亚临床甲状腺功能减退症对心血管疾病相关影响因素的临床研究

目的探讨亚临床甲状腺功能减退症(SCH)患者血脂、血尿酸(UA)、内脂素(visfatin)、同型半胱氨酸(HCY)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化及意义。方法将100例SCH患者根据促甲状腺激素(TSH)水平分为观察A组(5 mIU/L≤TSH<10mIU/L,60例)和观察B组(TSH≥10mIU/L,40例);对照组为健康体检者(100例)。检测患者血清TSH、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、UA、HCY、hs-CRP、visfatin水平并进行分析。结果观察A组患者血TG、visfatin水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);观察B组患者血TG、visfatin、LDL-C、UA、HCY、hs-CRP水平均较与对照组明显增高(P<0.05),并以TG、visfatin升高最为显著(P<0.01)。但A、B两组患者血HDL-C水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 SCH患者脂质代谢紊乱和高尿酸血症可能是促发动脉粥样硬化的重要危险因素;HCY、hs-CRP、visfatin可作为SCH患者动脉粥样硬化程度的预测指标。

大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态。方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10μmol/L的5氮杂胞嘧啶(5aza)孵育诱导24h。培养4周,用免疫细胞化学染色方法鉴定心肌样细胞(cardiomyocytelikecells);用全细胞膜片钳技术,检测胞膜内向钠电流,并与未经诱导的MSCs和急性分离的心肌细胞进行比较。结果MSCs经5aza诱导后部分表达心肌特异性肌钙蛋白T,在诱导后4周记录到快速激活和失活的膜内向钠电流。与急性分离的心肌细胞比较,相同刺激脉冲下心肌样细胞所产生的电流幅值较小,IV曲线向右偏移。结论经5aza诱导后,MSCs可分化成具有兴奋性内向钠电流的心肌样细胞。

“三级预防”,阻止冠心病

心脏就像人体的“发动机”,每时每刻都在不停地跳动,为血液的流动提供动力,并为身体运送氧气、营养物质以及激素,带走废物,保障机体基本的新陈代谢能力。冠心病是一种心脏病,是由冠状动脉病变引起的心脏疾病,全称是冠状动脉粥样硬化性心脏病。冠状动脉沿心脏表面分布,发出多个分支深入心肌进行供血,可以为心肌细胞供血以及供氧,在正常情况下有很强的代偿能力,并且可随心脏活动量变化调整心脏供血。

大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞Cx43通讯连接功能检测

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化为心肌样细胞Cx43的分布与通讯连接功能状态。方法:取健康SD大鼠骨髓,用5-氮杂胞苷体外诱导培养。取诱导培养2、3、4周的MSCs为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,另取急性分离的心肌细胞为对照组,用激光共聚焦技术检测Cx43的分布及平均荧光漂白恢复率。结果:对Cx43在细胞内分布检测发现,随诱导培养时间的延长,细胞内蛋白颗粒密度逐渐增加;诱导培养4周后MSCs内蛋白颗粒密度与对照组比较无显著差异(63.87±12.43,64.87±12.15,P>0.05)。各组细胞平均荧光漂白率的变化趋势与Cx43分布变化相似,即随诱导培养时间的延长,细胞平均荧光漂白率逐渐增加;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组分别为19.59%±6.08%、37.17%±3.84%、46.82%±2.69%、49.71%±5.53%,Ⅲ组与对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:大鼠MSCs在体外诱导培养4周后已分化为心肌样细胞,其细胞Cx43的分布与通讯连接功能与正常心肌细胞相似。

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化的心肌样细胞内Ca^(2+)和CaMKⅡ的变化

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone m arrow m esenchym al stem cells,MSCs)体外诱导分化为心肌样细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的表达变化。方法取健康SD大鼠骨髓,用5-氮杂胞苷体外诱导培养。取诱导培养2、3、4周的MSCs为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,另取急性分离的心肌细胞为对照组,分别用激光共聚焦技术和W estern b lot技术检测[Ca2+]i及CaMKⅡ表达水平。结果经荧光探针结合Ca2+后,用激光共聚焦技术检测发现,随诱导培养时间的延长,[Ca2+]i逐渐增加;诱导培养4周的MSCs内[Ca2+]i与对照组比较无显著差异[(100.81±17.64),(100.32±17.10),P>0.05]。各组细胞CaMKⅡ的变化趋势与[Ca2+]i定量分析结果相似,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组分别为(322.45±19.43)、(434.43±16.77)、(680.91±20.61)、(682.69±21.03),Ⅲ组与对照组比较P>0.05。结论大鼠MSCs在体外诱导培养4周后已分化为心肌样细胞,其细胞内游离钙浓度和CaMKⅡ蛋白表达水平与正常心肌细胞相似。

