抗冻蛋白及其在植物抗冻基因工程中的应用

从应用的角度系统综述了抗冻蛋白 ( AFPs)的特性、活性、用途、生化特征、在细菌中的表达、在植物抗冻生理中的作用及其基因工程 ,简洁地讨论了抗冻蛋白的研究现状和最新进展。

番茄ZF遗传转化再生体系的研究

番茄 ZF无菌苗出芽后 5～ 7d,子叶切成 0 .5 cm× 0 .5 cm小块 ,下胚轴切成 1cm的小段作为外植体 ,以 MS为基本培养基 ,玉米素 1.0 mg/ L,6 -苄基腺嘌呤 1.0 m g/ L 分别与吲哚乙酸 0 .0 5 ,0 .2 ,0 .5和 1.0 mg/ L配成 7个激素组合 ,经诱芽比较 ,确定 MS+BA1.0 m g/ L+IAA0 .2 mg/ L 为最佳生芽培养基 ,MS添加吲哚乙酸0 .0 ,0 .0 5 ,0 .1和 0 .2 mg/ L 进行生根比较 ,确定 MS+IAA0 .0 5 mg/ L 为最佳生根培养基。卡那霉素 (Kan)临界浓度确定为 2 5 mg/ L。转化培养过程为 :外植体于生芽培养基 2 6℃ ,2 6 0 0 lx光下预培养 2 4 h。农杆菌 L BA4 4 0 4过夜培养 ,用 MS培养液稀释 10～ 2 0倍 ,侵染外植体 5 m in,2 8℃黑暗共培养 4 8h。然后在 MS+BA1.0 mg/ L+IAA0 .2 m g/ L+Kan2 5 mg/ L+Cef2 0 0 mg/ L 筛选培养基上诱芽 ,每 14 d转接 1次。芽长至 2 cm时 ,切下转至 MS+IAA0 .0 5 mg/ L+Kan2 5 m g/ L+Cef10 0 m g/ L 培养基上生根。

低剂量短波紫外线照射提高采后苹果抗病性

探讨低剂量短波紫外线(ultraviolet-C,UV-C)处理对苹果抗病性的影响及作用机理,为UV-C处理技术应用于苹果抗病提供理论依据。以红富士苹果为试材,以波长为254 nm紫外杀菌灯为辐射源,分别给予0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5 k J/m2剂量照射,接种青霉菌,确定适宜照射剂量;以适宜照射剂量处理苹果,接种灰霉菌,探讨短波紫外线对灰霉病的抗病性;以适宜照射剂量处理苹果,分别贮藏于20℃和0℃条件下,定期取样,测定果实的总酚含量、丙二醛含量及保护酶活性。试验最佳UV-C照射剂量为7.5 k J/m2,与对照相比差异显著。常温与低温贮藏下,7.5 k J/m2 UV-C处理可有效减少丙二醛的积累,保护细胞膜,增加总酚类物质积累,增强抗病性;处理果实的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)、多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性在整个贮藏期内均高于对照,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性明显升高。不论是常温还是低温贮藏,7.5 k J/m2 UV-C处理均能提高苹果的抗病性,有效抑制青霉病和灰霉病的发生及扩展。研究结果为UV-C应用于采后苹果,提高抗病性,从而延长贮藏保鲜期提供理论依据和技术参考。

胡萝卜抗冻蛋白基因克隆及植物表达载体构建

以胡萝卜品种 Autumn King的幼苗为材料 ,用 CTAB法提取其基因组 DNA,以 PCR ( Polym eraseChain Reaction)的方法在体外扩增出胡萝卜抗冻蛋白基因 ( afp) ,以 p UCm - T Vector为载体构建成胡萝卜 afp的克隆载体 p TAF,用 Eco R 消化重组质粒 p TAF使其线性化 ,再用 DNA聚合酶 Klenow大片段补平末端 ,然后用Xba 消化 ,获得一末端粘 ,一末端平的目的片段 ( afp)。植物表达载体 p BI12 1用 X ba 和 Sma 双酶切 ,获得一末端粘 ,一末端平的线性质粒。将目的片段与线性质粒在 T4DNA连接酶的作用下进行定向连接 ,构建成胡萝卜 afp的植物表达载体 p

