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流感病毒快速检测方法特异性和敏感性研究 被引量:8
1
作者 尤凤兴 居丽雯 +5 位作者 张敬平 施强 马广源 吉杏生 吴家林 凌霞 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第8期598-601,共4页
目的比较多重逆转录聚合酶链反应(mRT—PCR)和胶体金法检测流感病毒的敏感性和特异性。方法采用mRT—PCR和胶体金法检测经细胞培养和红细胞凝集抑制试验(HI)鉴定为A/H1、A/H3、B型流感病毒的鼻咽拭标本78份,阴性鼻咽拭标本40份... 目的比较多重逆转录聚合酶链反应(mRT—PCR)和胶体金法检测流感病毒的敏感性和特异性。方法采用mRT—PCR和胶体金法检测经细胞培养和红细胞凝集抑制试验(HI)鉴定为A/H1、A/H3、B型流感病毒的鼻咽拭标本78份,阴性鼻咽拭标本40份,并对已稀释成10^1~10^5病毒半数感染量(TCID50)/0.1mL的3株H1、H3、B型流感病毒进行敏感性试验。结果toRT—PCR对A型流感病毒的检测敏感性为44.8%,特异性为97.5%;对B型流感病毒检测敏感性为20.0%,特异性为100.0%。胶体金法对A型流感病毒检测敏感性为44.8%,特异性为100.0%;对B型流感病毒检测敏感性为5.0%,特异性为97.5%。对经20代内狗肾细胞(MDCK)分离培养阳性的4份A/H1、4份A/H3和3份B型流感培养液,mRT—PCR和胶体金法检测的阳性符合率与型别符合率均为100.0%。mRT—PCR检测流感病毒敏感性为10^3TCID50/0.1mL;胶体金法检测的敏感性为10^3TCID50/0.1mL。结论toRT—PCR和胶体金法的敏感性与特异性无差异;mRT—PCR和胶体金法均可用于人群流感鼻咽拭标本流感病毒快速检测,特别是聚集性暴发流感患者,建议采样时标本数要适当放大2~3倍。mRT—PCR可进一步确定流感病毒的H1和H3亚型。 展开更多
关键词 流感病毒 分离 多重逆转录聚合酶链反应 胶体金法
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间接免疫荧光法与酶联免疫法测定狂犬病病毒抗体的比较 被引量:3
2
作者 尤凤兴 丁茂金 +1 位作者 吉杏生 胡遴 《中国卫生检验杂志》 2000年第1期115-116,共2页
关键词 间接免疫荧光法 狂犬病病毒抗体 ELISA
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无锡市2005~2006年度流感监测病原分离概况 被引量:1
3
作者 尤凤兴 吉杏生 +1 位作者 季亚勇 管红霞 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第12期2256-2257,共2页
目的:对无锡地区流感流行情况进行病原学检测,为流感疫情的监控提供依据。方法:从就诊流感样病例中采集鼻咽拭子,用狗肾传代细胞(MDCK)作病毒分离、0.75%的人"O"型红细胞作微量血凝试验(HA),血凝阳性者用亚型血清作微量血凝... 目的:对无锡地区流感流行情况进行病原学检测,为流感疫情的监控提供依据。方法:从就诊流感样病例中采集鼻咽拭子,用狗肾传代细胞(MDCK)作病毒分离、0.75%的人"O"型红细胞作微量血凝试验(HA),血凝阳性者用亚型血清作微量血凝抑制试验(HI)。结果:2005年10月至2006年12月共做标本1062份,分离出流感病毒254株,平均分离率为23.92%,最高月份为63.41%。分离的病毒型别为甲1型139株,时空分布主要在2005年冬及2006年夏;甲3型1株,在2006年8月份检出;乙型Victoria系114株,主要集中在2006年春季。结论:无锡地区流感流行流行趋势基本为两个峰,冬春季是主峰,夏季有一个次高峰。2006年8月,我们又分离到1株甲3型病毒,提示我们在2006年冬至2007年春可能来临的流感疫情中应予以关注。 展开更多
关键词 流感病毒 病毒分离 疫情监测
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2000~2002年无锡市部分服务行业人群梅毒、艾滋病病毒感染血清学调查
4
作者 尤凤兴 吉杏生 +1 位作者 胡遴 丁茂金 《职业与健康》 CAS 2004年第3期59-60,共2页
