初产妇伴围产期心肌病1例报道

围产期心肌病(Peripartum cardiomyopathy,PPCM)是发生于妊娠晚期或分娩后数月内一种罕见且危及生命的妊娠相关性疾病,表现为收缩期心力衰竭和左心室射血分数降低[1]。其发病机制不明,但以非洲人、高龄、多胎、多产、妊娠高血压和先兆子痫的妇女发病率较高[1,2],现报道如下。

同型半胱氨酸与胱抑素C检测在急性脑梗死患者中的临床价值分析

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)与胱抑素C(Cys C)检测在急性脑梗死患者中的临床应用价值。方法选取2018年1-8月云南省中医医院脑病科收治的60例急性脑梗死患者为观察组,另选取40例健康志愿者为对照组,比较2组研究对象血清Hcy及Cys C水平。参照美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和牛津郡社区卒中计划(OCSP)分型对观察组进行分组,比较观察组内不同分组血清Hcy、Cys C水平。比较给予重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗后,不同时间段及不同预后患者的Hcy、Cys C水平。结果观察组患者血清Hcy、Cys C检测结果均显著高于对照组(t=17.127、4.708,均P<0.05),观察组血清Hcy与Cys C呈明显正相关(r=0.260,P<0.01)。不同神经功能缺损者Hcy、Cys C比较差异有统计学意义(P<0.05),但不同脑梗死分型患者Hcy、Cys C检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。比较rt-PA治疗不同时间段及不同预后其Hcy、Cys C水平,急性脑梗死治疗前>治疗后1d>治疗后3d>治疗后7d(P<0.05),基本治愈<显著进步<有效<无变化(P<0.05)。结论血清Hcy、Cys C与急性脑梗死的发病及病情严重度紧密相关,可作为诊断和评估患者病情及预后的可靠依据。

产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌整合子和插入序列共同区1检测及分型

目的研究临床分离产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌中整合子和插入序列共同区1(ISCR1)移动元件的分布和携带耐药基因盒情况,以及菌株的同源性。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2全自动药敏鉴定仪进行菌种鉴定和药敏试验;PCR及测序法检测Ⅰ~Ⅲ类整合酶基因和ISCR1元件保守区,以及可变区携带的耐药基因盒;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行分型研究。结果检测菌株中77.8%(14/18)菌株Ⅰ类整合子保守区阳性,27.8%(5/18)菌株ISCR1元件保守区阳性,未检测到Ⅱ、Ⅲ类整合子;72.2%(13/18)菌株Ⅰ类整合子可变区阳性,未检测到ISCR1元件的可变区;整合子可变区含有编码对氨基糖苷类抗生素耐药的基因盒(aad A1、aad A5、aac(6')-Ib-cr)和编码对磺胺类抗菌药物耐药的基因盒(dfr A、dfr A15、dfr A17),可变区基因盒未检测到NDM-1耐药基因;PFGE分型将18株菌分成17种型。结论产NDM-1弗劳地枸橼酸杆菌克隆播散趋势不明显,Ⅰ类整合子广泛存在于此类菌中,ISCR1元件携带率较低,并且这两类移动元件与我院NDM-1基因的传播无关。

两株携带blaNDM-1基因布氏柠檬酸杆菌耐药性及同源性分析

目的探讨携带blaNDM-1基因布氏柠檬酸杆菌的耐药特点及同源性。方法试验菌株为从临床尿液标本中分离到的两株耐碳青霉烯类的布氏柠檬酸杆菌。采用Vitek-2全自动微生物鉴定与药敏分析系统进行鉴定及药敏试验,PCR扩增blaNDM-1基因并测序验证,质粒接合试验了解blaNDM-1基因是否可通过质粒进行水平传播,并对两菌株进行多位点序列分型(MLST)及ERIC-PCR分析。结果两株菌对青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类和碳青霉烯类均高度耐药,并携带blaNDM-1基因。接合试验成功将两株菌的blaNDM-1基因转移至大肠埃希菌EC600。MLST分型为ST171,ERIC-PCR发现扩增条带位置完全相同,即为同一基因型。结论检出两株具有相同基因型ST171携带blaNDM-1基因的布氏柠檬酸杆菌,且菌株对碳青霉烯类在内的多种抗生素均高度耐药。

