型组的促肾上腺素释放激素(CRH)的mRNA和蛋白的表达量均显著性增加,脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化转录因子环磷腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的蛋白表达水平均呈现明显地抑制,但CUMS和CORT两组之间差异无显著性。结论 CORT模型和CUMS模型均能成功构建抑郁症模型,且与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴紊乱有关,两种模型在小鼠海马结构改变及大脑BDNF-pCREB和ERK信号通路激活等方面差异无显著性。提示,CORT模型可用于抑郁症机制的研究及抗抑郁药的筛选与评价,尤其可用于以HPA轴功能紊乱所引起的抑郁症分子机制探讨。

代谢性疾病对情绪和认知功能的影响及其可能机制研究进展

近年来,大量流行病学和动物实验研究表明,代谢性疾病如肥胖、2型糖尿病和代谢综合征对大脑功能有不良影响,会引起情绪障碍和认知损伤。代谢性疾病诱导情绪障碍和认知损伤涉及多种中枢功能异常,并与外周信号的介导密切相关。这些异常的中枢功能包括大脑萎缩和神经营养功能削弱、中枢胰岛素抵抗、中枢氧化应激、中枢瘦素抵抗、多巴胺奖赏环路失调等,外周介导信号涉及高甘油三酯/游离脂肪酸血症、炎症和下丘脑-垂体-肾上腺轴失调等。另一方面,初步研究表明,抑郁症会增加代谢性疾病发生的风险,精神应激会影响机体糖脂代谢。代谢性疾病和大脑功能的相互影响已成为科学研究的热点之一。本文重点讨论肥胖及相关的代谢性疾病诱导情绪障碍和认知损伤的可能机制。

驱虫斑鸠菊不同提取物组分注射液对正常小鼠血清铜、锌含量的影响

目的 :研究驱虫斑鸠菊不同提取物组分注射液对正常小鼠血清铜、锌含量的影响。方法 :取驱虫斑鸠菊不同提取物组分B、C、C′按急性毒性试验量的1/10、1/30、1/50给予不同组小鼠腹腔连续注射7天 ,取血测定铜、锌含量。结果 :不同组小鼠血清铜、锌水平不同 (P<0.05)。结论 :不同提取物组分注射液对正常小鼠血清中铜。

新疆一枝蒿化学成分的研究

采用硅胶、Sephadex LH-20、C18等柱色谱方法对新疆一枝蒿Artemisia rupestris L.干燥地上部位的醇提物进行分离纯化,得到16个化合物(1～16)。通过1H NMR、13C NMR等波谱技术,16个化合物的结构分别鉴定为:一枝蒿酮酸(1),12-hydroxy-4,11(13)-guaiadien-3-one(2),木犀草素(3),5,7-二羟基-3',4'-二甲氧基黄酮(4),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(5),木犀草素7-O-[α-L-木糖-(1→6)-β-D-葡萄糖](6),蒙花苷(7),槲皮素(8),石吊兰素(9),栀子素丁(10),茵芋苷(11),豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(12),1,2-O-异丙叉基-α-D-呋喃葡萄糖苷(13),天师酸(14),β-谷甾醇(15),胡萝卜苷(16)。其中化合物2,4,6,9,11～14均为首次从该植物中分离得到。

氢化可的松对B-16黑素瘤细胞酪氨酸酶及黑素生成影响研究

目的 探讨氢化可的松体外对酪氨酸酶活性影响 ,以及对小鼠B 16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成以及细胞内酪氨酸酶活性的作用。方法 利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定药物对细胞增殖的影响 ;采用酶学方法研究药物对酪氨酸酶活性的影响 ;用 5 70nm比色法测定黑素含量。结果 氢化可的松体外可激活酪氨酸酶活性 ,增强B16鼠黑素瘤细胞增殖 ,提高酪氨酸酶和黑色素合成能力。结论 氢化可的松可增强酪氨酸酶活性 ,进而促进黑素合成。

不同来源鹿茸肽对成骨细胞作用的比较

目的比较塔里木马鹿茸肽与梅花鹿茸肽对成骨细胞增殖分化的影响,并分析药材差异性。方法以相同工艺从两种鹿茸中提取不同肽段的鹿茸肽。以MTT法及PNPP法检测不同肽段鹿茸肽对原代大鼠成骨细胞的增殖分化作用。采用粉末鉴别及薄层色谱法分析塔里木马鹿茸与梅花鹿茸的结构及甘氨酸含量差异。以凝胶电泳法及HPLC法分析鹿茸肽成分差异。结果从塔里木马鹿茸中分离得到3种不同肽段的鹿茸肽,分别为相对分子质量(Mr)>30 kD组分(样A)、Mr5～10 kD组分(样B)、Mr>5 kD组分(样C);从梅花鹿茸中分离得到3种不同肽段的鹿茸肽,分别为Mr>30 kD组分(样D)、Mr5～10 kD组分(样E)、总肽组分(样F)。样B和C显著促进大鼠成骨细胞增殖并上调碱性磷酸酶活性,样F仅具有促进细胞增殖作用,其余组分作用微弱。塔里木马鹿茸与梅花鹿茸粉末形态类似,但含有更多甘氨酸成分,其鹿茸肽含更多潜在活性成分。结论塔里木马鹿茸与梅花鹿茸存在较大差异,前者包含抗骨质疏松成分。