目的 了解服务行业人群梅毒、艾滋病病毒感染情况 ,为有关部门制定防治决策提供依据。方法 对 2 0 0 0~ 2 0 0 2年无锡市部分服务行业人群 82 3 2 8份血清用快速甲苯胺红 (TRUST)初筛试验及梅毒螺旋体明胶凝集 (TPPA)确认试验、HIV... 目的 了解服务行业人群梅毒、艾滋病病毒感染情况 ,为有关部门制定防治决策提供依据。方法 对 2 0 0 0~ 2 0 0 2年无锡市部分服务行业人群 82 3 2 8份血清用快速甲苯胺红 (TRUST)初筛试验及梅毒螺旋体明胶凝集 (TPPA)确认试验、HIV抗体酶联免疫吸附 (ELISA)初筛试验进行了梅毒、艾滋病病毒感染现状调查。结果  82 3 2 8份血清中检出梅毒抗体阳性 171份 ,阳性率为 2 0 8‰ (171/82 3 2 8) ,男女之比 1∶2 72 (4 6/12 5 )。其中 2 0~ 45岁龄组占 86 5 5 % (14 8/171) ,对 171份梅毒抗体检测阳性血清标本进行艾滋病病毒抗体检测 ,结果全部阴性。结论 该人群是梅毒感染的主要人群。 展开更多
关键词 梅毒感染 艾滋病病毒感染 阳性率
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一起暴发流行的无菌性脑炎的病原分析
5
作者 尤凤兴 马广源 +2 位作者 冯微宏 吴家林 凌霞 《福建医药杂志》 CAS 2014年第1期71-73,共3页
目的对一起暴发流行的无菌性脑炎进行病原分析。方法用荧光PCR法对14份咽拭子标本进行核酸定性检测,细胞培养分离得到病毒后进行微量细胞中和试验,并对病毒VP1区3’段核酸测序以鉴定病毒。结果 14份咽拭子标本中,甲型/乙型流感病毒、肠... 目的对一起暴发流行的无菌性脑炎进行病原分析。方法用荧光PCR法对14份咽拭子标本进行核酸定性检测,细胞培养分离得到病毒后进行微量细胞中和试验,并对病毒VP1区3’段核酸测序以鉴定病毒。结果 14份咽拭子标本中,甲型/乙型流感病毒、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(Cox A16型)均为阴性,其中8份标本肠道病毒通用型为阳性。从该8份标本从中分离到3株疑似肠道病毒,经微量细胞中和试验及病毒VP1区3’段核酸测序鉴定,均为埃可病毒30(ECHO30)型肠道病毒。结论本次暴发的无菌性脑炎由ECHO30型肠道病毒引起。 展开更多
关键词 ECHO30肠道病毒 无菌性脑膜炎 细胞中和试验 VP1区序列分析
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新生儿接种乙型肝炎疫苗免疫效果的长期观察
6
作者 尤凤兴 胡遴 丁茂金 《上海预防医学》 CAS 2000年第3期122-122,共1页
关键词 乙型肝炎疫苗 新生儿 长期观察 乙型肝炎病毒 免疫效果 接种后 感染情况 疫情 预防 人群
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HBsAg破坏试验载体法制片中温度及时间对HBsAg回收率的影响
7
作者 尤凤兴 肖勇 +1 位作者 吉杏生 丁茂金 《苏州医学院学报》 2000年第6期532-533,共2页
目的 比较两种温度制片及不同洗涤时间对载体上HBsAg含量的影响。方法 用 37℃、4℃两种温度制片载体经 30min振荡洗涤或先经 4、8、12h浸泡后再振荡洗涤 ,用ELISA法测定各自的OD值。结果  37℃制片HBsAg的回收率为 88.6 9% ,4℃制片... 目的 比较两种温度制片及不同洗涤时间对载体上HBsAg含量的影响。方法 用 37℃、4℃两种温度制片载体经 30min振荡洗涤或先经 4、8、12h浸泡后再振荡洗涤 ,用ELISA法测定各自的OD值。结果  37℃制片HBsAg的回收率为 88.6 9% ,4℃制片为 97.46 % ,两者之间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。两种载片经 30min振荡洗涤和经 4℃浸泡 4h后再振荡洗涤 ,37℃HBsAg回收率为 87.93%和 93.93% ,4℃为 96 .5 3%和 98.47%。二者对应比较 ,有非常显著差异 (P皆 <0 .0 1)。结论 在载体法HBsAg破坏试验中 ,用 4℃制片及载体经 4h浸泡后再振荡洗涤 ,回收率效果最好。 展开更多
