结核感染T细胞斑点试验在不同患者群中的检测结果分析

目的探讨影响结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT．TB）检测结果的因素。方法收集2014年5月至2015年4月同济大学附属上海市肺科医院共1537例住院患者的临床资料。以《临床诊疗指南：结核病分册》的标准将患者分为临床诊断结核病组（1159例）和临床诊断非结核病组（378例）；再经病原学诊断及随访排除不能做出最终诊断的39例患者后，将患者分为结核病组（1103例；包括经分枝杆菌培养及菌种鉴定确诊的229例和最终临床诊断的874例）和非结核病组（395例；包括既往有结核病史或肺部存在陈旧性病灶者94例，无病史者301例）；1103例结核病组患者中，肺结核557例，结核性胸膜炎107例，淋巴结结核16例，骨关节结核51例，脑结核7例，多组织器官结核363例，其他肺外结核2例；395例非结核病组患者中，经分枝杆菌培养及菌种鉴定确诊的非结核分枝杆菌（NTM）感染患者93例。回顾性分析临床诊断结核病组和结核病组患者T-SPOT．TB检测结果的敏感度、特异度，结核病组与非结核病组患者T-SPOT．TB检测反应强度，不同结核病类型TSPOT．TB检测阳性率，以及NTM感染患者与结核病患者的年龄差异。结果（1）临床诊断结核病组T-SPOT．TB检测的敏感度为8L97％（950／1159）、特异度为53．44％（202／378）；结核病组T-SPOT．TB检测的敏感度为83．77％（924／1103）、特异度为54．43％（215／395）；结核病组中抗酸染色阳性患者T-SPOT．TB检测阳性率为90．73％（235／259）；培养阳性患者T-SPOT．TB检测阳性率为92．58％（212／229）。（2）非结核病组有结核病史或肺部显示陈旧性结核病灶的患者与无病史者T-SPOT．TB检测的阳性率分别为69．15％（65／94）和38．21％（115／301），两组间差异有统计学意义（x^2=27．65，P=0．000）。（3）结核病组与非结核病组T-SPOT．TB检测结果以斑点计数表示反应强度，结核病组对A、B抗原刺激出现阳性反应（斑点数≥1）的患者中，明显阳性及超强阳性（斑点数≥11）的比率分别为69．81％（652／934）和69．67％（627／900），明显高于非结核病组[分别为46．83％（96／205）和46．63％（83／178）]；经曼-惠特尼秩和检验，差异有统计学意义（Z值分别为-14．20、-14．63，P值均d0．01）。（4）1103例结核病组患者中，T-SPOT．TB检测阳性率以淋巴结结核（87．50％，14／16）为最高，随后依次为多组织器官结核（87．33％，317／363）、肺结核（86．54％，482／557）、结核性胸膜炎（74．77％，80／107），脑结核（57．14％，4／7）和骨关节结核（50．98％，26／51）相对较低。（5）T-SPOT．TB检测阳性的NTM感染患者的平均年龄[（53．61±18．43）岁]较T—SPOT．TB检测阳性的确诊结核病患者[（44．98±18．88）岁]高，差异有统计学意义（t=-2．63，P=0．009）。结论T-SPOT．TB检测结果受结核病诊断依据、痰菌量、既往结核病史或肺部陈旧性结核病灶、NTM感染、结核病灶存在的部位等多种因素的影响；T-SPOT．TB检测用于指导结核病诊断时，需综合考虑各项因素。

免疫印迹检测儿童肺炎支原体感染特异性抗体IgE

目的 分析肺炎支原体 (MP)引起变态反应的抗原成分 ,比较组别间特异性IgE出现率。方法 留取三个组待测血清 :(1)肺炎支原体肺炎组 (MP感染组 ) 35例 ;(2 )支气管哮喘合并MP感染组 (哮喘组 ) 32例 ;(3)正常对照组 2 7例。 6 %聚丙烯酰胺凝胶SDS PAGE分离MPFH株菌体粉碎后蛋白成分 ;电转移至PVDF膜上 ;通过免疫印迹检测三个组待测血清IgE阳性率。 结果 SDS PAGE显示MP蛋白成分有十几条。与IgE反应的抗原多肽为 2 16KD、2 0 5KD、170KD、6 8KD、5 6KD。MP IgE阳性率MP感染组 71 4 %、哮喘组 78 13% ,两者无明显差异 ,但与对照组 (19 2 3% )相比差异有显著性 (P <0 0 1)。MP感染的婴幼儿特异性IgE亦有较高的阳性率。 结论 MP引起的呼吸道感染是小儿喘息发作或哮喘病情加重的主要病原体之一。免疫印迹检测MP IgE具有较高的灵敏度和特异性。

