骨髓增生异常综合征血管内皮生长因子作用的研究

近年来越来越多的证据表明,多种血液系统恶性肿瘤患者的骨髓中存在血管新生现象，血管新生及其调控因子与血液系统恶性肿瘤的发生、进展和预后有密切的关系。骨髓增生异常综合征（MDS）是造血干细胞异质性的克隆性疾病，在疾病发展过程具有高风险转化为急性白血病特点。

骨髓增生异常综合征骨髓血管新生的研究

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓是否存在血管新生,及其在MDS发病机制、病情进展及预后判断中的价值。方法用CD34单抗免疫组织化学染色方法标记MDS患者和正常人骨髓组织血管内皮细胞,盲法计数骨髓微血管密度(MVD)。结果MDS患者MVD显著高于正常对照组(P<0.01),并且随着病程的进展患者的骨髓MVD呈增高趋势(P<0.01)。结论MDS患者骨髓MVD增高,可能与白血病进展有关。

恶性淋巴瘤患者血清CEA,SF,β_2-MG检测的意义

目的 :研究恶性淋巴瘤患者血清癌胚抗原 ( CEA )、血清铁蛋白 ( SF )、β2 -微球蛋白 (β2 -MG)检测的临床意义。方法 :用放射免疫法检测 48例恶性淋巴瘤患者血清 CEA,SF,β2 -MG,并与正常对照组进行比较。结果 :恶性淋巴瘤患者血清 CEA,SF,β2 -MG治疗前、未缓解、复发后与正常对照组比较差异有统计学意义 ( P<0 .0 5 ) ,缓解后与正常对照组比较差异无统计学意义 ( P >0 .0 5 )。结论 :血清 CEA ,SF ,β2 -MG的检测对恶性淋巴瘤的临床诊断、病情监测、预后判断具有临床意义。

紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株 HL- 6 0是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究 bcl- 2基因在此过程中的作用。方法 :(1)以紫杉醇处理 HL - 6 0细胞 ,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应 ,在光镜和电镜下观察细胞形态变化 ;(2 )用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率 (AP)的变化 ;(3)用 RT- PCR法检测药物孵育前后 bcl- 2基因的表达水平。结果 :(1)在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制 HL - 6 0细胞生长 ;(2 )紫杉醇能诱导 HL- 6 0细胞凋亡 ,并显示剂量效应 ;(3)在紫杉醇诱导 HL- 6 0细胞凋亡过程中 ,bcl- 2基因表达水平下调。结论 :紫杉醇能诱导 HL - 6 0细胞凋亡 ,bcl- 2基因参与了紫杉醇诱导 HL - 6

Bax基因在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中作用的研究

目的:观察bax基因在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中的表达。方法:将不同浓度的紫杉醇作用于HL-60细胞,用RT-PCR法检测药物孵育前后bax基因的表达水平。结果:在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中bax基因的表达水平上升,并显示剂量效应。结论:bax基因参与紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡的基因调控。

全反式维甲酸与紫杉醇、阿霉素联合诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)分别与紫杉醇(Taxol)、阿霉素(ADR)单独或联合孵育HL-60细胞株能否增强凋亡诱导作用,并进一步研究bcl-2基因及家族bax、bcl-x基因在此过程中的作用。方法:1用台盼兰拒染法观察细胞生长活力;2在光镜和电镜下观察细胞形态变化;3用流式细胞仪(FCM)检测药物孵育前后细胞凋亡率(AP)的变化;4用RT-PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因及其家族bax、bcl-x基因的表达水平。结果:1ATRA能增强Taxol和ADR对HL-60细胞的生长抑制作用;2ATRA能增强HL-60细胞对Taxol和ADR诱导的细胞凋亡;3在ATRA与Taxol、ADR联合诱导的HL-60细胞凋亡中,bcl-2、bcl-xl基因表达下降,bax、bcl-xs基因表达增加。结论:ATRA能增加Taxol和ADR对HL-60细胞的生长抑制作用及凋亡诱导作用,bcl-2基因及家族bax、bcl-x基因参与了ATRA与Taxol、ADR联合诱导细胞凋亡的调控。