关键词 HBSAG 不锈钢载片 回收率 OD值 温度 乙型肝炎
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HIV抗体检测筛查试验假阳性原因分析 被引量:14
8
作者 季亚勇 尤凤兴 姜永 《中国艾滋病性病》 CAS 2008年第1期68-69,共2页
关键词 艾滋病筛查 试验假阳性 HIV抗体检测 无锡市疾病预防控制中心 原因分 无锡地区 实验室
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转基因食品安全管理与我国对策 被引量:6
9
作者 张敬平 吴家林 +1 位作者 钮伟民 尤凤兴 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2006年第12期2323-2324,2327,共3页
关键词 转基因食品 安全管理 对策
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无锡地区家禽接触人群与一般人群中甲型流感病毒H1、H3、H5、H7、H9抗体血清学调查 被引量:5
10
作者 张敬平 尤凤兴 +3 位作者 董美华 钱燕华 吉杏生 缪小兰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2004年第5期621-622,共2页
调查无锡地区不同成人人群中甲型流感H1、H3、H5、H7、H9血凝抑制抗体水平,分析甲1、甲3流感病毒的流行趋势和人感染H5,H7、H9禽流感病毒的情况。对家禽接触人群272人、一般人群210人用微量半加敏法检测血清中H1、H3、H5、H7、H9血凝抑... 调查无锡地区不同成人人群中甲型流感H1、H3、H5、H7、H9血凝抑制抗体水平,分析甲1、甲3流感病毒的流行趋势和人感染H5,H7、H9禽流感病毒的情况。对家禽接触人群272人、一般人群210人用微量半加敏法检测血清中H1、H3、H5、H7、H9血凝抑制抗体,抗体效价≥1:10判为阳性,51:40判为有保护性。无锡地区成人人群中A/京防/262/95(H1N1)血凝抑制抗体阳性率为67.43%、GMT为13.47、保护率为20.95%;A/悉尼/5/97(H3N2)血凝抑制抗体阳性率为76.97%、GMT为19.38、保护率为35,48%,两组人群之间u=2.28,P<0.05。一般人群中H5、H7、H9血凝抑制抗体阳性率分别为0.48%、1.43%、3.18%,家禽接触人群中分别为4.04%、8.82%、20.59%,两组人群之间X2=6.21、P<0.025,X2=12.26、P<0.001和X2=28.97、P<0.001,有高度显著性差异。不同地区家禽接触人群之间H5、H7血凝抑制抗体阳性率没有显著性差异,但H9血凝抑制抗体阳性率在不同地区之间存在高度显著性差异。近几年无锡地区成人人群中H1N1和H3N2流感病毒发生流行的可能性不大;禽H5、H7、H9禽流感病毒在人群中有不同程度的感染,尤以家禽接触人群为甚,应加强对家禽接触人群的监测和干预。 展开更多
关键词 一般人群 抗体阳性率 血凝抑制 无锡地区 感染 甲型流感病毒 接触 家禽 禽流感病毒 保护率
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2006年无锡地区春季暴发流感疫情监测分析 被引量:7
11
作者 缪小兰 尤凤兴 +2 位作者 吉杏生 丁珊 季亚勇 《中国公共卫生管理》 2007年第6期552-553,共2页
目的了解无锡市流感流行动态,探索暴发和流行规律,为流感防治提供科学依据。方法开展流感监测和疫情流行病学调查,网络实验室用MDCK细胞进行流感病毒分离,用血凝抑制实验对病毒株进行分型鉴定。结果2006年春季本市共报告局部暴发流感疫... 目的了解无锡市流感流行动态,探索暴发和流行规律,为流感防治提供科学依据。方法开展流感监测和疫情流行病学调查,网络实验室用MDCK细胞进行流感病毒分离,用血凝抑制实验对病毒株进行分型鉴定。结果2006年春季本市共报告局部暴发流感疫情11起,流感样病例193例,对7起疫情采集鼻咽拭子标本43份,分离流感病毒26份,分离阳性率为60.47%(26/43),均为乙型流感病毒株(Victoria系)。结论无锡市2006年春季流感暴发主要发生在中小学校,暴发时间集中在2006年的2月中旬至4月中旬,引起流感暴发的毒株为Victoria系乙型流感病毒。 展开更多