胡萝卜Daucus carotavar.sativus Hoffm Deutschl抗冻蛋白基因的克隆及测序

以宁夏吴忠胡萝卜、陕西华县胡萝卜和陕西汉中胡萝卜 3个地方品种为材料 ,用PCR (polymerasechainreaction)的方法克隆了中国胡萝卜的抗冻蛋白基因 (afp) ,测定了其核苷酸序列 ,并和英国胡萝卜的afp序列进行了对比。在所测 10 0 4个核苷酸中 ,两变种碱基不同者有 36个 ,占 3.6 % ,其中无义突变 2 1个 ,有义突变 15个。按有义突变计 ,同源性为98.5%。

测定冷藏蔬菜呼吸速率时的温度探讨

在冷藏温度下测定的呼吸速率与将冷藏蔬菜置于室温下立即测定或置于室温下1h后测定的呼吸速率有显著差异。低温下贮藏的蔬菜在室温下测定呼吸速率的结果不能真实地反映贮藏状态下的呼吸速率。冷藏蔬菜呼吸速率的测定应在冷藏温度下进行。

草莓苗冷藏过程中内源激素水平变化及相关分析

以宝交早生一年生草莓苗为材料，研究和分析了长期冷藏（０℃）过程中各种内源激素的含量水平、变化及相关关系。冷藏苗和对照苗（９℃）的差异典型地表现在根部的激素含量上冷藏苗的ＡＢＡ含量始终比对照苗低，Ｚｅａｔｉｎ、Ｚｅａｔｉｎｒｉｂｏｓｉｄｅ、ＧＡ３和ＩＡＡ的含量却始终比对照高．其内源激素的变化既不同于有休眠特性的洋葱，也不同于无休眠特性的甘兰。各种内源激素之间的相关分析表明激素之间存在着显著的协同关系。

国外草莓贮藏研究概况

国外草莓贮藏研究概况尹明安，崔鸿文（西北农业大学园艺系杨陵７１２１００）采收后的草莓存在着衰老变质、生霉腐烂和失水萎蔫等问题，因此，只能短期贮藏（一般不超过１０ｄ），这就限制了草莓的大面积生产，国内有关草莓果实的贮藏研究报道较少，现就美国、日本等发达...

植物afp表达载体的构建及其对农杆菌的直接转化

详细报道了胡萝卜抗冻蛋白基因 (afp)植物表达载体的构建过程及其直接法转化农杆菌的方法。以限制性内切酶从克隆载体上切取 afp基因 ,将其连接在相应酶切的 p BI12 1工程质粒上 ,构建成 afp植物表达载体。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌 ,并用

提高黄瓜新种子活力之方法研究

干热（75℃）处理可以提高黄瓜新种子的活力。低温（－4℃）处理无显著影响。赤霉素丙酮液（500ppm）处理反而有抑制作用。

萝卜直根采后衰老与膜脂过氧化作用关系初探

萝卜（Ｒａｐｈａｎｕｓ ｓａｔｉｖｕｓＬ．）直根采后在室内温、湿度条件下，失重率和细胞膜相对透性直线上升，而丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性和过氧化氢酶活性的变化则不显著。因此认为，萝卜直根木质部存在着一定程度的膜脂过氧化作用，但不是引起萝卜采后细胞膜透性增大或衰老加快的主要因素。

BN-2促进春保护地黄瓜果实发育的效应

在春保护地黄瓜开花时，用ＢＮ－２的２５０倍或５００倍稀释液涂抹黄瓜子房，１９９７年１９９８年两年的试验结果表明：ＢＮ－２可保证黄瓜座瓜率达到１００％，而对照只有７４％或８８％。１９９７年比对照提高单瓜重２８．６％或２５．３％；１９９８年提高１５８％或１２２％。两浓度均能明显增加瓜条的粗度和长度，１９９８年分别增加６０％和５８％。１９９７年两浓度分别提高单株产量６６．９％和６６．７％。在果实的对数生长期，处理的生长速度约为对照的２倍。

TDZ处理对黄瓜果实发育的影响

用10、5、2．5、0（清水、对照）mg／LThidiazuron（TDZ）溶液在黄瓜开花的当天或前一天对黄瓜子房进行处理，结果表明，5mg／LTDZ能减少黄瓜“化瓜”，提高盛瓜数35％，提高单瓜重29％。单瓜重的提高主要是通过瓜条的粗度增加而实现的。