血管内皮生长因子受体在骨髓增生异常综合征中的作用研究

目的:探讨血管内皮生长因子受体(VEGFR)在骨髓增生异常综合征(MDS)发病机制中的作用。方法:用流式细胞仪测定MDS患者及正常人骨髓单个核细胞VEGFR(VEGFR1和VEGFR2)表达率。结果:VEGFR1阳性表达率结果显示:MDS高危组>MDS低危组>正常组(P<0.01);MDS组和正常组的VEGFR2表达结果无差异(P>0.05)。结论:MDS患者VEGFR1阳性表达增高,VEGFR1阳性表达增高与MDS病程进展有关,提示在MDS转化为白血病过程中VEGFR1起重要作用。

抗原捕获试验在诊断特发性血小板减少性紫癜中的应用价值

目的 :探讨抗原捕获试验在诊断特发性血小板减少性紫癜 (ITP)中的应用价值。方法 :用抗原捕获试验检测 4 2例 ITP患者和 2 1例继发性血小板减少性紫癜 (STP)患者的抗血小板糖蛋白 b/ a抗体 (抗 GP b/ a Ab) ,酶联免疫竞争抑制试验检测血小板相关抗体 (PAIg) ,比较二者对 ITP诊断的敏感性和特异性。结果 :抗原捕获试验检测 ITP患者抗 GP b/ a Ab敏感性为 73.8% ,特异性为 90 .5 % ;酶联免疫竞争抑制试验检测 ITP患者 PAIg敏感性为 71.4 % ,特异性为 2 3.8%。结论 :抗原捕获试验检测抗 GP b/ a Ab在

分层治疗在不同预后急性早幼粒细胞白血病患者中的疗效

目的:观察不同预后的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者中的不同治疗方案的近期和远期疗效。方法:回顾性分析182例APL成人病例,高/中/低危各67/74/41例,观察不同预后患者中以全反式维甲酸(ATRA)为主的方案和以三氧化二砷(ATO)为主的方案的完全缓解(CR)率、获得CR时间、总体生存率(OS)、无病生存率(DFS)及中枢神经系统累积复发率(CIR)。结果:以ATRA为主组患者OS在高危与低危组间存在差异(P=0.042),以ATO为主患者该统计学差异消失(P=0.23);中危(P=0.007)和高危(P=0.011)的ATO组患者较ATRA组患者OS明显延长。高危患者(P=0.001)和中危患者(P=0.002)在ATO组DFS明显提高,对于低危患者(P=0.28)是否以ATO为主该差异不明显。ATO组与ATRA组中枢系统CIR的差异无统计学意义(P=0.08)。结论:对于高、中危患者以ATO为主的方案能明显改善APL患者的预后,但对于低危患者可考虑仅以ATRA为主的方案。

骨髓增生异常综合征的免疫表型和SURVIVIN、P15INK4B、TRF1基因表达

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)特征性免疫表型,SURVIVIN、P15INK4B、TRF1基因表达程度,及其与临床病情进展的关系。方法抽取50例MDS患者骨髓细胞,用流式细胞学技术检测免疫表型;抽取单个核细胞,用RT-PCR方法检测SURVIVIN、P15INK4B、TRF1基因mRNA表达程度。结果与对照组相比,MDS患者骨髓细胞原始群CD7和CD34表达增多;粒细胞群CD34表达增多,CD13、CD33、CD11b表达下降;单核细胞表达CD117和CD34。与对照组相比,MDS患者骨髓单个核细胞SURVIVIN和TRF1基因mRNA表达增加,P15INK4B基因mR-NA表达下降(P均<0.05)。从低危组到高危组,SURVIVIN和TRF1基因mRNA表达增加,P15INK4B基因mRNA表达下降(P均<0.05)。结论 MDS免疫表型有其特征性,SURVIVIN、P15INK4B和TRF1基因表达可能与其发病进展有关。