益生菌治疗结肠炎大鼠前后肠道菌群变化及毒力因子检测分析

目的研究服用益生菌VSL#3前后,结肠炎(UC)大鼠肠道菌群的变化以及6种常见细菌毒素基因携带率的改变,同时探究益生菌的最适治疗浓度。方法 5%硫酸葡聚糖钠(DSS)溶液自由饮用一周,构建结肠炎大鼠模型,观察和评价大肠黏膜的组织学损伤,计算DAI评分以及病理学评分。收集各组Sprague-Dawly大鼠(SD大鼠)的粪便标本,通过粪便涂片革兰染色镜检法和细菌培养鉴定进行菌群分析,利用实时荧光定量PCR检测粪便中6种常见细菌的毒素基因。结果益生菌治疗组DAI评分、病理学评分均低于模型组(P<0.05);益生菌治疗组菌群失调程度较DSS造模组减轻(P<0.05),需氧和厌氧条件致病菌的优势生长率均低于DSS组;益生菌治疗后各个小组中多种致病菌毒素基因的总携带率较DSS组降低,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。不同浓度益生菌治疗组之间,菌群失调程度,需氧条件致病菌和厌氧条件致病菌的优势生长率,致病菌毒素基因携带率,均无显著性差异(P>0.05),其中中浓度治疗组涂片菌群失调率以及失调程度积分最低。结论益生菌可能通过改善结肠炎大鼠肠道菌群失调情况、降低肠道细菌毒素基因的携带率,从而发挥其对溃疡性结肠炎的治疗作用;中浓度[0.6g/(kg·d)]的益生菌可能是治疗溃疡性结肠炎的最适浓度。

益生菌VSL#3对DSS大鼠结肠炎TLR4-NF-κB通路的调节作用

目的阐明益生菌VSL#3对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导结肠炎大鼠TLR4-NF-κB通路的影响,深入探讨VSL#3对结肠黏膜炎症免疫调控机制。方法将33只Sprague-Dawly大鼠(SD大鼠)分为正常组、DSS造模组以及益生菌治疗组。5%DSS溶液自由饮用一周,构建溃疡性结肠炎模型。观察和评价大肠黏膜的组织学损伤,计算DAI评分以及病理学评分;使用real-time PCR检测结肠组织TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平;Western-Blot检测TLR4、NF-κB蛋白的表达水平;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中TNF-α和IL-1β的表达。结果益生菌治疗组DAI评分、病理学评分均低于DSS造模组(P<0.05);益生菌治疗组大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β的mRNA水平与DSS造模组相比表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与DSS造模组相比,益生菌治疗组SD大鼠结肠组织TLR4、NF-κB p65蛋白水平下调,血清TNF-α、IL-1β表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益生菌VSL#3可能是通过抑制TLR4-NF-κB通路,发挥其抑制免疫,减轻炎症反应的作用,从而达到治疗溃疡性结肠炎的目的。

碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导blaNDM-1基因的研究

目的研究碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中bla_(NDM-1)基因的传播特征。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1酶弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2全自动鉴定药敏仪进行菌种鉴定和药敏试验;通过接合试验、脉冲场凝胶电泳(PFGE)及Southern印迹杂交试验对bla_(NDM-1)基因的水平传播机制进行研究。结果 18株细菌对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类抗生素的耐药率为100%,对其他抗生素也呈现不同程度的耐药;13株细菌接合试验成功,接合子对碳青霉烯类抗生素耐药;PFGE及Southern印迹杂交试验表明16株细菌中bla_(NDM-1)基因均位于约33.3kb大小的质粒上,剩余2株细菌的bla_(NDM-1)基因位于33.3～54.7kb大小的质粒上。结论质粒介导碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中bla_(NDM-1)基因水平转移。

产NDM-1肠杆菌科细菌的研究进展

产新德里金属β-内酰胺酶-1(New delhimetallol-β-lactamase 1,NDM-1)肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药,只对多黏菌素和替加环素敏感,接近于泛耐药菌株。此酶的blaNDM-1基因在肠杆菌科细菌间高效率的转移和人为因素(如旅游、卫生和食品的生产和制备)的影响,使其在全球迅速传播。目前有关其治疗的临床研究较少,为减缓NDM-1肠杆菌科细菌的传播,应加速开发诊断和治疗的相应措施。现就产NDM-1肠杆菌科细菌的分子生物学特点、诊断、治疗、新药研发和预防作一综述。

基于转录组测序的黄芩素对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的研究

目的 通过转录组测序(RNA sequencing, RNA-Seq)初步探讨黄芩素对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的作用机制。方法 采用VITEK MS质谱检测仪和Vitek2-Compact药敏分析对菌株T3进行鉴定和药敏试验。通过微量肉汤稀释法测定黄芩素(baicalein, BE)对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T3的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)。用Illumina NovaSeq 6000转录组测序平台对1/2 MIC黄芩素处理的肺炎克雷伯菌株T3和正常对照组进行RNA-Seq;利用Trimmomatic、Rockhoppe、edgeR和Goatools等生物信息学工具软件处理转录组数据,并分析得到的2组间差异表达基因、基因本体论(gene ontology, GO)注释、GO富集及KEGG代谢通路。结果 菌株T3为对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,黄芩素对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T3的MIC为160μg/mL。与对照组相比,黄芩素组有723个差异表达基因,其中上调基因为659个,下调基因为64个;这些差异基因GO注释主要涉及生物学过程14个功能亚类,细胞组分3个功能亚类,分子功能10个功能亚类;GO富集主要发生在生物调控、次级代谢等过程,KEGG代谢通路主要富集在膦酸盐和次膦酸盐、铁载体非核糖体肽生物合成、ABC转运蛋白等代谢通路。结论 黄芩素通过多途径抑制碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T3生长,其中主要作用靶点是生物调控、次级代谢、膦酸盐和次膦酸盐代谢、铁载体非核糖体肽生物合成及ABC转运蛋白等途径,为进一步研究黄芩素抗CRKP提供依据。

