超声联合染色体检测诊断胎儿心脏畸形临床效果

目的:分析超声联合遗传学检测诊断胎儿心脏畸形效果。方法:将2020年1月-2023年5月在淮安市妇幼保健院就诊的高危孕妇339例作为研究对象,均采用心脏超声方法和染色体检查方法分析胎儿的心脏发育情况。任一种方法结果异常则诊断异常。跟踪随访孕妇和胎儿,记录其预后情况。将尸检和出生后有缺陷的结果作为诊断金标准。结果:超声检查339例高危孕妇,发现胎儿心脏发育异常111例,占比32.7%,异常前3位分别是室间隔缺损(9.7%)、永存左上腔静脉(7.1%)和右锁骨下动脉迷走(5.3%);采用羊膜腔穿刺术对339例染色体数目和结构检查发现,胎儿染色体数目或者结构发生异常36例,占比10.6%,其中数目异常32例(9.4%),结构异常4例(1.2%),其中异常最多的分别是21-三体、13-三体和18-三体。超声方法诊断心脏发育异常的111例胎儿中,染色体检查异常28例;超声检查心脏发育正常的228例胎儿中,染色体检查异常8例(P<0.05)。与随访追踪结果金标准对比,诊断胎儿心脏异常,超声检查的灵敏度为77.8%,特异度为72.6%;染色体检查的灵敏度为25.2%,特异度为96.5%;二者联合检查的灵敏度为93.1%,特异度为97.3%,两种方法联合检查胎儿心脏发育异常的诊断价值更高。结论:采用超声联合遗传学检测对胎儿心脏畸形诊断具有较高的特异性和灵敏度,具有较高的临床应用潜能。

经阴道超声检查在卵巢囊肿患者中的诊断价值

目的探讨卵巢囊肿患者接受经阴道超声检查的诊断价值。方法选择卵巢囊肿患者168例为研究对象,均接受经阴道超声检查。以病理结果为金标准,分析经阴道超声检查的诊断效能。结果168例卵巢囊肿患者的病理诊断结果显示,良性病变160例、恶性病变8例。经阴道超声检查的准确性、敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为98.21%(165/168)98.75%(158/160)、87.50%(7/8)、99.37%(158/159)77.78%(7/9),与病理结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。160例良性病变患者中,巧克力囊肿、卵巢冠囊肿、炎性卵巢囊肿、卵巢囊肿蒂扭转、卵巢黄体囊肿分别有71例、56例、18例、1例、14例,经阴道超声检查的阳性率分别为43.75%(70/160)、34.38%(55/160)、11.25%(18/160)、0.63%(1/160)、8.75%(14/160),与病理诊断结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论卵巢囊肿患者接受经阴道超声检查的诊断效能良好,诊断结果可为患者的治疗提供有效参考,值得临床推广使用。

抗凋亡因子cFLIP在延边黄牛性周期黄体中表达的研究

为了研究延边黄牛黄体中抗凋亡因子(Cellular FLICE-like inhibitory protein:cFLIP)的变化情况及其与细胞凋亡的关系,本实验采用免疫染色方法,观察cFLIP在延边黄牛周期黄体中的表达变化,并从组织化学角度分析了cFLIP作为抗凋亡因子参与延边黄牛的黄体退化。

自由基吸收类抗氧化剂对延边黄牛体细胞克隆重构胚发育的影响

为提高延边黄牛体细胞克隆重构胚发育率,研究了在体外培养液中单独添加不同浓度的自由基吸收类抗氧化剂维生素E(VE)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和亚硒酸钠(SS)对克隆重构胚发育率的影响。试验中选择成熟培养20～22h的卵母细胞,脱颗粒细胞后选择排出第一极体的卵母细胞进行去核与注核操作,然后将融合、激活后的重构胚在添加不同种类不同浓度抗氧化剂的体外培养液中进行培养。结果表明,在卵裂率上,VE的100μmol.L-1组显著高于其他3组(84.58%vs 57.64%、70.87%、67.64%);50和200μmol.L-1组之间无差异,但都显著高于0μmol.L-1组(70.87%、67.64%vs 57.64%)。EGCG的7.5和15μmol.L-1组显著高于加0μmol.L-1组(79.47%、81.67%vs 69.47%)且其他2组间差异不显著。SS的添加,5ng.mL-1组与0和10ng.mL-1组有显著差异(80.44%vs 70.27%、67.16%);与2.5ng.mL-1组差异不显著(80.44%vs 73.92%),且其他2组间差异不显著;在囊胚发育率上,VE的100μmol.L-1组要显著高于其他3组(26.36%vs 13.04%、18.08%、17.26%)。EGCG的15μmol.L-1组显著高于0和30μmol.L-1组(24.86%vs 8.99%、12.10%),和7.5μmol.L-1组无差异。SS的5与0组和10ng.mL-1组有显著差异(23.31%vs 10.32%、12.65%);2.5ng.mL-1组与0和10ng.mL-1l组有显著差异(19.97%vs 10.32%、12.65%)且其他2组间差异不显著。体外培养液中分别单独添加浓度为100μmol.L-1、15μmol.L-1和5ng.mL-1的维生素E,EGCG和亚硒酸钠都能够显著提高延边黄体细胞克隆牛重构胚的发育率。