三氧化二砷抗骨髓增生异常综合征骨髓血管新生机制的初步探讨

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓是否存在血管新生及三氧化二砷(As2O3)的抗血管新生作用。方法①采用CD34单抗免疫组织化学染色法标记骨髓组织血管内皮细胞,盲法计数骨髓微血管密度(MVD)。②采用四甲基偶氮唑蓝方法观察As2O3对A组(HUVEC)及B组(经SKM-1细胞株上清液干预组HUVEC)的增殖抑制效应。结果①MDS患者骨髓微血管密度(MVD)显著高于正常对照组(P<0.01),并且随着病程的进展患者的MVD呈增高趋势(Rs=0.86 133,P<0.05);②As2O3对HUVEC及SKM-1细胞株干预组的作用均表现时间、剂量依赖性的增殖抑制效应(F=10.92,P<0.05);③HUVEC中加入SKM-1上清液共同培养对促进细胞生长有明显作用(P<0.01)。结论①MDS患者存在骨髓微血管密度增高,并与MDS患者的疾病进展正相关,血管新生在MDS的发生发展中起到重要作用;②As2O3以时间-剂量依赖性方式抑制HUVEC细胞的生长;③提示MDS细胞可分泌促进内皮细胞生长的细胞因子,通过旁分泌作用刺激内皮细胞生长。

三氧化二砷通过抑制血管内皮生长因子mRNA表达抗骨髓增生异常综合征血管新生作用的初步研究

目的探讨三氧化二砷通过下调人脐静脉内皮细胞和SKM-1人骨髓增生异常综合征细胞株(SKM-1细胞株)的血管内皮细胞生长因子mRNA表达,具有抗骨髓增生异常综合征血管新生作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应扩增血管内皮细胞生长因子的方法。观察:①不同浓度As2O3对A组(人脐静脉内皮细胞)、B组(经SKM-1细胞株上清液干预人脐静脉内皮细胞)及C组(SKM-1细胞株)血管内皮生长因子mRNA的影响。②相同浓度下,三氧化二砷分别干预A、B及C 3组12、24、36、48、60、72 h后,其对血管内皮生长因子mRNA的影响。结果①随着三氧化二砷作用浓度的增加,A、B、C 3组血管内皮生长因子mRNA表达显著下降,并呈负性相关关系(t=8.636、2.560、13.002,P<0.001);②随着三氧化二砷作用浓度和时间的增加,A、B及C 3组的血管内皮生长因子mRNA表达均逐渐下降,呈显著的负性相关关系(P<0.05);③对A、B组表达结果进行比较B组血管内皮生长因子mRNA表达高于A组,差异有统计学意义(t=3.400,P<0.05)。结论三氧化二砷可通过下调人脐静脉内皮细胞和SKM-1细胞株的血管内皮生长因子转录和翻译过程而实现抗血管新生作用,提示骨髓增生异常综合征细胞可能分泌上调血管内皮细胞中血管内皮生长因子基因表达的物质,具有促进血管新生作用。

急性粒细胞白血病合并肠结核一例

1病例报告患者女,48岁。主因头晕、乏力伴双下肢瘀点、瘀斑4个月,发热1周,于2010年8月24日入院。患者4个月前无明显诱因出现头晕、乏力,面色苍白伴双下肢瘀点瘀斑,血常规示白细胞（WBC）14.6×109/L,血红蛋白（Hb）67g/L,血小板（Plt）48×109/L,经骨髓细胞学及流式细胞学检查,