全基因组测序对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T361耐药及毒力基因的分析

目的 分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)T361株的耐药及毒力基因携带情况。方法 肺炎克雷伯菌T361株分离自昆明医科大学第一附属医院干部医疗科患者的痰液标本。采用Vitek-2 compact系统对菌株进行鉴定和药物敏感性试验。使用PCR检测菌株的耐药基因。并用Illumina Hiseq 4000高通量测序平台对其进行全基因组测序,分析菌株携带的耐药及毒力基因。结果 肺炎克雷伯菌T361株对头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、氟诺喹酮类、磺胺类、β内酰胺/β内酰胺酶抑制剂复合物、呋喃妥英及替加环素等抗生素均耐药。PCR检出bla_(KPC-2)、bla_(TEM)、bla_(SHV)及bla_(CTX)等耐药基因。全基因组测序得到1条完整的基因组序列(GenBank登录号:CP053016)及4条质粒序列(GenBank登录号:CP053017、CP053018、CP053019、CP053020)。在染色体基因组中发现,有44种耐药相关基因,包括bla_(SHV-11)、ompK36、ompC、ompK37、lamB等;有50多种毒力基因,包括fimD、mrkC、mrkD、ybtE、ybtT等。在质粒1(pKPN361-1)中发现了4种耐药基因,包括bla_(CTX-M-65)、bla_(TEM-1)、rmtB和bla_(KPC-2);质粒2(pKPN361-2)中发现了6种耐药基因,包括tet(A)、sul1、mphA、aph(3′)-Ia、bla_(LAP-2)和aac(3)-IId;质粒3(pKPN361-3)和质粒4(pKPN361-4)中未检测到耐药基因,并且4个质粒中均未发现毒力基因。结论 碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T361株中携带了大量耐药及毒力基因且产酶耐药基因位于质粒上,造成其易传播,临床上须引起高度重视。

碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌中质粒介导NDM-1基因传播的研究

阴沟肠杆菌是一种重要的院内感染病原菌,常引起呼吸道感染、手术部位感染、尿路感染,脓毒症以及新生儿室的暴发感染.临床分离的阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药最主要的耐药机制是产碳青霉烯酶.质粒是独立于染色体外,能够自我复制的闭合环状双链DNA分子,

阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株的构建及其生物学特性

目的构建阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株，并探讨blaNDM-1基因缺失对阴沟肠杆菌生物学特性的影响。方法采用Red同源重组技术构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株并通过PCR和RT-qPCR法进行验证，对原始菌株和blaNDM-1敲除株进行药敏试验、生长曲线绘制和体外竞争试验。结果PCR、DNA测序和RT-qPCR表明成功构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株。药敏试验显示原始菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均耐药，而blaNDM-1敲除株对其均敏感；原始菌株和基因敲除株在LB液体培养基中具有相似的增殖曲线；两者体外竞争试验的竞争指数值为0．69。结论Red同源重组技术可用于阴沟肠杆菌基因的敲除，且blaNDM-1基因对阴沟肠杆菌的耐药性及竞争力都有影响。

碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌耐药及毒力基因的分析

目的对临床分离的碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌(carbapenem resistant Citrobacter freundii,CRCF)进行耐药及毒力基因分析,为控制CRCF感染提供依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2016年1月至2017年12月22株CRCF,通过VITEK2 Compact系统对菌株进行细菌鉴定及药敏试验,用PCR检测菌株耐药及毒力基因的携带情况。结果药敏结果显示,菌株对青霉素类、头孢菌素类及碳青霉烯类抗生素的耐药率均为100%,对氨曲南、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、四环素、复方新诺明及呋喃妥英等抗生素呈现出不同程度的耐药;22株菌株耐药基因检测结果显示,KPC-2、IMP、NDM-1、TEM、SHV和CTX等阳性率分别为27%、32%、82%、82%、23%和27%,携带2种或以上耐药基因的阳性率为91%;18株菌株毒力基因检测结果显示,ureA、wabG、ycf和uge等阳性率依次为41%、23%、14%和14%,未检测到IroN、allS、KfuB、iutA、ybtS、VatD及fimH等毒力基因。结论该院CRCF碳青霉烯类耐药性主要由NDM-1基因介导,而其毒力主要与脂多糖相关,多重耐药毒力强的CRCF应引起临床高度重视。