基于全谱非靶向代谢组学技术的川芎不同部位代谢物深度解析

为了深度解析川芎中不同部位代谢物特征,本研究采用高效液相色谱法(HPLC)对川芎的根茎、茎、叶中的活性成分进行含量测定,并整合超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MS)和气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)的全谱非靶向代谢组学技术,对川芎的根茎、茎和叶的挥发性成分、非挥发性成分进行全面的定性和定量分析。结果表明,川芎根茎中活性成分含量高于茎、叶。川芎的全谱非靶向代谢组学共检出2891个代谢物,总丰度为茎>叶>根茎,各部位化学成分种类相同、含量差异较大,包括氨基酸及其衍生物、萜类、酚酸类等32类化合物。其中LC-MS检出1726个代谢物,GC-MS检出1216个代谢物,两个平台共同检出51个代谢物。对川芎不同部位的差异代谢物进行分析,根茎与茎、根茎与叶、茎与叶中筛选到差异代谢物1683、2054和1844个,差异代谢物总丰度为根茎≈茎>叶。根茎中显著富集含氮化合物、酚类、其他类(糖类、内酯类),茎中的醇、胺类、醚类高度富集,叶中的萜类、酮类、黄酮类高度富集。川芎中大多数活性成分如川芎嗪、阿魏酸、藁本内酯等,呈现根茎>茎>叶的趋势,但茎和叶中也含有含量较高的阿魏酸、欧当归内酯A等重要活性成分,具有较高利用价值。通过KEGG富集分析结果推测差异代谢物可能与次生代谢产物的生物合成等途径相关。本研究深度解析了川芎不同部位的成分积累规律,为川芎资源的合理利用提供了科学依据。

重楼法定基原与其同属近缘种的多重PCR鉴别体系研究

本研究通过分析重楼法定基原(七叶一枝花和云南重楼)与其同属近缘种ITS序列的差异设计了3对特异性引物。利用多重聚合酶链反应(PCR)原理建立了一套能快速、准确鉴别重楼法定基原与其同属近缘种的方法。最终,七叶一枝花样本可扩增出片段大小为210 bp的特异性片段,云南重楼种下的两类基因型(YN-I、YN-II)样本可分别扩增出248 bp和149 bp的特异性片段。在法定基原得到阳性鉴定的同时,其他同属近缘种无任何片段,避免了干扰。该方法首次实现了,在一套多重PCR反应体系中同时鉴别重楼药典法定基原与其同属近缘种,对于提升中药重楼的质量控制技术水平具有重要意义。

叠鞘石斛多糖抗氧化作用研究

为观察不同浓度叠鞘石斛多糖提取液的抗氧化活性,采用超声提取法提取叠鞘石斛中的多糖;采用分光光度法测定叠鞘石斛多糖对DPPH自由基、羟基自由的清除率以及对Fe2+螯合率的影响,再观察其对脂质过氧化的抑制作用。结果表明,叠鞘石斛多糖对DPPH自由基、羟基自由基具有较好的清除率,对Fe2+也具有很好的螯合率,对脂质过氧化有明显的抑制作用。叠鞘石斛多糖具有较强的抗氧化能力。

四川重楼属植物2新记录变种

报道了四川重楼属植物2新分布变种,分别是宽瓣球药隔重楼(Paris fargesii var.latipetala H.Li et V.G.Soukup)和红果五指莲(Paris axialis H.Li var.rubra H.H.Zhou,K.Y.Wu et R.Tao)。其中红果五指莲为贵州特有类群,且为孤点分布。四川新分布的发现对于重楼属植物的系统分类和迁徙演化研究具有重要意义。

不同商品等级羌活中羌活醇和异欧前胡素的含量测定

目的:比较羌活不同商品等级中羌活醇和异欧前胡素的含量,探讨中药材商品等级与药材化学成分含量的相关性。方法:采用高效液相色谱法测定羌活药材中羌活醇、异欧前胡素的含量。结果:各等级羌活中的羌活醇含量均高于异欧前胡素,二者的总量为蚕羌>尾羌>竹节羌>疙瘩头>条羌。结论:此测定方法为今后修订羌活药材商品规格标准提供了实验依据。

华重楼及其常见混伪品的多重聚合酶链式反应快速鉴定体系的建立和应用

收集华重楼常见混种栽培种的根茎,叶片及种子样品,对华重楼极其常见混伪品的r DNA-ITS片段进行对比分析。基于重楼属植物r DNA-ITS的SNP位点,针对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼设计3组共6条特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系。应用已建立的多重PCR方法对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼及常见的其他重楼属混伪品进行鉴别,验证方法的准确性。通过观察电泳检测扩增产物条带的位置及数量实现快速检测的目的。建立的多重PCR鉴定方法能准确地对华重楼极其常见重楼属混杂栽培种进行快速鉴别。多重PCR方法特异性强,灵敏度高,高效快速,可用于多基源中药材及同属近缘种的快速鉴别,同时为中药材的种质资源鉴定提供可行的方法。