161例耐多药肺结核治疗随访结果

目的探讨MDR-TB治疗效果及影响预后的因素。方法选择2006—2008年痰液经BACTECMGIT 960系统快速培养为结核分枝杆菌生长并同时耐异烟肼和利福平的MDR-TB住院患者161例,记录人口学资料、年龄分组、抗结核药物使用种类及使用时间、主要并存病及并发症、肺部病灶影像学改变等临床资料和药敏试验结果及随访结果。通过logstic多因素回归分析治疗最终结果的影响因素(包括性别、年龄、患者类型、是否使用二线药物、基线耐药种类和肺结核病情)。结果161例MDR-TB患者中男性116例,女性45例(年龄15～87岁)。161例MDR-TB患者中,曾使用二线药物者108例(67.08%)。肺部病灶程度中度者45例(27.95%),重度者111例(68.94%)。MDR-TB化学治疗方案其中氨基糖苷类注射剂[包括链霉素(部分对链霉素敏感患者)及阿米卡星(95/161)]或多肽类注射剂[主要为卷曲霉素(34/161)]使用率占80.12%(129/161),口服氟喹诺酮类使用率占95.65%(154/161),丙硫异烟胺使用率占72.67%(117/161),对氨基水杨酸异烟肼使用率占81.37%(131/161),吡嗪酰胺使用率占62.11%(100/161)。治疗结果显示:153例患者(失访8例)治愈45例(29.41%,45/153),死亡19例(12.42%,19/153),治疗失败89例。不同年龄组治愈比例为<30岁69.57%(16/23)、30～岁18.75%(15/80)、50～岁31.71%(13/41)、≥70岁11.11%(1/9)。是否使用二线药物、肺结核病情及年龄对MDR-TB治疗成败,差异有统计学意义(χ2=11.013,P<0.05;χ2=14.417,P<0.05;χ2=14.969,P<0.05)。结论年龄、是否使用二线药物以及肺结核病情对MDR-TB患者治疗成败有影响;MDR-TB治愈率低,死亡率高,应积极研发作用强、毒性低的新一代抗结核药物,控制耐药结核病的发展和蔓延。

糖尿病肺结核影像学特点与血糖相关性分析

目的探讨糖尿病肺结核特征性影像学改变与相关因素。方法 (1)2009年4月—2009年9月间住院糖尿病初次治疗肺结核患者86例,排除使用糖皮质激素及免疫抑制药物、非结核分枝杆菌病及HIV阳性患者;(2)记录人口学资料、糖尿病发病时间、糖尿病治疗方法、结核病症状出现时间;(3)评定肺部影像学改变、支气管镜检查结果,记录入院3 d内测定的空腹血糖浓度、痰抗酸杆菌涂片结果及可获取的糖化血红蛋白比值;(4)统计软件SPSS15.0对数据处理,卡方检验及多因素Lo-gistic分析。结果 (1)86例糖尿病初治肺结核者男性71例、占82.6%,女性15例中肺部干酪性病变者15例;(2)46.5%患者糖尿病程在5年及以上,69.6%患者糖化血红蛋白超过8%;(3)糖尿病肺结核特征性影像学变化干酪性病变为主者占81.4%;总体痰菌阳性率为77.9%,肺部干酪病变痰菌阳性率为87.1%;(4)不同程度空腹血糖水平之间肺部干酪病变发生率虽差异无统计学意义,但空腹血糖超过10 mmol/L者干酪病变发生率增高;(5)不同的结核发病时间及是否合并支气管结核,肺部特异性病变无明显差异;(6)多因素Logistic回归分析显示,空腹血糖浓度水平、糖尿病病程以及结核病程,对肺结核干酪病变发生率有显著影响(分别在P=0.001、P=0.019 7、P=0.026 5),糖尿病病程中以小于6个月、结核病程在3个月之内者肺干酪病变发生率较高。糖尿病不同的控制方法、是否合并支气管结核及不同性别之间对干酪病变形成无明显统计学意义。结论糖尿病肺结核影像学的干酪性病变特征主要为血糖控制水平较差引起。因此,积极控制好血糖是预防、治疗糖尿病合并肺结核以及改善预后的关键。

