血浆超敏C反应蛋白和同型半胱氨酸水平与2型糖尿病周围神经病变的相关性研究

目的探讨分析血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)及同型半胱氨酸(Hcy)与2型糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法将120例2型糖尿病住院患者,按神经自主症状和肌电图检查分为单纯糖尿病患者组(SDM组)和糖尿病周围神经病变组(DPN组),所有患者测血浆hs-CRP、Hcy水平、空腹血糖和糖化血红蛋白(Hb A1C),同时测定血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。结果糖尿病周围神经病变组患者hs-CRP和Hcy水平明显高于单纯糖尿病组hs-CRP和Hcy水平,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示:糖尿病神经病变患者血清hs-CRP水平与Hcy水平呈正相关。Logistic回归分析显示:糖尿病病程、糖化血红蛋白、血浆hs-CRP和Hcy水平与DPN相关,是发生DPN的危险因素。结论血浆hs-CRP和Hcy与糖尿病周围神经病变发生密切相关,血浆hs-CRP和Hcy水平检测在糖尿病周围神经病变患者诊断与治疗中有较好的临床应用价值。

糖尿病大鼠肾组织内Smads信号通路活化的动态观察

目的动态观察大鼠糖尿病肾病发生发展过程中TGF-β1的下游信号分子正负反馈调节因子Smad2及其活化形式Psmad2在肾脏的表达变化。方法 40只SD大鼠随机分成4组:正常对照组、4周组、8周组和16周组。链脲菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,动态观察各组大鼠血压,24h尿量,ELISA测尿液浓度从而行24h尿白蛋白定量、肾重/体重、血肌酐和肾脏病理。免疫组化、Western blotting方法动态观察糖尿病大鼠肾病发生发展过程中肾组织内Smad2和Psmad2蛋白表达。结果 Smad2蛋白4周表达比正常增多,但差异无统计学意义(P>0.05),从8周起表达明显多于正常组(P<0.05),Psmad2蛋白从4周开始即比正常组表达增多(P<0.05),且随着糖尿病进展逐渐增加。结论 Smad2信号转导通路参与了糖尿病肾病肾脏纤维化过程,早期Smad2信号蛋白活化较明显,继而Smad2蛋白也表达增加,再刺激Smad2活化增多,形成的放大效应是导致糖尿病肾病肾脏纤维化进展重要的信号转导途径之一。

Smad7/Psmad2表达失衡在糖尿病肾病大鼠肾脏组织的动态观察

目的:动态观察大鼠糖尿病肾病发生发展过程中转化生长因子(TGF)-β1的下游正负反馈调节因子Smad7、Psmad2在肾脏的表达变化及对细胞外基质主要成分CollagenⅣ表达的影响。方法:40只SD大鼠随机分成4组:CON、DM4W、DM8W、DM16W组。STZ诱导糖尿病肾病模型,Masson染色动态观察各组大鼠胶原合成变化。Westernblot、免疫组化方法动态观察Smad7、Psmad2、CollagenⅣ表达变化。结果:Masson染色结果示,随糖尿病肾病进展,肾内胶原生成逐渐增多,Smad7从4周开始即比正常组表达减少,且随时间进展逐渐减少(P<0.05)。Psmad2、CollagenⅣ从4周开始表达增多,随时间的延长逐渐增多(P<0.05)。到16周Smad7/Psmad2明显失衡。结论:TGF-β/Smad信号通路的正负反馈调节蛋白失衡导致细胞外基质大量沉积及胶原生成可能是糖尿病肾病肾脏纤维化进展重要信号转导途径之一。