不同商品规格等级羌活的镇痛抗炎作用对比研究

目的:拟对不同商品等级的羌活进行镇痛、抗炎等药效作用的对比研究,找到不同商品等级羌活在镇痛、抗炎作用方面的差异。方法:通过醋酸致小鼠扭体法、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法进行家种羌活、蚕羌、竹节羌、条羌、尾羌和疙瘩头镇痛、抗炎方面的药效学实验。镇痛作用比较潜伏期和扭体次数;抗炎作用比较肿胀度和肿胀抑制率。结果:与空白组相比,蚕羌水提液组和疙瘩头水提液组在潜伏期和扭体次数上有极显著性差异(P<0.01),竹节羌水提液组和家种羌活水提液组在扭体次数上有显著差异(P<0.05),条羌水提液组和尾羌水提液组无显著差异;与空白对照组相比,蚕羌水提液组和疙瘩头水提液组在耳肿胀度和肿胀抑制率上有极显著性差异(P<0.01),竹节羌水提液组及家种羌活水提液组有显著差异(P<0.05),条羌水提液组和尾羌水提液组无显著差异。结论:不同商品等级的羌活在镇痛、抗炎作用上有差异,以蚕羌和疙瘩头作用最强,竹节羌和家种羌活作用其次,条羌和尾羌作用不明显。本实验为羌活的商品规格等级的划分提供科学依据。

四川省射洪县中药资源普查

目的:对射洪县中药资源的现状进行普查,为其中药资源保护、合理开发利用提供依据。方法:以全国中药资源普查技术规范为指导,通过查阅资料、野外实地调查及标本采集,结合3S(RS、GPS、GIS)技术,对射洪县现有中药资源进行普查、统计分析。结果:共完成了38个样地,190个套方,1140个样方的调查。调查的药用植物种类有510种,涉及110个科,285个属。其中,中药资源野外调查重点中药材56种,涉及原植物44种。结论:射洪县海拔高差小,其中药资源主要以平原、浅丘的植物为主。普查结果为地方中医药产业发展规划的制订提供了参考依据。

基于道地药材的指纹图谱构建对中药质量评价的探讨

道地药材是优质中药材的代名词。基于道地药材的中药指纹图谱为中药质量控制与评价提供了一种新的解决之道。本文综诉了近年来国内外最新文献研究,对基于道地药材的指纹图谱建立进行了总结,并对该评价模式的发展前景进行了展望。

《中国药典》中大黄在中药制剂的使用及其质量控制探讨

目的:通过对《中国药典》2015年版所收录含大黄中药制剂剂型及其药味数,大黄用量百分比、投料饮片类型、入药方式和质量控制等方面进行统计,分析中药制剂中大黄的使用特点及质量控制状况。方法:以《中国药典》2015年版为基础,结合相关文献,对含大黄中药制剂的大黄饮片类型,入药方式及该制剂的显微鉴别、薄层层析、检查及含量测定方法等进行统计,并进行相关性分析。结果:含大黄的制剂多为丸剂;制剂制法中大黄投料方式以原生药粉为主;质量控制中,显微鉴别和薄层色谱法应用较多,部分包含专属性成分的含量测定,仅少数制剂包含土大黄苷检查。结论:大黄制剂研究注重保留大黄最原始、最完整的活性物质;大黄制剂中控制大黄质量的指标物质的选择还不能反映饮片类型、入药方式、制备工艺与质量的关系,且制剂原料药真伪得不到有效控制,应加强大黄在中药制剂中质量控制的研究。

木香“尾根留种”与“种子育苗”栽培法药材质量差异性研究

目的:评价"尾根留种"和"种子育苗"栽培法对木香药材质量的影响。方法:以木香烃内酯、去氢木香内酯及多糖含量为考察指标,评价两种栽培模式下木香药材质量的差异。结果:与传统的"种子育苗"相比,"尾根留种"栽培模式生产出的木香各指标成分含量均较高。结论:"尾根留种"栽培模式生产出的木香质量较好,可用于推广种植。