军队干部疗养员运动情况与代谢综合征危险因素的调查研究

目的通过对军队疗养干部运动锻炼情况及代谢综合征危险因素的调查分析,探讨运动与代谢综合征之间的相关联系。方法选取2012年1-12月在杭州疗养院疗养的军队在职或离退休干部800例[男性538例,女性262例,年龄（67±5）岁]为研究对象,通过问卷调查其运动方式、运动频率、每次运动时间、每日累计运动时间等,测量血压、腰围、空腹血糖值（FBS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、尿酸（UA）等指标。并按是否运动及坚持时间分为运动组（n=486）与非运动组（n=314）,再按运动时间、频次、自感运动强度、坚持运动时间等进行分组统计分析。结果非运动组收缩压、舒张压、腰围、FBS、TC及TG水平均显著高于运动组（P〈0.05）。每日运动时间≥60 min组代谢危险因素异常率明显低于〈60 min组（30.51%vs 43.37%,P〈0.05）;自感运动强度11-15组的异常率明显低于〈11组（33.99%vs 43.11%,P〈0.05）;长期保持每周高频次运动者的异常率明显低于偶尔运动者（20.83%vs 38.61%,P〈0.05）。结论长期坚持每日至少运动60 min、自感运动强度达11-15、每周运动3次以上,有助于降低代谢综合征患病风险。

大鼠骨髓间充质干细胞培养一周后的细胞膜电流

目的通过研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)膜电流的状态,以探讨MSCs的电生理学特性。方法取健康SD大鼠的骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,培养1周后,利用膜片钳技术,以全细胞记录模式记录细胞膜电流。利用各种通道阻滞剂对记录到的电流进行鉴定、分析。结果培养1周后的MSCs未记录到内向膜电流,但显示有3种不同的外向电流在MSCs上单独或混合存在。利用氯通道阻滞剂D IDS不能阻断其外向电流,而在电极内液和细胞外液中使用钾通道阻滞剂后发现其膜电流幅度明显减小,提示所记录到的电流为钾电流,分别为:瞬间外向钾电流、超快速激活延迟整流钾电流及缓慢激活延迟整流钾电流。3种钾电流的电流-电压曲线与文献报道的相应钾电流相符。结论培养1周后的MSCs只表达外向钾电流,不同MSCs表达的钾电流差异较大,从电生理学角度提示MSCs具有多向分化潜能。

地塞米松预处理减轻异丙肾上腺素所致心肌损伤及TNF-α的表达

目的观察地塞米松(Dexamethasone,DEX)对异丙肾上腺素(Isoprotereno,ISO)致小鼠急性心肌缺血损伤的影响并探讨其作用机制。方法 16只昆明种小鼠随机分成正常对照(control,CON)组、ISO组、地塞米松预处理(Dexamethasone pretreatment,DEX-pre)组、DEX组,每组4只。CON组、ISO组首次处理前30 min给予等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射预处理,然后CON组给予等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射处理,ISO组小鼠给予ISO(5 mg/kg),每日腹腔注射1次,连续3 d;DEX-pre组在首次ISO注射前30 min给予DEX(1.25 mg/kg)腹腔注射,余同ISO组;DEX组在第2天、第3天ISO注射30 min后给予DEX(1.25 mg/kg)腹腔注射,余同ISO组。检测血清谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)了解心肌损伤;观察心肌组织的病理学改变并检测细胞因子TNF-α的变化。结果 1与CON组比较,ISO组ASL、LDH、CK均明显升高(P<0.01),CK-MP无明显改变(P>0.05);ISO组心肌损伤明显加重,形态学计分为4.0比0.0(P<0.01);ISO组血清TNF-α明显升高(P<0.05);DEX-pre组TNF-α明显下降(P<0.01)。2与ISO组比较,EX-pre组ASL、CK下降非常显著(P<0.01),LDH、CK-MP轻度下降(P<0.05);DEX-pre组心肌损伤得到明显改善,形态学计分为2.0比4.0(P<0.01);DEX-pre组血清TNF-α下降非常显著(P<0.01)。3与ISO组比较,DEX组ASL、LDH、CK、CK-MP均无明显改变(P>0.05);DEX组心肌损伤无明显变化,形态学计分为3.5比4.0(P>0.05);DEX组血清TNF-α升高非常显著(P<0.01)。结论地塞米松预处理对异丙肾上腺素致小鼠急性心肌损伤的心肌具有明显保护作用,TNF-α等细胞因子改变可能是其机制之一。