培哚普利对糖尿病大鼠肾组织内p-smad2及Ⅳ型胶原表达的影响

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂培哚普利对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型肾组织Smad2活化形式p-smad2及Ⅳ型胶原蛋白表达的影响。方法链脲佐菌素诱导的16只糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和培哚普利治疗组,另以8只正常大鼠作为对照组。于24周末观察血糖、血压、24 h尿蛋白、肾重/体重。免疫组织化学检测肾组织p-smad2、Ⅳ型胶原蛋白表达。Western-blot检测大鼠肾组织p-smad2蛋白表达水平。结果模型组和治疗组血糖明显高于正常组,但治疗组和模型组差异无显著性,模型组尿白蛋白水平均显著高于正常组,治疗组尿蛋白较模型组显著降低。免疫组化半定量结果示p-smad2蛋白在培哚普利治疗组较模型组表达显著减少,Ⅳ型胶原在培哚普利治疗组较模型组表达显著减少。Western-blot示p-smad2在治疗组较模型组显著减少。结论培哚普利可以通过影响糖尿病大鼠肾脏内Smad2活化,从而下调Ⅳ型胶原表达来延缓糖尿病纤维化进程。

长沙地区糖尿病及糖尿病前期流行病学状况及其危险因素研究

目的:分析长沙地区糖尿病及糖尿病前期流行病学状况和其危险因素。方法:抽取长沙地区长住居民2 961例,均给予相关体格检查及实验室检查,分析其糖尿病及糖尿病前期患病率、危险因素。结果:糖尿病患病306例(10.33%),糖尿病前期患病690例(23.30%);男性患病率均高于女性;随着年龄的增长,其患病率均呈上升趋势(P<0.05)。年龄、文化程度、BMI、糖尿病家族史及高血压病史为糖尿病及糖尿病前期患者的独立危险因素(P<0.05)。结论:糖尿病及糖尿病前期患者其男性发病率均较女性高,且年龄、文化程度、BMI、糖尿病家族史及高血压病史为独立危险因素。

长沙地区高尿酸血症患病率现状及危险因素研究

目的:探讨长沙地区居民高尿酸血症(HUA)患病率现状及危险因素。方法:采用分层整群抽样方法选取2012年5月至2013年5月长沙地区符合标准的居民2961例,采集居民各项资料,并对2961例居民进行空腹血糖、血脂4项[三酰甘油(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血尿酸的测定,分析长沙地区高尿酸血症患病率现状及危险因素。结果:(1)2961例居民中,符合HUA诊断标准者共670例,HUA总患病率为22.62%,随着年龄的增大,HUA患病率呈现逐渐上升的趋势,差异具有统计学意义(P<0.01);其中男性HUA患病率为37.68%,高于女性8.50%,差异具有统计学意义(P<0.01);(2)HUA患病的单因素分析结果显示:人均收入、性别、饮酒频率、高血脂、饮食习惯、体力活动频率是影响长沙地区居民HUA患病的单因素,差异具有统计学意义(P<0.001);(3)多因素Logistic回归分析结果显示:男性、饮酒频率、人均收入每月≥5000元、喜甜的饮食习惯、高血脂、体力活动频率均为影响长沙地区居民HUA患病的危险因素,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:长沙地区HUA患病率较高,其中男性患病者多于女性,减少高热量食物的摄入、加强相应体育锻炼、戒酒、合理的控制血脂水平可有效预防HUA。

西洛他唑对糖尿病下肢动脉病变患者踝臂指数和血脂的影响

目的观察西洛他唑对糖尿病下肢动脉病变的疗效及安全性。方法选择2型糖尿病伴下肢动脉病变患者70例,分为治疗组与对照组,治疗组在降糖、降脂、改善微循环治疗的基础上,给予西洛他唑治疗,对照组加用拜阿司匹林,连续治疗24周,治疗前后分别检测两组血生化指标、患肢踝臂指数。结果治疗组患肢踝臂指数(ABI)在治疗后增高明显(P<0.05),与对照组比较有统计学意义(P<0.05);血脂治疗后有明显降低,与对照组比较有明显差异(P<0.05);心肌酶学,肝肾功能等生化指标两组治疗前后无明显差异。结论西洛他唑对治疗2型糖尿病(T2DM)下肢动脉病变是一种安全有效的药物。