西畴重楼生物学特征补述及其系统位置

西畴重楼(Paris cronquistii var.xichouensis)为云南省特有物种,野外调查发现了广西(田林、那坡)的省级新分布,针对该新分布居群,观测并描述西畴重楼植物形态学特征,记录物候学特征,野外观测其地理分布特征,综上对其生物学特性进行补述,并结合前人基于细胞核ITS、叶绿体psbA-trnH和trnL-trnF等序列的分子系统学研究结果探讨其系统关系。结果表明:西畴重楼叶背面无紫色斑块,花瓣较宽而显著区别于凌云重楼(P.cromquistii var.cromquistii),但西畴重楼部分植株沿叶脉有紫色斑纹,表明与凌云重楼存在形态过渡,二者雄蕊数量均以3轮为主,而且变化范围一致;西畴重楼的物候期与同域分布的凌云重楼相近,同南重楼(P.vietnamensis)差异显著;西畴重楼多条序列的分子系统学研究显示西畴重楼和凌云重楼始终聚为一支,证实二者高度的亲缘关系。该研究结果完善了西畴重楼的生物学特性描述,首次报道了西畴重楼与凌云重楼形态特征存在过渡类型,物候学特征较一致,地理分布中心重叠,分子系统学位置相邻,仍支持李恒系统将西畴重楼作为凌云重楼的一变种。

太赫兹光谱技术在中药鉴别中的研究概况

中药材的有效成分复杂,其质量的优势评价方法和质控标准长期以来困扰着药学科研工作者,影响了中药现代化进程。太赫兹光谱技术应用于中草药的有效成分或特殊成分的鉴别,可以避免中药鉴别中依据经验鉴别所带来的主观性和片面性,提高中药鉴别的科学性。本文简介了太赫兹技术及在医药学中的应用,综述了其在中药鉴别中的应用实例及发展方向。太赫兹光谱在中药鉴别中的研究还有广阔的应用前景。

不同产地木香中两种倍半萜内酯的含量测定

目的:测定不同产地木香中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Comatex C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(65∶35)为流动相,检测波长225 nm,流速1.0 m L﹒min^(-1),柱温30℃。结果:木香烃内酯在0.2108μg^1.2648μg、去氢木香内酯在0.2332μg^1.3992μg范围内线性关系良好,木香烃内酯、去氢木香内酯回收率分别为100.75%,100.21%。结论:不同产地木香药材中木香烃内酯和去氢木香烃内酯的含量差别较大,产地对药材质量有明显影响。

基于HPLC指纹图谱及化学模式识别对比研究曲花紫堇及同属药材

目的建立曲花紫堇Corydalis curviflora的HPLC指纹图谱,并通过所建立的指纹图谱方法对紫堇属其他14种药材进行对比研究。方法HPLC-DAD指纹图谱条件:Agilent ZORBAX Extend C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长289 nm;柱温30℃。结合聚类分析(combine cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least square discriminant analysis,OPLS-DA)区分与其极易混淆的暗绿紫堇。结果首次建立了曲花紫堇HPLC指纹图谱,相似度为0.853~0.996,标定18个共有峰,通过对照品比对指认出新绿原酸、绿原酸、原阿片碱、紫堇灵、乙酰紫堇灵、芦丁、紫云英苷、烟花苷、槲皮素、山柰酚10个共有峰;14种同属药材与曲花紫堇对照指纹图谱相似度在0.078~0.686。通过化学模式识别可区分曲花紫堇和暗绿紫堇,二者有6个差异性标志物。结论建立的指纹图谱方法合理、准确,结合化学计量学方法,能有效地鉴别曲花紫堇及同属药材,寻找不同紫堇质量差异成分,为紫堇属不同药材的质量控制和品质评价提供科学依据和参考。

基于PacBio测序的对叶百部叶绿体基因组结构及系统发育分析

目的:获得对叶百部Stemona tuberosa高质量叶绿体基因组信息,明确其结构、序列特征,同时确定对叶百部的系统发育地位。方法:采用Illumina NovaSeq 6000和PacBio RSⅡ平台对对叶百部分别进行建库测序,利用生物信息软件将2个测序平台的数据进行混合组装和碱基校正,最终获得高质量叶绿体基因组,随后对其序列特征、重复序列、基因多样性和系统发育进行分析。结果:对叶百部叶绿体基因组大小为154379 bp,叶绿体基因组结构为典型环状四段式,1对27074 bp的反向重复区(IR),1个大小为17924 bp的小单拷贝区(SSC)和1个82307 bp的大单拷贝区(LSC),平均鸟嘌呤和肥嘧啶所占的比率(GC)含量为37.86%;共注释得到121个基因,包括30个tRNA基因,4个rRNA基因和87蛋白编码基因,其中6个tRNA基因和12个蛋白质编码基因中存在内含子;对叶百部叶绿体基因组中共发现49个长重复序列和59个单核苷酸简单重复序列(SSR);4个百部属的叶绿体基因组比较分析表明ycf1和ndhF基因具有高度多样性;基于叶绿体基因组构建的系统发育树与对叶百部目前的分类地位一致。结论:成功组装了对叶百部叶绿体高质量基因组,获得了包括对叶百部在内的4种百部属植物叶绿体基因组的结构及序列特征信息,为百部属药用植物的鉴定、进化和系统发育研究奠定基础。

