重组梅毒螺旋体黏附素在小鼠模型中的免疫原性及免疫保护性研究

目的观察重组梅毒螺旋体(Tp)黏附素Tp0751(rTp0751)、Tp0136氨基端(rTp0136 ^(N))、Tp0435(rTp0435)诱生C57BL/6小鼠适应性免疫应答水平及免疫后抑制Tp在小鼠体内播散情况,为筛选梅毒疫苗候选分子提供依据。方法表达和纯化重组蛋白rTp0751、rTp0136 ^(N)和rTp0435。将C57BL/6小鼠随机分为PBS对照组、rTp0751组、rTp0136 ^(N)组、rTp0435组,分别以PBS、rTp0751、rTp0136 ^(N)及rTp0435免疫各组小鼠3次;ELISA检测各组小鼠免疫血清特异性IgG抗体水平;流式细胞术(FCM)检测末次免疫后2周小鼠脾细胞胞内白细胞介素-4(IL-4)与干扰素-γ(IFN-γ)含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测Tp攻击6周后小鼠心、脾、脑组织中Tp的DNA载量。结果各免疫组小鼠血清特异性IgG抗体随免疫时间增加而逐渐升高并于首次免疫第6周达到峰值。FCM检测结果显示各免疫组淋巴细胞胞内CD4^(+)IFN-γ+与CD8+IFN-γ+含量均高于PBS对照组(P<0.01),CD4^(+)T细胞产生IL-4水平均极低。qPCR检测结果显示,在脾脏、心脏和脑组织中,rTp0751与rTp0136 ^(N)组Tp-DNA载量均低于PBS对照组(P<0.05),rTp0435组与PBS对照组之间无明显差异。结论rTp0751、rTp0136 ^(N)、rTp0435均具有良好的免疫原性,Tp0751、Tp0136 ^(N)有望为梅毒候选疫苗分子。

梅毒螺旋体黏附素的研究进展

梅毒是梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)感染所致的一种多阶段慢性性传播疾病。Tp外膜蛋白十分稀少,外膜缺乏内毒素,也不产生明显的毒力因子,但具有强大的组织侵袭力,这种侵袭力与其菌体表层的黏附素密切相关。黏附素不但介导Tp菌体对组织细胞和(或)细胞外基质(ECM)的黏附,参与Tp的侵入和定植,某些黏附素还具有降解ECM成分的蛋白酶活性,有助于Tp向远端组织器官播散。Tp黏附素大多为膜脂蛋白,免疫原性强,有潜在的免疫诊断价值。此外,抗黏附感染是梅毒疫苗研发的主要方向之一。本文对已发现的重要Tp黏附素的结构、致病作用、免疫保护性和潜在诊断价值方面的研究进行了综述。