谷胱甘肽对卵母细胞成熟及胚胎发育影响的研究进展

体外成熟期间谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的合成对卵母细胞及胚胎的发育有很重要的作用。GSH是属于含有巯基的、小分子肽类物质,具有抗氧化作用和整合解毒作用,GSH能激活细胞内多种酶,如巯基(-SH)酶-辅酶等,从而促进糖类、脂肪及蛋白质代谢,并能影响细胞的代谢过程。本研究就有关GSH的相关研究进行综述,探讨其在卵母细胞成熟及胚胎发育过程中的作用。

EDTA-Na、半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟及克隆胚胎体外发育的影响

在成熟液中添加不同浓度的乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na)、半胱氨酸,研究两者对延边黄牛卵母细胞体外成熟及克隆胚胎体外发育的影响。结果表明:(1)将卵母细胞置于100μmol/L的EDTA-Na的成熟液中培养,其成熟率和后期发育率均好于其他浓度组;(2)将卵母细胞置于0.56 mmol/L的半胱氨酸的成熟液中进行培养,成熟率和后期发育率均优于其他浓度组。试验结果证明此两种药的最佳浓度适合进行延边黄牛体细胞克隆中卵母细胞体外成熟培养。

亚硒酸钠对延边奶山羊卵母细胞体外成熟及体细胞克隆重构胚发育的影响

在体外培养液中添加亚硒酸钠,研究其对延边奶山羊卵母细胞体外成熟及对核移植重构胚胎后期发育的影响。在卵母细胞体外成熟培养液中添加不同浓度的抗氧化剂亚硒酸钠(SS)(0.0、2.5、5.0、10.0ng·mL-1),以卵母细胞成熟率、细胞内活性氧(ROS)和谷胱甘肽(GSH)水平为指标鉴定试验组卵母细胞成熟质量;以延边奶山羊乳腺上皮细胞为供核细胞,进行体细胞核移植(SCNT),比较重构胚发育能力,染色观察重构胚质量。结果表明,5.0ng·mL-1 SS可以明显提高卵母细胞成熟率,提高重构胚的发育能力。同时,5.0ng·mL-1 SS能显著降低卵母细胞内ROS含量以及显著提高卵母细胞内GSH含量,增加重构胚细胞数量。研究表明,5.0ng·mL-1SS能显著促进延边奶山羊卵母细胞的体外成熟及提高重构胚发育率。

化学辅助去核法对延边黄牛卵母细胞去核率及其重构胚发育率的影响

为提高延边黄牛体细胞克隆的效率,采用化学辅助去核法——化学诱导剂脱羰秋水仙碱(Demecolcine,简称Deme)处理体外成熟的MⅡ期延边黄牛卵母细胞,经显微操作构建重构胚后观察发育情况。试验研究了Deme的处理浓度、作用时间对延边黄牛卵母细胞去核效果及其重构胚发育的影响。结果显示:体外成熟的卵母细胞在0.2μg/mL、0.3μg/mL、0.4μg/mL的Deme溶液中处理45 min,显核率与去核率无显著差异,去核率达100%,但是0.2μg/mL处理组的囊胚发育率显著高于其他处理组;45 min处理组的显核率显著高于30 min、60 min处理组,45 min处理组的囊胚率高于其他处理组;化学辅助去核法的囊胚率显著高于盲吸法。化学辅助去核能够准确定位去除细胞核,并提高了延边黄牛体细胞克隆的去核率及重构胚的体外发育率。