辣椒粉乳酸发酵产酸条件的研究

肯定了辣椒粉乳酸发酵的可能性，揭示了发酵的适宜条件：接种量３．９０×１０９个乳酸菌／７ｇ辣椒粉，温度２５～３１℃，糖／料１：２．７５。

4—PU对黄瓜番茄果实生长发育的影响

试验使用１００、５０、２５、１２．５、０（清水，ＣＫ）ｍｇ／Ｌ的４─ＦＵ溶液，处理黄瓜子房结果表明，２５～５０ｍｇ／Ｌ４─ＰＵ处理能显著刺激瓜条伸长变粗，提高单瓜重和前期产量，其中以２５ｍｇ／Ｌ效果最佳，可使前１５ｄ产量提高８５％。５０ｍｇ／Ｌ的４─ＰＵ可使座瓜率明显提高，但同时又使畸形瓜率略有上升。用１００、５０、０（清水，ＣＫ）ｍｇ／Ｌ的４─ＰＵ溶液处理番茄果实的结果表明，４─ＰＵ可使番前果实膨大速度加快，单果重增加，转色期提前１～４ｄ，但转色所需天数比对照延长２ｄ，提前２ｄ采收，本试验番茄的４─ＰＵ最佳施用浓度为５０ｍｇ／Ｌ左右。

草莓苗长期冷藏的生理基础研究

试验以宝交早生一年生草莓苗为材料，对其冷藏期间的有关生理指标进行了定期测定，对其之所以能长期冷藏的生理机制进行了分析与讨论。结果表明，冷藏苗在贮藏期间的失重速率比对照苗（９℃）要低得多，前者贮藏近半年时的失重率为２．６６％，后者贮藏两个月时的失重率为２．１５％。冷藏苗的平均呼吸强度只有对照苗的１／３。冷藏苗的过氧化氢酶活性比对照苗要低。芽部的过氧化氢酶活性在大部分时间里比其它部位的要高。冷藏苗的乙烯释放量始终低于对照苗。芽部是产生乙烯的唯一部位。

辣椒粉乳酸发酵产酸条件的研究

肯定了辣椒粉乳酸发酵的可能性，揭示了发酵的适宜条件：接种量３．９０×１０９个乳酸菌／７ｇ辣椒粉，温度２５～３１℃，糖／料１：２７５。

4—PU在早熟甘兰上的应用效果

用0（清水，对照）、10、20和10mg／L的4－PU溶液分别在“中甘11号”甘兰的莲座期、结球初期和结球中期进行一次性叶面喷施，结果表明：甘兰在从莲座期到结球中期的不同生育期对4－PU的敏感性差异不显著。10～40mg／L的4－PU均能极显著地提高甘兰的毛重和净重，其中以20mg／L的效果最好，其净重比对照提高65％。4－PU是通过增加外叶和球叶的单叶重而影响产量的。4—PU对叶片的数目没有影响。

短波紫外线处理对牛角椒果实保鲜效果及生理指标的影响

【目的】探讨短波紫外线(UV-C)采后处理对牛角椒果实感官品质、营养品质和生理指标的影响,为牛角椒的短期贮运保鲜提供技术指导。【方法】以牛角椒"大果99"为试材,以波长254 nm普通紫外杀菌灯为辐射源,分别照射350,450,500 s,即辐射剂量分别为0.7,0.9,1.0 kJ/m2辐照牛角椒果实,以不照射为对照(CK),室温下(25℃左右)贮藏21 d,筛选最佳辐射剂量;在此基础上,采用最佳剂量对牛角椒果实进行辐射处理,测定贮藏过程中牛角椒果实的可溶性固形物、Vc含量、叶绿素含量、呼吸速率、相对电导率、丙二醛含量以及保护酶活性。【结果】控制牛角椒果实腐烂和失重的最佳UV-C处理剂量为0.9 kJ/m2,与对照相比差异显著。0.9 kJ/m2UV-C处理的牛角椒果实在贮藏15 d后,可溶性固形物含量显著高于对照,Vc含量极显著高于对照;0.9 kJ/m2UV-C处理可有效保持牛角椒果实叶绿素含量,抑制呼吸速率和细胞膜透性的增大,减少MDA的积累;贮藏期内0.9 kJ/m2UV-C处理果实的SOD、POD和CAT活性均明显升高。【结论】0.9 kJ/m2UV-C处理可以有效地延缓牛角椒果实的采后衰老进程,保持果实品质。