关键词 流感监测 乙型流感病毒 暴发疫情 流行病学特征
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无锡市2005—2008年流行性感冒监测分析 被引量:3
12
作者 缪小兰 石平 +5 位作者 吉杏生 尤凤兴 董美华 钱燕华 林玉娣 姚健 《上海预防医学》 CAS 2009年第1期4-6,共3页
[目的]监测和分析无锡市流行性感冒(流感)的流行动态和病原学特征,为流感的预防控制提供科学依据。[方法]对2005年10月至2008年3月无锡市流感监测哨点的流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)发病动态、流感病毒分离和爆发疫情资料进... [目的]监测和分析无锡市流行性感冒(流感)的流行动态和病原学特征,为流感的预防控制提供科学依据。[方法]对2005年10月至2008年3月无锡市流感监测哨点的流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)发病动态、流感病毒分离和爆发疫情资料进行监测和分析。[结果]2005年10月至2008年3月,无锡市共监测报告ILI病例37 998例,ILI占门诊病例总数的比(ILI%)平均为3.67%。采集咽拭子标本1 796份,分离出流感病毒395株,分离率为21.99%。ILI和ILI%的高峰期均为2005年12月、2006年3月、2007年7月,ILI、ILI%和流感病毒分离率三者的高峰相互吻合,并与流感优势毒株交替变化一致。ILI的年龄构成中14岁以下儿童占91.03%,学校是发生爆发流行的主要场所。[结论]我市流感病毒比较活跃,关注ILI动态、ILI%动态、毒株型别交替变化和新型毒株的出现,可以评价和预警流感流行情况。对儿童和学校等流感重点人群和场所,应在流行高峰前采取流感疫苗接种为主导的综合性预防措施。 展开更多
关键词 流行性感冒 流行病学 监测 病原学
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酶联免疫一步法检测乙型肝炎病毒表面抗原假阳性若干问题探讨 被引量:5
13
作者 胡遴 尤凤兴 +1 位作者 丁茂金 吉杏生 《中国卫生检验杂志》 CAS 2001年第6期731-732,共2页
关键词 HBSAG 乙型肝炎 酶联免疫一步法
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大豆和玉米加工产品中外源转基因成分检测技术的建立 被引量:1
14
作者 吴家林 张敬平 +2 位作者 胡遴 钮伟民 尤凤兴 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期84-88,共5页
采用PCR技术检测Ca MV35S启动子,并进一步通过PCR检测RoundUp Ready Soybean(RRS)和Bt176 Maxi maizer的特异性DNA片段,判断大豆和玉米加工产品中是否含相应转基因成分。在1份豆粕和豆腐样品中检测到了RoundUp Ready大豆特异性的498 bp... 采用PCR技术检测Ca MV35S启动子,并进一步通过PCR检测RoundUp Ready Soybean(RRS)和Bt176 Maxi maizer的特异性DNA片段,判断大豆和玉米加工产品中是否含相应转基因成分。在1份豆粕和豆腐样品中检测到了RoundUp Ready大豆特异性的498 bp片段,而在玉米粒样品中检测到了Bt176特异性转基因成分。PCR检测的灵敏度达到0.1%,稳定性良好。结果表明,PCR技术检测外源基因是灵敏和准确的,可以广泛地应用到转基因作物及其加工产品的转基因成分检测中。 展开更多
关键词 大豆 玉米 加工产品 PCR检测 转基因成分
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乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗联合免疫阻断HBV母婴传播3年效果观察 被引量:2
15
作者 杨永钦 钱燕华 +4 位作者 尤凤兴 邓于 姚祖述 王泳 缪小兰 《职业与健康》 CAS 2004年第7期57-58,共2页