结核性胸膜炎胸液T淋巴细胞亚群、黏附分子变化分析

目的回顾性分析结核性胸膜炎时胸膜腔局部的免疫反应和炎症状态。方法利用单克隆抗体、采用流式细胞仪测定35例结核性胸膜炎患者外周血和胸液中表面标记CD3、CD4、CD8I、CAM-1、23、、VCAM-1的淋巴细胞、进行比较。结果胸液中CD3、CD4类淋巴细胞及亚群CD4/CD8比值明显高于外周血,而CD8淋巴细胞则明显低于外周血。黏附分子ICAM-12、3、、VCAM-1在外周血和胸液中淋巴细胞表面表达比例并无差异。黏附分子和T淋巴细胞亚群的以上分布情况在病程不同的患者中无差异性。结论结核性胸膜炎胸腔积液中以CD4淋巴细胞反应为主,而淋巴细胞表面黏附分子表达则无明显变化。

肺结核患者外周血自然杀伤细胞和T细胞数量和细胞因子水平变化

抗结核免疫低下是结核易感及发展为活动性病变的主要因素。小儿和老人是结核病的好发人群，可能是因为小儿免疫系统不成熟而老人免疫功能渐渐衰退所致。机体对抗外来病原体的入侵首先是依赖先天免疫做出快速而强烈的反应，随后才是具有抗原特异性的获得性免疫反应。在结核病状态下，

血小板计数对判断肺结核病情的价值探讨

目的了解外周血小板计数增高对结核病患者病情的诊治价值。方法选择2012年1—6月住院初治肺结核进展期80例(进展期组)、治疗后好转期43例(好转期组)及同期健康体检者89名(对照组)。采用血常规细胞计数仪检测外周血白细胞、血小板计数,中性粒细胞比值;同日送检血红细胞沉降率(ESR)及C反应蛋白(CRP)。SPSS13.0统计软件处理数据。结果进展期组ESR及CRP分别明显高于好转期组(P=0.006 5,P=0.007 3);进展期组血小板计数高于正常参考值上限者占41.94%,均值亦明显高于好转组及对照者(分别为P=0.001 4,P=0.0000);且血小板计数分别与ESR及CRP呈正相关。而白细胞计数及中性粒细胞比值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论结核病患者外周血血小板计数升高,对判断病情的活动性及治疗效果具有一定参考价值。

163例儿童结核病类型及临床特点

儿童结核病疫情作为一个国家或地区近期结核病疫情控制或结核分枝杆菌感染状况的指标。2001--2010年全国14岁以下儿童结核病疫情显示儿童结核病报告率与成人基本一致，但是报告例数与WHO估计的我国儿童结核病发病例数差距较大。与成人相比，儿童结核病易被忽视，患儿年龄偏小，不易得到准确的主诉，易使病情延误，并且不利于病情判断。结核病患儿某些症状易被忽视如轻度咳嗽、低热等，痰标本检查阳性率较低，一般医务人员缺乏儿童结核病的诊断及治疗经验，导致儿童结核病诊断较困难。

肺炎支原体肺炎和哮喘患儿肺炎支原体特异性IgE检测的分析

通过免疫手段 (SDS PAGE及Westernblot)分析MP引起变态反应的抗原成分 ,比较有哮喘史及无特应症的MP感染者特异性IgE阳性率 ,并探讨与MP特异性IgE产生的有关因素。MP IgM阳性的支气管肺炎患儿 35例 (平均年龄 6 0± 3 4岁 )及支气管哮喘患儿 32例 (平均年龄 6 7± 3 3岁 ) ,MP IgM、IgA均为阴性的正常健康者 2 7例 (平均年龄 7 0± 3 6岁 )作为对照组 ;采用免疫印迹技术观察上述各组待测血清针对所分离MPFH株菌体粉碎后蛋白成分的杂交条带 ,并对其出现频度进行统计分析 ;同时应用ELISA方法检测血清总IgE。结果SDS PAGE显示MP蛋白成分有十几条。与IgE反应的抗原多肽的相对分子质量为 2 16 0 0 0、 2 0 5 0 0 0、 170 0 0 0、 6 80 0 0、 5 6 0 0 0 ,其中前三者抗原性最强 ,不同组别、病程及年龄出现率明显高于后两者 (P <0 0 5 )。MP IgE阳性率 :MP感染组 71 4 %、哮喘组 78 13%、对照组 19 2 3% ,前两组间无明显差异 ,均显著高于对照组 (P <0 0 0 5 )。MP IgE阳性率在感染 8d后上升 ,2 8d后逐渐下降。与MP IgM滴度、血清T IgE无明显直接关系。结论 :(1)MP菌体粉碎后蛋白成分复杂 ,与IgE反应的抗原相对分子质量为 2 16 0 0 0、 2 0 5 0 0 0、 170 0 0 0、 6 80 0 0、 5 6 0 0 0 。

