重组性融合蛋白TAT-OSBP-MKK6(E)对耐顺铂卵巢癌细胞增殖与侵袭转移的影响

目的观察重组性融合蛋白TAT-OSBP-MKK6(E)对卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞株SKOV3/DDP增殖及侵袭转移的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测SKOV3/DDP细胞经融合蛋白处理后的增殖抑制率及采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后融合蛋白对DDP敏感性的影响,单丹磺酰尸胺染色法检测融合蛋白诱导的自噬情况,QPCR和Western blotting检测SKOV3/DDP细胞Beclin 1的表达情况,Transwell体外迁移和重组基底侵袭实验研究融合蛋白对SKOV3/DDP细胞的侵袭和迁移能力。结果 DDP对SKOV3/DDP细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(37.62±2.63)μg/ml,10、20、40μg/ml融合蛋白作用后,DDP的IC_(50)分别降低至(17.07±0.88)、(11.08±0.57)和(1.96±0.31)μg/ml(P<0.001);以3-MA抑制细胞自噬,可阻断融合蛋白诱导SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性;SKOV3/DDP自噬情况的比较:融合蛋白组、融合蛋白+3-MA组的荧光强度分别为824±107、459±128,均高于对照组的306±143,差异有统计学意义(P<0.05)。Beclin 1 mRNA和蛋白的表达水平随融合蛋白的浓度增加(10、20、40μg/ml),其表达水平升高,各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、DDP组、融合蛋白组和DDP+融合蛋白组中SKOV3/DDP细胞的Beclin 1蛋白表达亦不同,差异有统计学意义(P<0.05),其中DDP+融合蛋白组蛋白表达量最高,为0.876±0.023,其次为融合蛋白组的0.564±0.021。融合蛋白能明显抑制SKOV3/DDP细胞的侵袭和迁移能力,DDP+融合蛋白组和融合蛋白组分别与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),DDP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论融合蛋白可抑制SKOV3/DDP细胞的增殖、侵袭和转移,可能与诱导自噬及上调Beclin 1的表达有关。

二甲双胍逆转人卵巢癌细胞株对顺铂耐药的实验研究

目的探讨二甲双胍对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的耐药逆转作用及机制。方法将人卵巢癌细胞株SKOV3细胞设为亲本组,耐顺铂细胞株SKOV3/DDP细胞分为空白对照组、顺铂组、二甲双胍组和联合用药组(顺铂+二甲双胍组);采用CCK-8法检测不同浓度二甲双胍对SKOV3/DDP细胞的作用,RT-PCR和Western blotting检测各组细胞中内质网应激相关蛋白的表达。结果不同浓度二甲双胍作用24h后,对SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞均有抑制作用,且呈浓度依赖性(P<0.05);当二甲双胍>5 mmol/L时,其对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制率高于SKOV3细胞(P<0.05)。顺铂对SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为15.25μg/ml和118.68μg/ml,SKOV3/DDP的耐药倍数为7.78。联合用药组SKOV3/DDP细胞IC_(50)为73.45μg/ml,耐药倍数为4.81。二甲双胍对SKOV3/DDP细胞对顺铂耐药性的逆转倍数为1.62。亲本组中GRP78 mRNA和蛋白的相对表达水平分别为0.38±0.02和0.24±0.04;顺铂组、二甲双胍组和联合用药组的GRP78 mRNA的相对表达水平分别为0.93±0.02、0.68±0.02、0.49±0.07,与空白对照组的0.83±0.04比较,联合用药组明显降低,其次为二甲双胍组,顺铂组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);GRP78蛋白在各组中表达与其mRNA表达趋势一致,差异均有统计学意义(P<0.05)。顺铂组、二甲双胍组、联合用药组CHOP蛋白的表达量分别为0.42±0.03、0.69±0.03、0.84±0.01,均高于空白对照组的0.39±0.05,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍对人卵巢癌顺铂耐药细胞的耐药性有调节作用,其可能作用机制为通过降低GRP78表达,提高CHOP蛋白表达的内质网应激途径促进细胞凋亡来降低耐药细胞对顺铂的耐药性。

磷石膏改性及其在聚合物的应用研究进展

磷石膏作为一种工业生产副产物。因产量大,占据大量的土地资源,且对环境有危害。因此有必要寻找相关途径以实现磷石膏的有效运用。综述了近年来磷石膏进行有机改性方法,并对磷石膏作为聚丙烯、聚氯乙烯填料的应用进行了综述。最后对改性后的磷石膏在聚合物中的应用进行了展望。

国外碳定价机制经验对中国实现“双碳”目标的启示

当前碳排放管理工作处于发展初期,碳定价机制运行效果尚不明显。通过分析全球碳定价机制运行情况,对比发现中国碳定价机制存在价格低、覆盖范围窄、配套政策不完善等问题。最后借鉴发达国家经验,从提高碳价、增加覆盖范围、完善配套措施等方面提出中国碳定价机制发展的政策建议。

高中语文大单元教学与阅读教学的实施策略

在《普通高中语文课程标准(2022 年版)》(以下简称新《课标》)中提出,应将学习任务群和大单元教学作为语文教学的主要形式,合理整合单元教学内容与优化教育形式,培养学生语文综合素养与学习能力。因此,教师应开展高中语文大单元阅读教学,改变以往单篇课文阅读教学的设计思路,坚持整体性和延伸性原则组合单元文本,提升语文阅读教学的广度与深度,打造高效化语文教学课堂。基于此,本文从注重单元整体性、注重单元互文性、突出任务型学习等方面,对高中语文大单元教学与阅读教学的实施策略进行探究。

云南-东盟农产品外贸依存度测评

随着贸易多元化趋势发展,农产品成为云南省对外贸易主要商品。频繁的交易随之带来风险,但目前地区农产品外贸依存度测算结果差异很大,直接影响风险的确认与相关贸易政策的制定。通过选择适宜方法动态分析2009—2021年云南省对东盟的外贸依存度结构及存在的风险,得出如下结果:云南-东盟农产品外贸依存度整体偏低,且进出口差距大;云南外贸依存度增速低于农业总产值增速;云南农产品贸易合作国集中,市场需求有限;云南-东盟农产品外贸互补与竞争并存。总体而言,云南农产品对东盟的依赖程度不高,需要进一步提高市场份额。同时,当前贸易结构存在风险,应采取平衡进出口贸易、走市场多元化产品差异化道路等方式改变贸易结构,预防风险进一步扩大。

高中语文教学实践策略研究

高中阶段是学生学习语文的一个新的阶段,在这一阶段中,学生需要进一步感受中国古诗词的韵律美,以及学习各种现代类型的文章,因此是提升学生综合语文水平的关键时期。为了能在这一阶段进行好语文教学,高中语文教师需要实施有针对性的课堂教学策略,为此首先应转变传统的教学观念,强调学生们的课堂主体地位;其次引导学生们一起交流合作,积累学生们的学习经验;最后丰富语文课堂教学的情境,以提升学生们的语文素养等。