震动感觉阈值对诊断早期糖尿病周围神经病变的临床意义

目的探讨震动感觉阈值(VPT)检测在新发2型糖尿病周围神经病变(DPN)筛查中的应用效果。方法对新确诊的50例无足麻木、灼痛、刺痛等感觉的2型糖尿病患者分别分组进行VPT检测及神经肌电图检测,以神经肌电图检查作为"金标准",将结果进行比较。结果 VPT检测与神经肌电图检测比较,VPT检测组的DPN发生率为36.00%,神经肌电图检测组为38.00%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论新确诊的2型糖尿病患者存在较高的DPN及糖尿病足风险,足部VPT对于新确诊的2型糖尿病患者DPN的筛查及治疗有指导作用,值得临床推广应用。

大鼠骨髓间充质干细胞体外生长增殖特点的实验研究

目的 了解应用全骨髓贴壁法分离的大鼠骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）的生长、增殖特点,以及接种密度、培养时间对细胞增殖的影响,为预防和治疗机体退行性疾病等提供多潜能的种子细胞.方法 通过全骨髓贴壁法分离SD大鼠BMSCs,在体外条件下培养,应用倒置显微镜观察细胞形态学特征及流式细胞仪鉴定、检测大鼠BMSCs表面标志抗原,并通过分析对接种于96孔板不同接种密度（2×103、5×103、1×104个细胞/ml）连续培养10 d细胞生长曲线的特点,研究接种密度和培养时间对BMSCs生长、增殖的影响.结果 流式细胞仪分析CD29细胞阳性率为97.68%（7607/7788）,CD34、CD45细胞阳性率分别为7.93%（661/8340）、2.76%（215/7788）,符合BMSCs表面标记物表达特征.通过换液及消化传代,3代以上的BMSCs较为均一纯化,呈典型的旋涡或放射状生长,约传代至7～10代时出现细胞衰老并衰老细胞逐渐增多;中等密度（5×103个细胞/ml）接种细胞的生长曲线呈较典型的S形曲线.第1、2天为潜伏期;第3～5天为对数生长期;第6天细胞数目进入平台期;第8～10天细胞数量稍有下降.结论 全骨髓贴壁法是获得BMSCs较为简便有效的方法,且中等量接种密度更有利于细胞增殖,可获得更多的种子细胞.

糖尿病治疗仪联合甲钴胺对糖尿病周围神经病变Hs-CRP、Hcy的影响及疗效

目的:观察糖尿病治疗仪联合甲钴胺对糖尿病周围神经病变的炎性细胞因子超敏C反应蛋白(Hs-CRP)及高同型半胱氨酸(Hcy)的影响及临床疗效。方法:将80例糖尿病周围神经病变的住院患者,随机分为治疗组和对照组各40例。在糖尿病基础治疗的同时,对照组:甲钴胺500μg,1次/日,肌肉注射。治疗组:在对照组基础上加用糖尿病治疗仪对患者的中脘、命门、三焦俞、太溪、复溜、双侧足三里穴和三阴交穴进行磁热治疗,2次/日,每次20分钟;2周为一疗程,间隔3个月开展下一疗程治疗,共治疗三个疗程,观察两组患者治疗前、后临床症状改善,神经传导速度,Hs-CRP,Hcy的变化,同时对两组患者治疗前后进行TSS评分。结果:治疗后,两组患者TSS评分、Hs-CRP、Hcy均显著降低,神经传导速度明显增加。结论:糖尿病治疗仪联合甲钴胺可显著改善糖尿病周围神经病变患者的临床症状,同时更显著降低Hs-CRP及Hcy,疗效优于单独使用甲钴胺。