过敏性哮喘患者蟑螂抗原皮肤反应性调查

目的对门诊蟑螂过敏性哮喘发病情况进行粗略判断 ,并以对黑胸大蠊与美洲大蠊抗原皮肤反应性作一比较。 方法回顾分析 2 12例有 14种抗原 (皮肤点刺试验 )资料的过敏性哮喘及过敏性鼻炎患儿蟑螂抗原皮试结果 ;总结 34例成人过敏性哮喘患者上述两种蟑螂抗原皮试 (皮内试验 )结果。 结果有皮试资料的 2 12例患儿中 ,蟑螂抗原皮肤点刺试验阳性 6 1例 ,阳性率 2 8.7% ,占 14种抗原皮试结果的第 4位。而就气传变应原相比较 ,排在屋尘螨及粉尘螨 (均为 89.6 % )之后 ,居第 3位 ;34例成人患者中 ,蟑螂抗原皮内试验阳性 6例 ,阳性率 17.7%。黑胸大蠊与美洲大蠊抗原皮试阳性结果一致。 结论蟑螂是门诊过敏性哮喘及过敏性鼻炎患儿常见致敏原之一 ;哮喘患者对黑胸大蠊与美洲大蠊抗原反应性一致。

332例骨关节结核的临床特点分析

目的分析骨关节结核的临床特点。方法选取上海市肺科医院2013年112月收治的骨关节结核患者作为研究对象，共332例。收集并分析研究对象的人口学特征、临床表现、实验室检查结果、影像学检查结果，以及骨关节结核的诊断和类型。结果332例患者中，男208例（62．7％）、女124例（37．3％），平均年龄（47．51±17．64）岁。初治患者224例，占67．5％；复治患者108例，占32．5％。发热74例（22．2％），局部疼痛280例（84．3％），功能受限160例（48．2％），局部肿胀99例（29．8％），出现神经根受压症状110例（33．1％），局部压痛242例（72．9％）。实验室检查结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT．TB）阳性228例（68．7％），结核抗体阳性80例（24．1％），血红细胞沉降率（ESR）升高266例（80．1％），C反应蛋白（CRP）升高212例（63．9％）。影像学所见呈骨质破坏合并脓肿形成者197例（59．3％）。主要诊断为脊柱结核248例（74．7％），其中，腰椎结核168例（50．6％），胸椎结核80例（24．1％），骶髂关节结核16例（4．8％）；胸骨结核14例（4．2％），多发骨关节结核32例（9．6％）。骨关节结核合并血行播散性肺结核38例（11．4％），合并继发性肺结核78例（23．5％），合并其他肺外结核54例（16．3％）。结论骨关节结核发病部位以脊柱结核为主，临床表现为局部疼痛及压痛、ESR增快、CRP升高、T-SPOT．TB阳性；联合磁共振等影像学检查有助于诊断，骨质破坏合并脓肿形成是诊断骨关节结核的重要依据，合并肺结核及其他肺外结核是诊断骨关节结核的重要线索。

248例结核病合并糖尿病住院患者的临床分析

糖尿病人群的结核病发病率和患病率分别为一般人群的3~4倍和4~8倍,为结核病的高发人群[1],糖尿病患者的增多,可加重肺结核流行,为更好地防治结核病,现就2009年1月至2009年12月共248例结核病合并糖尿病住院患者的病情总结分析如下。

