微囊藻毒素-LR诱导NLRP3炎症小体活化的肝组织细胞类型鉴定

目的:研究微囊藻毒素-LR(microcystin-LR, MC-LR)诱导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotidebinding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3)活化发生的肝组织细胞类型。方法:从同一只小鼠肝脏分离肝实质细胞和Kupffer细胞,分别经梯度剂量的MC-LR处理后,Western Blot检测MC-LR对两种细胞NLRP3炎症小体表达和活性相关蛋白的影响;免疫荧光共定位观察NLRP3在肝实质细胞和Kupffer细胞中的表达;流式细胞术检测MCLR对Kupffer细胞焦亡率的影响。结果:MC-LR可进入肝实质细胞和Kupffer细胞,并在两种细胞均可引起代表NLRP3炎症小体活性的蛋白Caspase-1(p10)、白细胞介素-1β(p17)表达增加;免疫荧光双标法显示,MC-LR诱导的NLRP3定位于肝实质细胞和Kupffer细胞,同时Kupffer细胞焦亡率增加。结论:MC-LR可诱导肝实质细胞和Kupffer细胞发生NLRP3炎症小体活化,但肝实质细胞对MC-LR毒性的敏感程度明显高于Kupffer细胞。