水稻黄化早抽穗突变体hz1的基因鉴定及功能分析

【目的】水稻的抽穗期对水稻地域适应性及水稻产量至关重要,对水稻抽穗期基因进行鉴定及功能分析,可以为水稻育种提供优异的基因资源。【方法】通过BSA-seq方法对一个黄化早抽穗突变体hz1(huangzao1)进行基因定位克隆及连锁分析;利用RT-qPCR技术分析目的基因HZ1的表达谱,并用水稻原生质体瞬时转化查明HZ1的亚细胞定位;对突变体的抽穗期、叶绿素含量、过氧化氢含量等生理指标进行测定,详细分析其表型变化。【结果】田间表型观察发现hz1表现早抽穗,长日照(long-day,LD)及短日照(short-day,SD)条件下hz1的抽穗期相同,分别比野生型(wild type,WT)早抽穗43 d和26 d,表明hz1是一个光周期不敏感的突变体。同时hz1表现黄化表型,相比WT,叶绿素含量下降。遗传分析表明hz1由隐性单基因控制,F2混池高通量测序将目的基因定位于水稻第6染色体上17.8 Mb区间内,分析发现该区间内一个T-DNA插入位点LOC_Os06g40080与hz1目标性状完全连锁,LOC_Os06g40080为已知的SE5基因,编码血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO1)。HZ1/SE5在叶片中高表达,在LD及SD条件下具有昼夜节律性表达。亚细胞定位发现HZ1/SE5蛋白定位于叶绿体中。表达调控分析表明HZ1/SE5主要通过调控水稻成花素Hd3a和RFT1的表达来调控水稻的抽穗期;并通过调控叶绿素合成途径相关基因的表达水平影响水稻叶绿素水平变化。【结论】黄化早抽穗突变体hz1由于血红素加氧酶编码基因SE5突变导致其对光周期不敏感,HZ1/SE5基因通过调控水稻成花素基因及叶绿素合成途径相关基因的表达而影响水稻的抽穗期及叶片的黄化。

基于上转换-磁分离免疫荧光法检测蔬菜中的多菌灵

为了能够快速检测出黄瓜和洋白菜中的多菌灵残留,基于性能良好的上转换纳米材料NaYF4:Yb,Er@SiO2@NH2,构建上转换-磁分离免疫荧光法并对样品前处理过程进行优化,建立了对2种蔬菜中多菌灵的快速高效检测方法.选取市售黄瓜和洋白菜作为检测样品,经过乙腈提取、盐析、净化、PBS稀释等处理基本消除基质影响,采用上转换-磁分离免疫荧光法对样品中的多菌灵残留进行检测,并与HPLC法进行比对.结果表明:在最佳工作条件下,上转换-磁分离免疫荧光法中,黄瓜和洋白菜样品的前处理时间分别为10 min和8 min,回收率分别为83.2%~86.8%和86.3%~89.4%,检出限均为0.5μg/kg.上转换-磁分离免疫荧光法对黄瓜和洋白菜的检测结果与HPLC检测结果一致,表明该方法准确性良好,可以实现蔬菜中多菌灵残留的快速灵敏检测.