谷氨酰胺对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响

为了提高延边黄牛体细胞克隆重组胚发育率，研究了在体外培养液中添加不同浓度的谷氨酰胺对克隆重组胚发育率的影响。试验中选择成熟培养20～22h的卵母细胞，脱颗粒细胞后选择排出第一极体的卵母细胞进行去核与注核操作，然后将融合、激活后的卵母细胞在添加不同浓度谷氨酰胺的体外培养液中进行培养。结果显示，体外培养液中添加浓度为1．0mmol／L的谷氨酰胺能够显著提高延边黄体细胞克隆牛重组胚的发育率，表明在体外培养中添加谷氨酰胺能提高延边黄牛体细胞克隆效率。

哺乳动物体细胞克隆胚胎端粒酶活性的研究进展

端粒酶(telom erase)是一种蛋白质与RNA组成的核糖核蛋白,是目前发现的唯一能够延长端粒的一种RNA依赖性DNA聚合酶。在DNA复制过程中丢失的端粒可以被有活性的端粒酶修复回来。哺乳动物端粒酶在发育中受调控,端粒的重编程可能是由于早期胚胎不同时期的端粒酶活性而造成的,因此,研究端粒和端粒酶重编程将为哺乳动物体细胞克隆技术奠定重要的理论基础。本文综述了端粒和端粒酶的结构和功能,及其与哺乳动物体细胞克隆早期胚胎发育的关系,并在此基础上探讨了端粒酶在体细胞克隆动物胚胎发育中的重要作用。

激素在现代生殖调控技术中的发展与应用

动物的生殖过程主要是由生殖激素调控的。这种调控是精密严格的,深入研究生殖激素对于畜牧生产具有重要的指导意义。综述了几种重要的生殖激素以及生长因子的来源和生物学特性等,并对影响生殖的因素进行了总结。

嘌呤核苷类核成熟抑制剂对延边奶山羊卵母细胞体外成熟的影响

[目的]提高卵母细胞体外成熟率及其后续发育能力。[方法]以延边奶山羊为试验对象,活体采卵所获得的卵母细胞为材料,利用核成熟抑制剂HX和IBMX分别进行体外成熟培养,研究嘌呤核苷类核成熟抑制剂对延边奶山羊卵母细胞体外成熟的影响。[结果]所有浓度HX和IBMX均可有效维持卵母细胞停留在GV期且呈剂量依赖性逐渐升高。最适宜延边奶山羊卵母细胞成熟的HX和IB-MX添加浓度分别为2和0.2 mmol/L。[结论]该研究可为延边奶山羊的转基因和体细胞克隆试验等提供稳定的成熟卵母细胞来源。

亚硒酸钠对鼠胚胎干细胞及奶山羊-鼠异种重构胚发育率的影响

为了探索亚硒酸钠对小鼠胚胎干细胞和延边奶山羊-鼠异种重构胚抗氧化损伤的保护能力,以及亚硒酸钠提高小鼠胚胎干细胞和延边奶山羊-鼠异种重构胚发育率的作用,通过MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测在亚硒酸钠处理下,小鼠胚胎干细胞和奶山羊-鼠异种重构胚抗氧化损伤的增殖能力,并统计重构胚和异种重构胚的发育率。结果显示,经3.5μmol/L亚硒酸钠处理的90.0μmol/L H2O2氧化损伤的小鼠胚胎干细胞的增殖率显著提高。亚硒酸钠处理的小鼠胚胎干细胞重构胚和延边奶山羊-鼠胎儿皮肤成纤维细胞异种重构胚的卵裂率显著高于未经亚硒酸钠处理的胚胎干细胞。表明亚硒酸钠可提高小鼠胚胎干细胞重构胚和延边奶山羊-鼠胎儿皮肤成纤维细胞异种重构胚的发育率。

5-aza-dc对延边奶山羊耳成纤维细胞生物学特性的影响

通过DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-dc对延边奶山羊耳成纤维细胞进行不同处理后,利用MTT比色法选定5-aza-dc的最适作用浓度和时间,用Hochest33342/PI双染和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况,通过核型分析检测5-aza-dc对细胞染色体的影响。结果表明,低浓度的5-aza-dc(≤0.010μmol/L)作用72 h对细胞影响不大;随其浓度的增加,细胞形态、活率、凋亡及染色体都受到显著影响。5-aza-dc对细胞的最佳处理时间为72 h,此时低浓度的5-aza-dc并未引起细胞凋亡和核型改变。

