基于网络药理学与动物实验验证探究防己茯苓汤治疗心肌纤维化作用机制

目的基于网络药理学方法探讨防己茯苓汤治疗心肌纤维化(MF)的潜在靶点和作用机制,并进行动物实验验证。方法通过TCMSP数据库检索并筛选防己茯苓汤药物活性成分,获取相应靶点,通过GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库检索MF疾病靶点,二者取交集,获得防己茯苓汤治疗MF的潜在作用靶点,通过STRING数据库结合Cytoscape3.7.2软件构建蛋白相互作用网络,筛选核心靶点,使用DAVID数据库对核心靶点进行GO和KEGG通路富集分析。小鼠皮下注射异丙肾上腺素构建MF模型,予防己茯苓汤干预14 d,组织病理学方法观察心肌损伤和胶原沉积,ELISA检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10含量,RT-qPCR和免疫组化染色检测心肌组织PI3K/Akt/p65通路mRNA和蛋白表达,透射电镜观察心肌组织超微结构变化。结果共筛选出防己茯苓汤活性成分127个及其治疗MF靶点200个,Kanzonol F、甘草宁O、光甘草定等为主要活性成分,PIK3CA、AKT1、EP300等为核心靶点,与MF密切相关的富集通路为PI3K-Akt信号通路、细胞凋亡通路、FoxO信号通路、mTOR信号通路、细胞衰老、TGF-β信号通路等。与模型组比较,防己茯苓汤组小鼠心脏重量指数、心胫比和心肌细胞横截面积明显降低(P<0.001);血清CK-MB含量明显降低(P<0.01),促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显降低(P<0.01,P<0.05),抗炎细胞因子IL-10含量明显升高(P<0.05);心肌组织炎症细胞浸润、心肌损伤、胶原沉积和纤维化程度明显减轻;RT-qPCR和免疫组化染色显示,防己茯苓汤明显降低心肌组织PI3K/Akt/p65通路mRNA和蛋白表达水平(P<0.05,P<0.001);透射电镜显示,防己茯苓汤可改善心肌组织超微结构,尤其是线粒体结构。结果防己茯苓汤通过KanzonolF、甘草宁O、光甘草定等活性成分,作用于PIK3CA、AKT1等靶点,调控PI3K/Akt/p65信号通路,发挥抗MF作用。

徐健众主任中医师治疗久泻的经验总结

慢性腹泻是消化系统常见疾病之一,属于中医“久泄”范畴,具有长期反复发作的特点,影响患者身心的健康。西医治疗该病的方法单一,效果欠佳。徐健众主任中医师从医30余年,治疗久泄具有丰富的临床经验。徐师认为久泻核心病机为五脏失和,浊邪内生,其中五脏失和为之本,脾虚为五脏失和的核心,而心、肝、肺、肾导致的久泄多发生在脾虚的基础之上;浊邪内生为之标,其中又以湿邪最为常见,并且影响疾病的发展,部分可合并“阳虚”“气郁”“血瘀”“食滞”等,虚实夹杂、寒热并见。治疗上以安五脏,祛浊邪为主,安五脏以健脾助运为要,从健脾益气、恢复中焦升降功能、消食和胃三个方面入手,可灵活配合使用疏肝、宣降肺气、安神、补肾等方法。祛浊邪以化湿为首要,以薛生白的祛湿四法(宣湿、燥湿、化湿、渗湿)为法,以四君子汤、参苓白术散、资生丸等为基础方加减,同时灵活配合使用治泻九法,临床效果显著。部分慢性腹泻为器质性疾病导致,因此徐师重视通过肠镜等检查排除器质性疾病。此外,因慢性腹泻易反复,徐师重视巩固治疗及调护。

固本益肠片联合美沙拉嗪肠溶片对溃疡性结肠炎患者血清炎症因子及免疫功能的影响

目的:探讨固本益肠片联合美沙拉嗪肠溶片治疗溃疡性结肠炎(UC)患者的临床疗效及对血清炎症因子及免疫功能的影响。方法:收集2020年9月—2022年3月期间重庆市中医院收治的UC患者120例。按照抛掷硬币法将患者随机分为观察组和对照组,每组各60例。对照组患者接受美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组接受固本益肠片联合美沙拉嗪肠溶片治疗。对比两组临床疗效、临床症状消失时间、炎症因子[C反应蛋白(CRP)、白介素-10(IL-10)及白介素-1β(IL-1β)]、免疫功能指标[CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)]的变化情况,评价两组用药安全性。结果:观察组的临床总有效率为90.00%,高于对照组的73.33%(P<0.05)。观察组腹泻、腹痛、脓血便等临床症状消失时间短于对照组(P<0.05)。治疗4个疗程后,观察组的CRP、IL-1β水平低于对照组,IL-10水平高于对照组(P<0.05)。治疗4个疗程后。治疗4个疗程后,观察组的CD8^(+)水平低于对照组,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率组间对比无差异(P>0.05)。结论:固本益肠片联合美沙拉嗪肠溶片治疗UC,可促进临床症状改善,且不增加不良反应发生率,安全可靠,同时还可降低炎症因子水平,调节机体免疫功能。

防己茯苓汤对心肌纤维化小鼠巨噬细胞极化和氧化应激的影响

目的:探讨防己茯苓汤对心肌纤维化小鼠巨噬细胞极化和氧化应激的影响。方法:通过皮下注射异丙肾上腺素(5 mg·kg^(-1)·d^(-1))构建心肌纤维化小鼠模型。将50只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、防己茯苓汤低、高剂量组、酒石酸美托洛尔(Meto)组,每组10只。假手术组、模型给予相应体积生理盐水灌胃,防己茯苓汤低、高剂量组分别予以防己茯苓汤低、高剂量灌胃(3.315、13.26 g·kg^(-1)·d^(-1)),Meto组予以酒石酸Meto灌胃(15 mg·kg^(-1)·d^(-1))。2周后,观察小鼠心脏形态,计算平均细胞横截面积、心脏质量指数和心胫比,组织病理学方法观察心肌胶原沉积,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、炎症因子指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10]和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)]的表达水平,免疫组织化学染色观察心肌组织CD86和CD206蛋白表达水平。结果:与模型组比较,防己茯苓汤低、高剂量组和Meto组小鼠心脏外观形态明显减小,平均心肌细胞横截面积、心脏质量指数和心胫比显著降低(P<0.01);血清CK-MB、TGF-β1水平明显降低(P<0.05,P<0.01);血清促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),抗炎细胞因子IL-10明显升高(P<0.05);炎症细胞浸润、心肌损伤、胶原沉积和纤维化程度明显减轻;巨噬细胞极化标志物CD86表达水平显著降低(P<0.01),CD206表达水平显著升高(P<0.01);氧化应激指标MDA表达水平显著升高(P<0.01),SOD、GSH表达水平显著降低(P<0.01)。结论:防己茯苓汤可以改善异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化,其机制可能是通过调控巨噬细胞极化和氧化应激发挥作用。