牛血孢子虫单一种的分离技术及其保藏方法的研究——微小牛蜱对边缘边虫的传递试验

将洁净微小牛蜱幼虫释放到感染有边缘边虫的牛体上,摘取正在吸血的半饱成虫、饥饿成虫、半饱稚虫,分别人为地转移到3头健康易感牛体上事先用锌明胶贴好的布袋中。使其继续叮咬,试验牛均遭感染,其潜伏期分别为13天、13天、19天。最高染虫率分别达53.1％、12.0％、8.6％,用从感染牛体脱落饱血雌虫的次代幼虫,叮咬4头健康易感牛,检查时间最短的为30天,最长的达180天,在整个检查过程中,4头试验牛的血液涂片,始终均未发现边缘边虫。试验证明,边缘边虫不能通过微小牛蜱经卵传递,只有当代各变态期的蜱,由感染牛体转移到易感牛且继续叮咬时,才能使边缘边虫得以传播。

玉米赤霉烯酮免疫检测技术研究——兔抗玉米赤霉烯酮抗体研制

本课题组制备了F-2毒素人工抗原F-2-BSA和F-2-OA。用F-2-BSA免疫家兔,获得特异性抗血清,I-ELISA测定,效价为2.56×10~4。抑制试验证明,抗体的敏感度为4.0ng/ml,对其衍生物玉米赤霉烯醇为20.0ng/ml。

我国西北地区饲料中霉菌的实验调查

从西北地区１０个规模化饲料加工厂采集１２６份饲料原料及其产品，经霉菌学检验污染率为９６．８％，从样品分离的霉菌鉴定为９个属２２个种，在优势菌中常见产毒素菌少。经霉菌学检验，１２６份样品中的１１７份属轻度霉菌污染，其中８５．７％的饲料原料和８５．７％的饲料原料产品可喂畜禽。在调查的１０个饲料加工厂的饲料，仓储条件差。７个大中型畜禽饲养场的饲料跟踪调查，饲料产品喂畜禽安全。９份黄曲霉群优势的饲料样品，黄霉菌毒素Ｂ＿１检测，其含量均小于０．５μｇ／ｋｇ。分析评价认为，由于西北地区自然地理条件优势，西北地区饲料样品中霉菌现状属轻度污染，在正常情况下饲料对畜禽一般不会构成威胁。

分泌抗赭曲霉素A单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用赭曲霉素A(OA)-BSA合成抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与sp2/0细胞融合。通过克隆和ELISA法筛选,建立三株分泌抗OA单克隆抗体杂交瘤细胞株(3C_(12)、1D_(12)和2G_7)。用间接ELISA法测定,细胞上清液抗体效价为128~χ(3C_(12))和64~χ(1D_(12)和2G_7),腹水抗体效价为10^(-7)(3C_(12)、1D_(12))和10^(-6)(2G_7)。三株单抗(McAb)'均属IgG类,分泌抗体稳定。用竞争间接ELISA测定三株McAb对OA的敏感性为22.5～39.2ng/ml,与异种毒素黄曲霉毒素B_1和ZEN毒素无交叉反应。

玉米赤霉烯酮免疫检测技术研究——分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用F-2-BSA人工抗原免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,建立6株分泌抗F-2毒素的McAb杂交瘤细胞株。用间接ELISA法测定,细胞上清液抗体滴度为2084~×(4H_8)、256~×(6H_9、4H_3、2H_5、2C_8)、16~×(3F_(10));腹水抗体滴度为10^(-9)(4H_3、4H_8),10^(-8)(2H_5)、10^(-7)(6H_9)、10^(-6)(2C_8)、10^(-5)(3F_(10))。用竞争间接ELISA法测定6株McAb对F-2毒素的敏感度为0.8～0.3ng/ml。该抗体与同系物(玉米赤霉烯醇)交叉反应率为9.0％～1.3％。6株McAb均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后,分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定。

竞争间接ELISA检测谷物饲料中的玉米赤霉烯酮

应用抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体（ＺＥＮ－ＭｃＡｂ）建立了竞争间接ＥＬＩＳＡ，用以检测玉米、小麦、饲料中的玉米赤霉烯酮（ＺＥＮ），最低检出量为０．０５ｎｇ／ｍＬ检测范围为０．０５～５００ｎｇ／ｍＬ。检测掺合ＺＥＮ（２５～５００ｎｇ／ｇ）的小麦、饲料、玉米样品，平均回收率，玉米为１０５．８％、小麦为９０％、饲料为１０３．９％；平均批内和批间变异系数，玉米为３．８％、５．８％，小麦为１２．７％、２８％，饲料为１５．２％、６．８％。对玉米、小麦、饲料自然样品检测，竞争间接ＥＬＩＳＡ的检出率高于薄层色谱（ＴＬＣ），检测程序简易快速。

玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原，免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为１：２０８４（４Ｈ８）、１：２５６（６Ｈ９、４Ｈ３、２Ｈ５、２Ｃ８）１：１６（３Ｆ１０）；腹水抗体效价为１０＾９（４Ｈ３、４Ｈ８）、１０＾８（２Ｈ５）、１０＾７（６Ｈ９）、１０＾５（３Ｈ１０）。