基于EVA的融资战略研究

基于EVA的融资战略的目标一般是运用合理的手段,筹措必要的资金,保证经营之需,同时使资本成本最低、资本结构最佳和企业价值最大。

牛卵母细胞显微操作机械去核方法的比较

分别采用挤压去核法、盲吸去核法和点击去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核操作,在操作时间、成功率、去核率及重组胚后期发育等方面进行比较.结果表明,去核率上,盲吸法低于其他2种方法;去核成功率上,挤压法和点压法高于盲吸法;操作耗时上,挤压法和盲吸法耗时较短;3种方法所构建的重组胚卵裂率以及囊胚发育率均差异不显著.因此,挤压去核法是一种较适合延边黄牛卵母细胞去核的有效方法.

双歧杆菌三联活菌胶囊联合蒙脱石散治疗小儿腹泻的临床效果

目的探讨双歧杆菌三联活菌胶囊和蒙脱石散在小儿腹泻临床治疗中的应用效果,评价联合用药的应用价值。方法选取蚌埠市第三人民医院2020年1月至2021年12月收治的106例腹泻患儿作为研究对象,应用随机数字表法分为观察组(双歧杆菌三联活菌胶囊联合蒙脱石散)和对照组(蒙脱石散),每组各53例。观察两组患儿的治疗效果。结果观察组患儿的治疗有效率高于对照组,复发率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患儿的腹泻停止时间、腹痛消失时间、胃肠功能恢复正常时间较对照组短,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的不良反应总发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在小儿腹泻的临床治疗中,双歧杆菌三联活菌胶囊和蒙脱石散均是良好的用药选择。联合应用两种药物可加快腹泻症状的改善,促进胃肠功能的恢复。

季节对延边黄牛卵母细胞质量及体细胞核移植胚胎发育的影响

研究季节对延边黄牛卵巢质量和卵母细胞的数量、质量、体外成熟以及核移植重组胚发育的影响。持续1年采集延边黄牛卵巢,分级卵巢,抽取卵巢表面直径2～8 mm的卵泡内的卵母细胞,收集后进行体外成熟和重组胚的体外培养。结果表明,1级卵巢的比例在春冬季时明显高于秋季(P<0.05),2级卵巢的比例在春夏季高于冬季(P<0.05),秋季的3级卵巢比例最高,与其他季节有显著差异(P<0.05);在秋冬季,平均每个卵巢拣出卵母细胞数高于春夏季(P<0.05),成熟率上,秋季显著高于春夏季(P<0.05),但与冬季并无差异且其他各组间无显著差异(P>0.05);卵裂率上,秋季与春季有差异(P<0.05),但与其他季节无显著差异(P>0.05),囊胚率上,各组之间均无显著差异(P>0.05)。通过研究发现,季节对延边黄牛卵母细胞的可用回收数量及其质量都会产生影响且秋季为延边黄牛体细胞核移植实验最适合季节。

金属螯合剂对延边黄牛体细胞核移植重组胚发育的影响

由于在核移植试验中,所用的水和化学物质都不可避免的会被一些金属离子轻微污染,造成胚胎内抗氧化物和过氧化物之间难以保持平衡,从而导致胚胎发育率降低,本试验以此为出发点,探讨了在延边黄牛体细胞核移植重组胚早期培养液中添加乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na)和柠檬酸钠(sodium citrate)2种金属螯合剂类抗氧化剂,对其后续发育的影响,以期筛选出最佳的体外培养条件。结果表明:适合延边黄牛体细胞核移植重组胚后期发育的EDTA-Na和柠檬酸钠的最佳浓度分别为50μmol/L和0.6mmol/L。

小分子硫醇对延边黄牛体细胞核移植重组胚发育的影响

探讨了在延边黄牛体细胞核移植重组胚早期培养液中添加L-半胱氨酸和β-巯基乙醇(β-ME)两种小分子硫醇类抗氧化剂,对其后续发育的影响,以期筛选出最佳的体外培养条件。结果表明:适合延边黄牛体细胞核移植重组胚后期发育的L-半胱氨酸和β-巯基乙醇的最佳浓度分别为0.6 mmol/L和50μmol/L。