三种检测技术对肺结核辅助诊断价值的研究

目的评价痰液结核分枝杆菌采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术（simultaneous amplification and testing，SAT）、外周血结核感染T淋巴细胞斑点试验（T-SPOT．TB）及血清结核抗体（TBAb）检测等3种检测方法对肺结核的辅助诊断价值。方法选取上海市肺科医院2014年11月至2015年10月期间临床确诊为肺结核的住院患者作为肺结核组，共689例。选取同时期上海市肺科医院住院的肺部非结核性疾病患者作为非肺结核组，共291例。收集研究对象临床资料及T-SPOT．TB、SAT、血清TP-Ab检测结果，以肺结核临床诊断为金标准，计算3种方法单独及联合检测（3种方法联合检测时任一种方法检测结果阳性则诊断为肺结核，联合检测结果均为阴性时判断为阴性）的诊断效能指标，并绘制受试者工作曲线（ROC曲线），评价其对肺结核的诊断价值。结果T-SPC咀TB检测敏感度为90．67％（593／654），特异度为68．09％（192／282）。SAT检测敏感度为30．43％（133／437），特异度为100．00％（87／87）。TB-Ab检测敏感度为43．95％（298／678），特异度为78．82％（227／288）。3种方法联合检测的敏感度为93．14％（285／306），特异度为53．41％（47／88）；T-SPOT．TB和TB-Ab联合检测的敏感度为92．83％（440／474），特异度为52．11％（148／284）。绘制3种检测方法诊断肺结核的ROC曲线，T-SPOT．TB、SAT检测对应的曲线下面积（AUC）分别为0．798和0．652；T-SPOT．TB＋SAT＋TB-Ab、T-SPOT．TB＋TB-Ab联合检测对应的AUC值分别为0．865和0．843。结论T-SPOT．TB、SAT及TB-Ab联合检测辅助诊断肺结核价值较高，T-SPOT．TB和TB-Ab联合检测次之；单项检测中，SAT检测特异度最高，T-SPOT．TB诊断价值最大。

结核感染T细胞斑点试验在HIV/AIDS合并结核病诊断中的应用

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测在HIV/AIDS合并结核病诊断中的应用价值。方法选取HIV阳性结核病患者44例、同期住院的HIV阴性结核病患者42例和HIV阳性非结核病患者28例。对3组患者的T-SPOT.TB、血结核抗体试验及外周血CD4+T细胞绝对计数等结果进行回顾性分析。结果 TSPOT.TB对HIV阳性患者诊断结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.82%、85.71%、90.00%、75.00%,其中灵敏度、阳性预测值与阴性预测值明显高于结核抗体检查,差异有统计学意义(P<0.01)。HIV阳性结核病组T-SPOT.TB灵敏度(81.82%)与HIV阴性结核病组T-SPOT.TB灵敏度(83.33%)比较,差异无统计学意义(P=0.54),但HIV阳性结核病组结核抗体检查的灵敏度(25.00%)明显低于HIV阴性结核病组(57.14%)(P<0.01)。HIV阳性结核病组中,T-SPOT.TB在菌阳肺结核、菌阴肺结核、肺外结核3种不同类型结核病患者中的灵敏度分别是71.43%、85.71%、88.89%,三者之间差异无统计学意义(P=0.586)。T-SPOT.TB在CD4+T淋巴细胞≤200个/μl的HIV合并结核病患者中的灵敏度为62.50%,低于CD4+T淋巴细胞>200个/μl组(92.86%),差异有统计学意义(P=0.019)。结论 T-SPOT.TB灵敏度和特异度较高,对HIV/AIDS合并结核病具有较大的辅助诊断价值。CD4+T淋巴细胞的数量对T-SPOT.TB灵敏度有一定影响。

58例非结核分枝杆菌肺病住院患者的临床分析

目的了解非结核分支杆菌(NTM)肺病患者临床及耐药特点。方法分析上海市肺科医院确诊为NTM肺病的58例患者的临床资料。结果男女之比1.32∶1,平均年龄(60.5±12.8)岁。患者肺部均有斑片影,伴索条或结节。耐药率:异烟肼91.4%;利福平81.1%;乙胺丁醇75.5%;链霉素98.1%。氧氟沙星83.3%。阿米卡星91.9%。卷曲霉素94.6%。同时耐HR77.4%;SHREACpO全耐43.4%。结论 NTM肺病好发于中老年男性,肺部影像类似肺结核。NTM耐药率仍在增高,近半数SHREACpO全耐。