淋巴细胞白血病和淋巴瘤T细胞受体基因重排研究

目的:探讨淋巴细胞白血病及淋巴瘤的T淋巴细胞受体(TCR)Vβ亚家族分布特点。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性淋巴细胞白血病5例,慢性淋巴细胞白血病2例,弥漫大B淋巴瘤3例及外周T淋巴瘤3例患者的外周血或淋巴结T淋巴细胞TCR Vβ亚家族表达。对照组为健康人8例。结果:对照组健康8例外周血淋巴细胞表达全部24个Vβ亚家族。急性淋巴细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病患者外周血淋巴细胞TCR Vβ亚家族均呈限制性表达,外周T淋巴瘤2例和弥漫大B淋巴瘤1例Vβ亚家族呈限制性表达,另外3例表达未受抑制。而淋巴瘤患者淋巴结标本Vβ亚家族全部呈限制性表达。结论:TCR基因重排对淋巴瘤和淋巴细胞白血病的诊断有辅助作用。

血脂在免疫相关性血细胞减少症病情评估中的作用

目的:探讨血脂水平与血细胞计数的相关性,以及血脂检测在免疫相关性血细胞减少症(IRH)病情评估中的价值。方法:选取33例免疫相关性血细胞症患者(IRH组)及30例健康人(对照组)为研究对象,检测血常规、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果:IRH组治疗前TC、TG中位数分别5.5 mmol/L、2.5 mmol/L,分别高于对照组的4.80 mmol/L和1.09 mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);IRH组治疗前白细胞、血红蛋白、血小板计数分别为4.3×10^9/L,102.85g/L和71.0×10^9/L,分别低于对照组的6.05×10^9/L,140.57 g/L和220.50×10^9/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。IRH组治疗后血红蛋白、血小板计数分别为109.06 g/L和172.0×10^9/L,较治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);TC、TG分别为4.60 mmol/L和1.46 mmol/L,较治疗前显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组中血小板与TG存在弱相关(rs=0.431,P=0.017),与TC、HDL-C和LDL-C无关(P>0.05)。IRH组治疗前血小板与各项血脂指标均不具有相关性(P>0.05),但治疗后血小板与TG存在弱相关(rs=0.386,P=0.026),而与TC、HDL-C及LDL-C不存在相关关系(P>0.05)。结论:血脂水平对免疫相关性血细胞减少症患者病情评估有重要作用,高水平的TC、TG提示较为严重的病情。

γ-分泌酶抑制剂诱导B淋巴瘤细胞凋亡

目的:探讨γ-分泌酶抑制剂(gamma-secretase inhibitor,GSI)对伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)Namalwa细胞增殖与凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:GSI处理Namalwa细胞后,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞的凋亡,Western blotting法检测凋亡相关蛋白caspase-9、caspase-3以及Notch信号通路中Notch1蛋白胞内片段的表达。建立裸鼠移植瘤模型,观察GSI对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。结果:GSI处理Namalwa细胞48、72 h的IC50值分别为2.14和0.61μmol/L,GSI对Namalwa细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性。GSI(1.25μmol/L)处理Namalwa细胞24 h后,其凋亡率明显高于对照组[(17.71±1.87)%vs(3.42±0.95)%,P<0.01];处理48 h后与对照组差异更为显著[(43.68±0.53)%vs(4.65±0.8)%,P<0.01]。GSI处理Namalwa细胞24、48 h后,凋亡蛋白caspase-3、caspase-9蛋白前体表达下降,caspase-9活性片段表达上调,Notch1蛋白胞內片段表达下降。GSI处理后裸鼠移植瘤体积明显小于对照组[13 d时,(2.199±0.183)vs(1.15±0.399)cm3,P<0.01〗;瘤组织中Namalwa细胞的凋亡率明显高于对照组[(5.3±0.48)%vs(2.1±0.26)%,P<0.01]。结论:GSI能够有效抑制BL细胞株Namalwa细胞的增殖及促进其凋亡,caspase-3和caspese-9凋亡蛋白以及Notch信号通路可能参与GSI诱导Namalwa细胞凋亡的过程。

Bcl-x基因在紫杉醇诱导的HL-60细胞凋亡过程中的变化

目的 研究抗微管药紫杉醇诱导HL - 6 0细胞凋亡过程中Bcl -x基因表达的变化。方法 用RT -PCR法检测药物孵育前后Bcl-x基因的表达水平。结果 在紫杉醇诱导HL - 6 0细胞凋亡过程中 ,Bcl-x1基因表达水平下降 ,而Bcl-xs 基因表达水平升高。结论 Bcl-x基因参与了紫杉醇诱导的HL - 6 0细胞凋亡的调控。

