草苁蓉提取物对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:研究草苁蓉乙醇提取物(Boschniakia rossica ethanol extract,BREE)对H2O2诱导的Hep G2细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:用H2O2诱导Hep G2细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyltetrazolium bromide,MTT)比色法检测BREE对Hep G2细胞氧化损伤的保护作用;比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的释放率,以及细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdelyde,MDA)水平;蛋白印迹法测定细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)总蛋白及其磷酸化形式的表达水平以及核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的核内转移。结果:BREE单独处理时,在所测质量浓度范围内对Hep G2细胞增殖无显著影响。与模型组相比,BREE能显著提高氧化损伤细胞的存活率;降低氧化损伤细胞培养液中LDH、ALT和AST的释放;降低细胞MDA水平,增高细胞SOD活性和GSH含量。氧化损伤发生的不同时期,ERK、JNK、p38 MAPK和NF-κB蛋白均有激活,而BREE在氧化损伤发生1 h时减少ERK激活和NF-κB核转移,氧化损伤发生12 h时减少JNK蛋白激活。结论:BREE对H2O2所致Hep G2细胞氧化应激损伤具有保护作用,此作用可能与其抑制ERK、JNK的活化和NF-κB的核内转移有关。

草苁蓉多糖对过氧化氢损伤HepG2细胞NF-κB表达的影响

目的探讨草苁蓉多糖(BRPS)对过氧化氢(H_2O_2)损伤的Hep G2细胞核转录因子(NF)-κB表达的影响。方法以Hep G2细胞为研究对象,通过H_2O_2诱导细胞氧化应激损伤模型,采用蛋白印迹法检测NF-κB、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、血红素氧合酶(HO)-1、环氧化酶(COX)-2以及核因子-E2相关因子2(Nrf2)的蛋白表达。结果 H_2O_2损伤Hep G2细胞后,NF-κB p65和Nrf2蛋白水平升高,i NOS、HO-1、COX-2蛋白水平升高。BRPS处理可降低Hep G2细胞NF-κB p65水平,对Nrf2蛋白水平无显著影响。BRPS同时降低i NOS、HO-1蛋白水平,但对COX-2蛋白水平无影响。结论 BRPS降低H_2O_2损伤的Hep G2细胞i NOS、HO-1蛋白水平,这可能与降低NF-κB活化有关。

草苁蓉多糖对HepG2细胞氧化应激的抑制作用

研究草苁蓉多糖(BRPS)对过氧化氢(H_2O_2)所致HepG2细胞氧化应激的抑制作用。以HepG2细胞为研究对象,通过H_2O_2诱导细胞氧化应激损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞存活率;比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平;蛋白印迹法测定细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)活化水平。结果表明,BRPS在质量浓度12.5 mg/L^50 mg/L范围内对HepG2细胞存活率无显著影响,对细胞安全。而H_2O_2诱导使HepG2细胞存活率和抗氧化能力下降,细胞内ERK和JNK磷酸化水平升高。与H_2O_2模型组相比,BRPS预处理可提高细胞存活率;降低培养液中LDH、AST和ALT活性;降低细胞内MDA含量,升高细胞中SOD活性和GSH含量,降低细胞内ERK和JNK磷酸化水平。提示,BRPS对H_2O_2所致HepG2细胞氧化应激具有抑制作用,减轻其细胞损伤。

祁州漏芦乙醇提取物对Chang Liver细胞损伤的保护作用

目的探索祁州漏芦乙醇提取物（RUEE）对过氧化氢（H2O2）致肝细胞损伤的保护作用。方法以H2O2损伤Chang Liver细胞建立氧化应激模型,以不同浓度RUEE（12.5~400 mg/L）进行干预。采用MTT法检测细胞存活率;以微板比色法检测培养液中LDH和转氨酶活性以及细胞中还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量;免疫印迹技术检测核因子-E2相关因子2（Nrf2）蛋白含量。结果 RUEE在12.5~100 mg/L范围内对Chang Liver细胞存活率无显著影响,不具细胞毒作用。与对照组相比,H2O2组细胞内氧化应激增强,细胞损伤显著。RUEE能剂量依赖性地提高细胞存活率,降低细胞培养液中LDH、ALT、AST的释放;降低细胞MDA含量,升高细胞GSH含量,增高核中Nrf2蛋白水平。结论祁州漏芦对H2O2致肝细胞氧化应激损伤具有保护作用。