华重楼皂苷类成分的动态分布规律对药材质量的影响

目的研究华重楼皂苷类成分及药材生物量积累速度的时间、空间分布规律(随植株生长年限、采挖季节的变化规律及在不同部位的积累特征),明确最佳种植年限、采收季节、入药部位。方法建立了基于高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定华重楼6种皂苷(重楼皂苷I、II、VI、VII、V、H)量的方法以检测皂苷量的变化;采用烘干法测定药材折干率以指示生物量积累速度。结果华重楼根茎折干率同生长年限呈正相关,8年生最高;随着采收月份呈波浪式,6月和1月为波峰;总皂苷构成以重楼皂苷VII、H为主,总皂苷量随着生长年限呈"V"字型,2年和8年为顶点;随着采收季节呈波浪式,3月和11月为波峰;植株不同部位的总皂苷分布差异明显,茎叶总皂苷量>根茎尖段总皂苷量>根茎中段总皂苷量≈根茎尾段总皂苷量,其中重楼皂苷VII的分布从茎叶向根茎尾端呈明显下降趋势,而重楼皂苷H则呈显著上升趋势。结论生长年限、采收季节、植株部位对华重楼皂苷的累积有明显影响,人工栽培华重楼最佳种植年限为8年、最佳采收季节为11月;仅采用根茎尾段入药会降低商品药材质量;重楼皂苷VII可能同华重楼的萌芽和茎叶生长有关;茎叶可作为获取重楼皂苷的重要资源,对于扩大药源,提高资源利用效率有重要意义。

贵州产滇重楼的资源调查及品质评价

目的考察贵州省产滇重楼的资源分布情况,并评价滇重楼的药材品质。方法通过野外实地考查,了解滇重楼的资源情况,并收集样品;采用HPLC法测定样品中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。结果贵州省的滇重楼资源以安顺地区西经黔西南州至水城这一条带为分布中心;绝大多数药材样品中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量可满足《中国药典》的要求,2、5、7号样品的品质最好,4种皂苷的总含量均>2%。结论贵州省产滇重楼的品质良好、稳定,其药材对比其他产地具明显的优势。

四川德昌傈僳族端午节药市的民族植物学分析

目的:通过对四川德昌"傈僳族端午节药市"开展民族植物学研究,整理并记录傈僳族具有其民族和地域特色的民族药用植物资源和运用经验,促进傈僳族传统民族医药文化的保护和发扬。方法:基于民族植物学的理论和研究方法,进行文献考证、实地调查和关键人物访谈、标本采集和植物分类学鉴定。结果:德昌"傈僳族端午节药市"出售的药物种类繁多,共记录了106种植物药;从中整理鉴定药用动植物共计77种,隶属42科,70属;对民族药名称、基源、药用部位、用途和用法进行编目;对德昌县"傈僳族端午节药市"的可持续发展以及傈僳族传统医药文化的保护和传承提出了建议。结论:端午节药市是我国西南少数民族地区特有的传统医药文化现象,四川省德昌"傈僳族端午节药市"已有500余年的悠久历史,为凉山彝族自治州州级非物质文化遗产,其地域民族特色浓厚,汇集了当地人民在长期与疾病斗争过程中积累的丰富的民族药用动植物知识和经验。相对于传统中医药,傈僳族端午节用药特色鲜明,体现为就地取材,强调时令,喜鲜用,多单方,入药部位异于中药,用法上以内服食疗为主,药浴外敷为辅,侧重祛风除湿、活血化瘀、跌打损伤。本文将为系统研究傈僳族特色民族医药提供第一手材料,对传承和发扬我国少数民族传统医药文化也具有重要意义。

基于PCA及CA的唐古特大黄蒽醌类、二蒽酮类及鞣质类含量研究

大黄药材中蒽醌类、二蒽酮类及鞣质类是其主要有效成分。该文以唐古特大黄主产地药材为研究对象,采用HPLC测定游离和结合蒽醌类、二蒽酮类及鞣质类成分的含量,用多重比较、主成分分析PCA及对应分析CA探究3类成分积累规律。结果显示,不同产地、不同生长方式(野生和家种)的大黄化学成分含量差异达到显著性水平(P<0. 05)。产于白玉县、小金县及若尔盖县的分别在儿茶素、大黄酸及番泻苷A的积累上具有明显的优势;唐古特大黄野生品与栽培品主成分构成不同,野生条件下,有利于结合型蒽醌组分的积累;规范化种植大黄的3类活性成分积累量优于散户零星种植。因此,唐古特大黄栽培基地选择应充分考虑产地对大黄化学成分积累的影响。规范化种植方式较优,但即使是在此条件下,唐古特大黄栽培品也不及野生品。