沉默转化生长因子β诱导基因对糖尿病大鼠肾组织内Smad2、P-smad2及Ⅳ型胶原表达的影响

目的 探讨沉默转化生长因子β诱导基因（TIEG-siRNA）对糖尿病大鼠肾组织Smad2、p-shred2及Ⅳ型胶原表达的影响.方法 链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型10只,分为空载体组和TIEG-siRNA治疗组,另以5只正常大鼠作为对照组.治疗组和空载体组分别给予TIEG-siRNA病毒液和空载体质粒0.5 ml,于0、72 h两次尾静脉注射,于成模后4周处死.实时荧光定量PCR检测大鼠肾组织内TIEG-mRNA的表达水平,免疫组织化学检测肾组织Smad2、p-smad2、Ⅳ型胶原蛋白表达.Western印迹检测大鼠肾组织Smad2,p-smad2蛋白表达水平.结果 TIEG-mRNA表达在TIEG-siRNA 治疗组（0.0636±0.0066）较空载体组（0.1054±0.0111）明显下调（P〈0.05）,免疫组化半定量结果示Smad2蛋白表达在治疗组[（2.13±0.19）%]较空载体组[（2.53±0.34）%]明显减少（P〈0.05）,p-smad2蛋白和Ⅳ型胶原表达在TIEG-siRNA治疗组较空载体组明显减少[（21.77±2.00）%比（27.03±2.51）%,（3.67士0.42）%比（4.85±0.43）%,P〈0.05].Western印迹显示Smad2在治疗组比空载体组明显减少（0.32±0.09比0.50±0.04,P〈0.05）.P-smad2在治疗组比空载体组明显减少（0.16±0.01比0.32±0.02,P〈0.05）.结论 TIEG-siRNA可以通过影响糖尿病大鼠肾脏内Smad2表达及其活化,从而下调Ⅳ型胶原表达来延缓糖尿病纤维化进程.

骨碎补总黄酮在不同糖浓度下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的 了解骨碎补总黄酮在不同糖浓度下对骨髓间充质干细胞（BMSC）成骨分化的影响,为在糖尿病性骨质疏松症的防治提供理论依据.方法 对SD大鼠BMSC在体外条件下培养,进行定向成骨诱导分化,采用全骨髓贴壁法分离纯化BMSC.实验分为低糖组、高糖组、低糖诱导组、高糖诱导组、低糖骨碎补组、高糖骨碎补组6组,检测相关成骨指标碱性磷酸酶（ALP）活性、矿化结节数目、胶原蛋白.观察骨碎补总黄酮在不同糖浓度下对BMSC成骨分化的影响.结果 骨碎补总黄酮能促进BMSC成骨指标的表达,低糖骨碎补组成骨指标的表达高于低糖诱导组[ALP活性（0.439±0.024比0.385±0.029）、ALP染色阳性率（48.7%比35.0%）、矿化结节数（9.75±1.71个/HP比6.25 ±0.96 个/HP）、Ⅰ型胶原蛋白积分（2.21±0.07比1.93±0.13）]差异均有统计学意义（均P＜0.05）.高糖骨碎补组高于高糖诱导组[ALP活性（0.352±0.022比0.139±0.013）、ALP染色阳性率（25.3%比22.7%）、矿化结节数（4.50±1.29个/HP比3.25±1.50个/HP）、Ⅰ型胶原积分（1.70±0.03比1.28±0.27）]差异均有统计学意义（均P＜0.05）.不同糖浓度组的糖基化终末产物（AGE）水平随糖浓度和培养时间延长呈增高趋势（均P＜0.05）,与Ⅰ型胶原蛋白的表达呈负相关（r=-0.410,P＜0.05）.结论 骨碎补总黄酮可以促进BMSC成骨分化并减轻高糖条件下对成骨分化的抑制作用.

长沙市糖调节受损居民强化生活方式干预效果观察

目的 :观察强化生活方式干预对长沙市糖调节受损人群的效果。方法 :对长沙市2610名社区居民健康普查中筛选出的100例IGR患者,随机分为强化生活方式干预组和对照组,接受6个月的强化生活方式干预,在研究开始和结束对所有研究对象进行体格检查(包括身高、体重、腰围、臀围、血压)和生化指标(包括FPG、OGTT2hPG、血脂四项(TC、TG、H-LDL,L-LDL)、尿酸)。结果 :与对照组比较,干预组患者BMI值、腰/臀比、血压、FPG、OGTT2hPG、TC、TG、L-LDL、尿酸水平明显下降。HDL-C水平升高不明显。对照组的糖尿病6个月累积发病率为10%,而干预组未发现糖尿病。对照组6个月累积血糖转变为正常率为4%,低于干预组(18%)。结论 :强化生活方式干预可以改善长沙市居民的代谢相关指标,降低糖尿病发病风险,促进向正常血糖转化。