大鼠骨髓间质干细胞诱导分化为心肌样细胞膜电流的研究

目的:研究大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)诱导分化为心肌样细胞膜电流的状态。方法:按文献方法进行MSCs的诱导培养和鉴定。诱导后培养4周,用全细胞膜片钳技术,检测胞膜电流,并与未经诱导分化的MSCs进行比较。结果:未经诱导分化的MSCs不表达内向电流,只表达外向钾电流。MSCs经5-aza诱导后表达心肌特异性肌钙蛋白T,记录到2种膜内向电流,分别为钠电流(INa)和L-型钙电流(ICa),以及3种外向钾电流,包括瞬间外向钾电流(Ito),超快速激活延迟整流钾电流(Ikur)及缓慢激活延迟整流钾电流(Iks)。与未经诱导分化的MSCs相比,诱导后MSCs的钾电流以Ikur和Iks为主。结论:经5-aza诱导后,MSCs可分化成具有电压依赖性内向INa、ICa和外向Ito、Ikur、Iks的心肌样细胞。

地塞米松预处理及治疗对ISO致小鼠急性心肌损伤影响的比较研究

目的观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对异丙肾上腺素(isoprotereno,ISO)致小鼠急性心肌缺血损伤的影响并探讨其作用机制。方法将16只昆明种小鼠随机分成正常对照(control,CON)组4只、ISO组4只、地塞米松预处理(dexamethasone pretreatment,DEX-pre)组4只、DEX组4只。CON组、ISO组首次处理前30min给予等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射预处理。CON组给予等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射处理。ISO组给予5mg/kg ISO,每日腹腔注射1次,连续3d。DEX-pre组在首次ISO注射前30min给予DEX 1.25mg/kg腹腔注射,余同ISO组。DEX组在第2天、第3天ISO注射30min后给予DEX 1.25mg/kg腹腔注射,余同ISO组。在HE染色光镜下观察心肌组织的病理学改变;酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的变化;流式细胞分析检测脾脏T细胞亚群(杀伤性T细胞即CD4+T细胞、抑制性T细胞即CD8+T细胞、激活的杀伤性T细胞即CD4+CD69+T细胞、激活的抑制性T细胞即CD8+CD69+T细胞)变化。结果 1与ISO组比较,DEX-pre组心肌损伤得到明显改善(P<0.05),DEX组无明显变化(P>0.05)。2DEX组TNF-α含量明显高于CON组、ISO组和DEX-pre组,差异有统计学意义(P<0.05)。3DEX-pre组CD4+T细胞、CD4+CD69+T细胞、CD8+CD69+T细胞与其他3组差异有统计学意义(P<0.05),其他3组之间差异无统计学意义(P>0.05);DEX-pre组CD8+T细胞低于其他3组,DEX组低于CON组与ISO组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DEX预处理对ISO致小鼠急性心肌缺血损伤的心肌具有明显保护作用,而损伤后给予DEX治疗则无保护作用。可能机制与DEX预处理导致免疫功能改变及炎性细胞因子改变相关,确切机制有待进一步研究。

地塞米松对异丙肾上腺素所致小鼠急性心肌损伤及脾脏T细胞亚群的影响

目的:观察地塞米松(DEX)对异丙肾上腺素(ISO)致小鼠急性心肌缺血损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:16只昆明种小鼠随机分成正常对照组(CON组)、ISO组、DEX预处理组(DEX+ISO组)、DEX后处理组(ISO+DEX组),每组各4例。ISO组腹腔注射ISO(5mg/kg),1次/天,连续3天;DEX+ISO组于ISO注射前30min腹腔注射DEX(1.25mg/kg),连续3天;ISO+DEX组于实验第2天和第3天腹腔注射ISO后30min,再腹腔注射DEX(1.25mg/kg);CON组腹腔注射等量生理盐水,连续3天。实验第4天,各组小鼠心脏采血检测血清谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB);摘取心脏进行HE染色,观察各组心肌组织形态学改变;摘取脾脏,流式细胞术检测脾组织匀浆T细胞亚群分布。结果:(1)与CON组比较,ISO组AST、LDH、CK均显著升高(P<0.01);心肌组织损害明显加重(P<0.01);脾组织CD8^+、CD4^+CD69^+T细胞表达上升(P<0.05,P<0.01)。(2)与ISO组比较,DEX+ISO组AST、CK、LDH、CK-MB均下降(P<0.05或P<0.01);心肌组织损害明显改善(P<0.01);脾组织CD4^+、CD8^+T细胞表达显著下降(P<0.01),CD4^+CD69^+T细胞表达显著上升(P<0.01)。(3)与ISO组比较,ISO+DEX组CD8^+T细胞表达下降(P<0.05),其余均无明显变化(P>0.05)。结论:DEX预处理可以明显改善ISO致小鼠急性心肌缺血损伤,其作用机制可能与DEX介导的T细胞亚群免疫应答功能改变有关。