祁州漏芦通过下调JNK和NF-κB抑制H_2O_2致肝细胞凋亡

研究祁州漏芦对H_2O_2所致HepG2细胞凋亡的抑制作用机制。建立H_2O_2诱导的人HepG2细胞损伤模型,采用MTT法检测细胞存活率;采用化学比色法检测LDH,ALT,AST活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测细胞SOD活性,二硫代二硝基苯甲酸法检测GSH含量,采用硫代巴比妥酸法检测MDA生成量,比色法测定Caspase-3,8,9的相对活性;蛋白印迹法测定Cleaved Caspase-3(Casp-3),细胞色素c(Cyto c)和NF-κB,ERK,JNK,p38 MAPK及其磷酸化蛋白的表达。结果显示,祁州漏芦在质量浓度25~400 mg·L^(-1)对HepG2细胞活力无显著影响。H_2O_2降低细胞存活率,造成细胞损伤,并上调Casp-3,胞浆Cyto c,p-JNK以及核NF-κB蛋白水平。与模型组比较,祁州漏芦组细胞存活率升高;培养液中LDH,ALT和AST活性降低;细胞内MDA含量降低,SOD活性和GSH含量升高,Caspase-3,8,9相对活性降低,细胞Casp-3和胞浆Cyto c蛋白表达降低,细胞p-JNK及核NF-κB蛋白水平降低。提示,祁州漏芦对H_2O_2所致HepG2细胞凋亡具有抑制作用,其作用可能与其抑制JNK激活和NF-κB核转位作用有关。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床感染现状及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用phonix-100对314株金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验,数据统计使用WHONET5.5软件及SPSS17.0软件进行。结果共分离出314株金黄色葡萄球菌,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)164株,占52.2%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)150株,占47.8%;标本来源以痰液为主,占58.3%,其次是伤口分泌物占29.3%;MRSA和MSSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺无耐药,MRSA对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、利福平、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、克林霉素、红霉素、四环素耐药率分别为86.6%、89.6%、93.3%、43.3%、87.8%、6.7%、84.1%、84.1%、85.3%;MSSA对青霉素、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、利福平、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、克林霉素、红霉素、四环素耐药率分别为92.0%、0.7%、32.7%、32.7%、2.7%、10.0%、34.7%、36.0%、59.3%、22.0%;MRSA对大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、四环素类、克林霉素耐药率明显高于MSSA。结论 MRSA分离率较高,耐药性严重,应引起重视,临床应根据药敏试验结果合理选择抗菌药物。

草苁蓉多糖对张氏肝细胞氧化损伤保护作用

目的探讨草苁蓉多糖对过氧化氢(H_2O_2)致张氏肝细胞氧化损伤的保护作用及机制。方法以张氏肝细胞为研究对象,用H_2O_2诱导建立细胞氧化应激损伤模型,噻唑蓝法检测细胞存活率;分光光度法测定细胞外液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)及细胞中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与对照组比较,模型组肝细胞存活率[(52.5±1.2)%]下降,细胞外液中ALT、AST、LDH活力[分别为(23.5±2.9)、(29.4±2.9)、(595.4±5.6)U/L]升高,细胞中SOD活性和GSH含量[分别为(163.1±6.1)U/mg prot、(8.91±1.26)mg/g prot]下降,丙二醛含量[(12.6±2.6)nmol/mg prot]升高;与模型组比较,50 mg/L草苁蓉多糖组肝细胞存活率[(79.0±5.5)%]升高,细胞外液中ALT、AST、LDH活力[分别为(10.4±2.9)、(14.4±3.2)、(374.4±12.5)U/L]降低,细胞中SOD活性和GSH含量[分别为(323.6±17.3)U/mg prot、(15.4±0.52)mg/g prot]升高,细胞MDA含量[(6.93±0.75)nmol/mg prot]降低。结论草苁蓉多糖对H_2O_2所致张氏肝细胞损伤具有一定保护作用,其机制可能与提高细胞抗氧化能力有关。

祁州漏芦对肝衰竭小鼠肝细胞凋亡的拮抗作用

目的研究祁州漏芦提取物(RUE)对内毒素和半乳糖胺诱发的急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡的拮抗作用。方法应用内毒素和半乳糖胺制备小鼠急性肝衰竭模型,采用分光光度法检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),用苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,用比色法检测肝脏Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活化水平,用琼脂糖凝胶电泳法检测小鼠肝细胞DNA断裂情况。结果与对照组比较,模型组小鼠血清ALT、AST活性升高,肝组织病理学损伤加重;血清TNF-α增高;肝组织Caspase-3、8和9相对活性升高,肝细胞DNA断裂程度增高。与模型组比较,RUE组小鼠血清ALT、AST活性降低,肝组织损伤减轻;血清TNF-α水平下降;肝Caspase-3、8和9相对活性降低,肝细胞DNA断裂程度减少。结论祁州漏芦对内毒素和半乳糖胺致急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡具有拮抗作用。

紧扣“七个点”提高课堂实效——如何上好高质量的思想品德优质课

一节好课的标准是：学会一点知识、懂得一点道理、得到一点感悟、引发一点思考。一节好课是一种教学思想，是一个教师在追求教学理想的过程即使自身专业提升和课堂教学走向成熟的过程；一节好课也是一种学习思想，学生渴望在学习思想的过程中从无知到有知；一节好课更是一种教育思想，教师在此过程中将民族精神、世界观和人生观传递给学生，让学生将其内化为信念，从而培养其高尚的人格。

浅谈如何将学生成就“社会人”

让学生真正成为社会人是我们学校教学特别是《品德与社会》教学的任务和目标。本文笔者在教学中做到了四点:一是激发学生兴趣、培养情趣,使学生愿做“社会人”。二是小组合作、学习成功,让学生学做社会人。三是设置情景亲身体验,教学生试做“社会人”。四是融入社会、调查实践,成就学生“社会人”。

运用情境化教学让品德课堂更精彩

书本式的课堂教学难免有些枯燥乏味,如何让学生在课堂上更加灵活,深入到教学过程中,更好的锻炼学生的创造性思维,培养学生的适应能力。可以尝试利用情景化教学方式,通过引入或创设具有一定情绪色彩的、以形象为主体的生动具体的场景,以引起学生一定的态度体验,从而帮助学生更好的理解教材,做到寓教于乐。情景化教学的方法通常有以下几点,第一、导入情境—讲究'真',追究'美',注重'情',突出'思'。第二、引入情境—缩短心里距离,形成最佳的情绪状态。第三、参与情境—利用角色效应,强化主体意识。第四、拓宽情境—拓宽教育空间,追求教育的整体性,落实全面发展的教育目标,让品德课堂更精彩。