转化生长因子-β早期反应基因小干扰RNA对糖尿病大鼠肾组织内Smad7蛋白及Ⅳ型胶原表达的影响

目的 构建慢病毒载体表达小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)以沉默转化生长因子-β(TGF-β)早期反应基因(TIEG),观察其对糖尿病大鼠肾组织中Smad信号蛋白通路负反馈调节因子Smad7及对细胞外基质主要成分Ⅳ型胶原的影响作用.方法 选取体莺200～230 g的SD雄性大鼠15只,分为3组,对照组5只,其余10只用链脲佐菌素(STZ)诱导制成糖尿病大鼠模型,随机分为TIEGsiRNA治疗组(5只)和空载体组(5只),治疗组和空载体组于成模后分别予TIEGsiRNA病毒液和空载体液尾静脉注射,治疗4周后实时PCR检测大鼠肾组织内TIEG的表达水平;Westernblot和免疫组化检测Smad7蛋白表达水平;免疫组化检测Ⅳ型胶原蛋白表达水平;MASSON染色检测胶原生成.单因素ANOVA方差分析,方差不齐用Kruskal-Wallis秩和检验.结果 免疫组化半定量结果示Smad7蛋白在TIEGsiRNA治疗组(3.2±0.2)%较空载体组(1.7±0.5)%表达明显增多,Western-blot也同样验证了免疫组化结果(F=7.934,P=0.006),IV型胶原蛋白在TIEGsiRNA治疗组[(3.7±0.4)%]较空载体组[(4.8±0.4)0%]表达明显减少,MASSON染色半定量结果示纤维化程度在TIEGsiRNA治疗组[(3.5±0.4)%]较空载体组[(4.4±0.4)%]减少,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 TIEGsiRNA可以通过上调糖尿病大鼠肾组织内Smad信号蛋白通路负反馈调节因子Smad7减少肾脏纤维化来延缓糖尿病进程.

培哚普利对糖尿病肾病肾组织清道夫受体A基因表达的影响

目的 研究清道夫受体A（scavenger receptor A,SR-A）基因在糖尿病大鼠肾组织中的表达及血管紧张素转换酶抑制剂-培哚普利的干预作用.方法 将大鼠随机分为正常对照组,糖尿病组和ACEI干预组,采用一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ,60 mg/kg）的方法 建立糖尿病模型,ACEI干预组以培哚普利4mg/（kg·d）灌胃24周.检测各组大鼠的血糖和24 h尿白蛋白,行HE及Masson染色观察肾脏形态学变化,免疫组织化学检测肾小球和小管间质中CD68阳性的巨噬细胞,荧光实时定量PCR测定肾组织中SR-A mRNA表达水平.结果 与对照组相比,糖尿病组大鼠血糖和24 h尿白蛋白均显著上升[（5.3±0.6）mmol/L vs（26.7±3.3）mmol/L;（2.7±1.3）mg/24 h vs（26.7±1.8）mg/24 h;P＜0.05];细胞外基质增多,部分肾小管上皮细胞萎缩、空泡样变性;肾小球和小管间质CD68阳性的巨噬细胞数及肾组织SR-A mRNA的表达均显著上调[（0.77±0.24）个gcsvs（2.55±0.46）个/gcs;（6.13±0.50）个/HPF vs（11.9±2.12）个/HPF,5.6±1.2 vs 1.5±0.2,P＜0.05].ACEI干预后,上述指标除血糖外均被明显抑制[[（3.6±1.4）mg/24h;（1.03±0.37）/gcs;（8.28±1.19）/HPF;3.4±0.7,P＜0.05].结论 ACEI对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能部分与下调肾组织SR-A表达有关.