酪氨酸激酶抑制剂治疗慢性髓系白血病不良反应及患者生活质量调查

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗慢性髓系白血病(CML)的不良反应及患者生活质量。方法:选择于两家医院接受TKI治疗的CML患者115例,调查TKI治疗的不良反应和患者生活质量,分析影响药物不良反应和生活质量的因素。结果:TKI引起的非血液学反应包括乏力(61.7%),水肿(48.7%),皮疹(47.8%),呕吐(27.8%),全身酸痛(21.7%),肝损(15.7%),胸闷心悸(6.1%),健忘(3.5%),腹泻(1.7%),黄体破裂(1.7%),双眼干涩(1.7%),视物模糊(1.7%)和牙龈出血(1.7%)。115例患者SF-36量表评分生理机能90分(40,100),生理职能75分(0,100),躯体疼痛84分(20,100),一般健康状况70分(5,100),精力75分(25,100),社会功能100分(12.5,100),情感职能100分(0,100),精神健康72分(16,100),健康变化50分(0,100)。单因素分析显示年龄与精神健康(MH)有关(P=0.011),不同TKI药物与躯体疼痛(BP)有关(P=0.026)。不同TKI药物与水肿(P<0.001)和肝损(P=0.004)有关,EMR与水肿(P=0.007)和肝损(P=0.003)有关。IM水肿发生率(57.5%)高于NIL(15.0%),差异有统计学意义(P<0.05),DAS水肿发生率(37.5%)与IM和NIL比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。DAS乏力发生率(25.0%)低于IM(62.1%)和NIL(75.0%),差异均有统计学意义(P<0.05)。IM肝损发生率(5.7%)低于DAS(87.5%)和NIL(30.0%),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,EMR对水肿的影响具有统计学意义(P=0.03),相对于IM,NIL与水肿发生有关(P=0.02)。EMR对肝损的影响具有统计学意义(P=0.02),相对于IM,NIL与肝损发生有关(P=0.004)。结论:CML患者长期服用TKI药物会发生不良反应,降低生活质量,临床医生应重视TKI药物的不良反应。

急性淋巴细胞白血病合并李斯特菌感染败血症1例报告并文献复习

目的:提高对急性白血病患者化疗中并发罕见细菌感染诊断及治疗的认识。方法:对1例急性淋巴细胞白血病患者化疗中发生李斯特菌感染败血症的临床资料进行分析,并进行相关文献复习。结果:该病例诊断为急性B前体淋巴细胞白血病,患者病程中合并反复产单核李斯特菌感染败血症,后引起弥散性血管内凝血、多器官功能衰竭,患者家属放弃治疗自动出院。结论:不明原因长期反复发热的患者应警惕罕见致病菌导致的感染;治疗不仅要以体外药敏试验为依据,同时也要提高患者自身免疫功能。

依鲁替尼对伯基特淋巴瘤细胞生长抑制及诱导凋亡的作用及机制研究

目的:研究依鲁替尼(ibrutinib)在体外对伯基特淋巴瘤细胞株Namawal的作用,探讨其可能的分子机制。方法:应用CCK8法,细胞周期分析法检测依鲁替尼作用于Namawal细胞株后,对其增殖、细胞周期等细胞生物学的影响;应用免疫荧光电镜观察药物作用该细胞株后48H细胞核变化;应用免疫印迹法检测ibrutinib作用于Namawal后BTK信号通路相关蛋白的变化。结果:经依鲁替尼处理后的Namawal细胞增殖受到明显抑制;依鲁替尼下调BTK信号通路上相关蛋白活性。结论:依鲁替尼通过抑制p-BTK活性抑制细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,是治疗Burkitt淋巴瘤的潜在新药。