目的 通过连续 3a的前瞻性观察 ,研究乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗 (Hep -B疫苗 )联合免疫阻断HBV母婴传播的效果及乙肝疫苗的免疫持久性。方法 该研究设实验组Ⅰ、实验组Ⅱ和 1个对照组 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测HBsAg... 目的 通过连续 3a的前瞻性观察 ,研究乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗 (Hep -B疫苗 )联合免疫阻断HBV母婴传播的效果及乙肝疫苗的免疫持久性。方法 该研究设实验组Ⅰ、实验组Ⅱ和 1个对照组 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测HBsAg和抗 -HBs。结果 通过 3a的阻断效果观察 ,实验组ⅠHBsAg阻断率为 10 0 % ,实验组ⅡHBsAg阻断率为91 67% ;对照组HBsAg阻断率为 10 0 %。结论 证实联合免疫对阻断HBV母婴传播有效。通过 3a的实验观察 ,实验组和对照组抗 -HBs阳性率呈逐年下降 。 展开更多
关键词 乙型肝炎 乙肝疫苗 乙肝免疫球蛋白
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乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗联合免疫阻断乙型肝炎病毒母婴传播研究 被引量:4
16
作者 杨永钦 王泳 +3 位作者 姚祖述 尤凤兴 邓于 钱燕华 《医学动物防制》 2004年第2期109-110,共2页
目的 :为探讨乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗联合免疫阻断乙肝母婴传播作用 ,我市 2 0 0 1年开始研究乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗联合免疫阻断乙肝母婴传播作用。本次研究设 2个实验组和 1个对照组 ,结果表明实验组的抗 -HBs水... 目的 :为探讨乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗联合免疫阻断乙肝母婴传播作用 ,我市 2 0 0 1年开始研究乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗联合免疫阻断乙肝母婴传播作用。本次研究设 2个实验组和 1个对照组 ,结果表明实验组的抗 -HBs水平高于对照组HBV阻断率 97.2 5% 。 展开更多
关键词 乙肝免疫球蛋白 乙肝疫苗 联合免疫 乙型肝炎病毒 母婴传播
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玉米加工产品中转基因成分的定量检测 被引量:1
17
作者 张敬平 吴家林 +2 位作者 胡遴 钮伟民 尤凤兴 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第14期2614-2616,2619,共4页
[目的]建立检测玉米加工产品中转基因成分的实时荧光定量PCR技术。[方法]根据转基因Bt176玉米中的外源基因和内源基因设计的引物和TaqMan荧光探针,使用实时定量PCR技术对转基因成分含量进行了定量检测,建立了Bt176玉米参照样品的外源基... [目的]建立检测玉米加工产品中转基因成分的实时荧光定量PCR技术。[方法]根据转基因Bt176玉米中的外源基因和内源基因设计的引物和TaqMan荧光探针,使用实时定量PCR技术对转基因成分含量进行了定量检测,建立了Bt176玉米参照样品的外源基因和内源基因Ct值之差与转基因成分含量之间的标准曲线和线性回归方程,并对采自市场的未知样品进行了检测。[结果]在1份玉米粒样品中检测到了Bt176玉米转基因成分。检测灵敏度达到0.01%。[结论]实时荧光定量PCR技术检测方法是灵敏和准确的,可以广泛地应用到转基因作物及其加工产品的转基因成分检测中。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR Bt176玉米 转基因检测
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PCR定性检测转基因大豆的探讨 被引量:1
18
作者 吴家林 张敬平 +2 位作者 胡遴 钮伟民 尤凤兴 《职业与健康》 CAS 2007年第7期512-513,共2页
目的应用定性PCR方法检测大豆中转基因成分。方法以大豆凝集素(lection)基因为内源参照基因,设计合适引物,对转基因植物中常用的CaMV 35S启动子进行PCR扩增。结果在转基因大豆中扩增出195 bp的CaMV 35S启动子片断。结论定性PCR技术是进... 目的应用定性PCR方法检测大豆中转基因成分。方法以大豆凝集素(lection)基因为内源参照基因,设计合适引物,对转基因植物中常用的CaMV 35S启动子进行PCR扩增。结果在转基因大豆中扩增出195 bp的CaMV 35S启动子片断。结论定性PCR技术是进行转基因食品检测的有效手段。 展开更多
关键词 转基因大豆 定性PCR CaMV 35S启动子 Lection基因
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2006年~2010年无锡地区乙型流感病毒HA基因特性分析 被引量:1
19
作者 马广源 吴家林 +5 位作者 孙纳 尤凤兴 季亚勇 凌霞 肖勇 王苗苗 《江苏预防医学》 CAS 2011年第5期12-14,共3页
目的:了解无锡地区2006年~2010年流行的乙型流感病毒HA基因变异特点及种系进化分布。方法:取哨点医院送检的疑似流感标本,经MDCK细胞培养、血清鉴定为乙型流感病毒,提取病毒RNA,经逆转录聚合酶链式反应扩增,产物经纯化后,进行血凝素基... 目的:了解无锡地区2006年~2010年流行的乙型流感病毒HA基因变异特点及种系进化分布。方法:取哨点医院送检的疑似流感标本,经MDCK细胞培养、血清鉴定为乙型流感病毒,提取病毒RNA,经逆转录聚合酶链式反应扩增,产物经纯化后,进行血凝素基因HA区核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,用Bioedit和MEGA version 4.0分析软件进行基因种系进化特性分析。结果:2006年Victoria系毒株为主要优势流行株,2007~2010年Yamagata系和Victoria系同时流行。2010年Victoria系在第163位、174位、203位、269位氨基酸分别转换为Y-C、G-E、Y-G、P-L;2010年Yamagata系在第84位、133位、182位、357位、363位、369位有氨基酸的转换,分别位于G-D、T-D、G-E、L-P、N-Y、K-P。结论:2010年无锡地区人群中流行的乙型流感病毒Yamagata系和Victoria系基因位点有一定的替换,抗原已发生漂移,但不会引起大的流行。 展开更多
关键词 乙型流感病毒 基因特性 序列分析
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尿道致病性大肠埃希菌papC基因的PCR检测和分子标识筛选 被引量:1
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作者 吴庆刚 张敬平 +2 位作者 陈锦英 尤凤兴 姜永 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第11期2234-2235,2294,共3页
目的:用PCR方法检测尿道致病性大肠埃希菌(UPEC)的papC基因,探索建立UPEC的鉴定方法和筛选特异分子标识。方法:根据已发表的papC基因序列设计引物,采用PCR方法扩增460 bp左右的papC基因,并与血凝试验相比较,用于尿道致病性大肠埃希菌的... 目的:用PCR方法检测尿道致病性大肠埃希菌(UPEC)的papC基因,探索建立UPEC的鉴定方法和筛选特异分子标识。方法:根据已发表的papC基因序列设计引物,采用PCR方法扩增460 bp左右的papC基因,并与血凝试验相比较,用于尿道致病性大肠埃希菌的检测。结果:156株尿源性大肠埃希菌中MRHA阳性菌株的检出率为31.41%,pap CPCR扩增的阳性率为32.05%,两组结果无显著性差异(P>0.05)。结论:papC PCR方法可用于UPEC菌株的快速、灵敏的检测,其扩增片段可作为分子标识用于UPEC的筛选。 展开更多
关键词 尿道致病性大肠埃希菌 papC基因 分子标识
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