犬支气管败血波氏杆菌的分离鉴定和灭活疫苗初步应用

某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序,对分离细菌进行鉴定,并对部分菌株进行药敏试验。选取1株致病性强的分离菌株制备支气管败血波氏杆菌蜂胶佐剂灭活疫苗,进行免疫保护试验,分别采用1.0和0.5 mL剂量免疫小鼠,免疫后21 d攻毒;对养殖场临床发病犬和同群健康犬进行紧急免疫接种,剂量为4月龄以上犬每只1.0 mL、2~4月龄犬每只0.5 mL。对临床病死犬和攻毒死亡小鼠进行组织病理学观察。结果显示,从临床发病犬的鼻腔拭子、肺脏、气管和鼻腔黏液状分泌物共分离鉴定获得30株支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,临床分离菌株对环丙沙星和米诺环素高度敏感,但临床治疗效果不明显。免疫保护试验中,1.0 mL和0.5 mL蜂胶佐剂灭活疫苗对小鼠的保护率均可达100%;紧急免疫接种后,临床发病犬逐渐恢复,同群健康犬无新发病个体,疫苗免疫效果良好。组织病理学观察发现,临床病死犬和攻毒死亡小鼠均表现典型的支气管肺炎和肺气肿病变,肝细胞呈水泡样变。结果表明,支气管败血波氏杆菌是导致该场部分犬出现呼吸道疾病的病原体,蜂胶灭活疫苗可有效防控实验用比格犬支气管败血波氏杆菌感染。

研究生兽医高级病理学课程思政教学探索

依托专业课程进行思想政治的教育实践活动,实现全程育人、全方位育人、全员育人,是新时代高等教育教学改革的重要课题。本文就研究生兽医高级病理学课程的性质和内容,探讨融入思政教育的必要性。通过多点切入,融思政元素于兽医高级病理学教学内容,通过提高教师自身素质和合理应用教学方法,实现思政的教育和引领作用,探索兽医高级病理学课程思政教学的方法。

鸡斑点肝病的研究进展

鸡斑点肝病是影响家禽养殖业的重要传染病,主要发生于蛋鸡和肉种鸡,以肝脏出现灰白色坏死点为重要病理特征,并以此命名。该病严重影响蛋鸡的产蛋量,且造成被感染鸡的急性死亡,给家禽养殖业造成巨大经济损失。论文就国外鸡斑点肝病的发生情况、病原的发现过程、确定病原(肝弯曲菌)的特性,以及该病的流行特点、临床症状和病理变化和诊断与防治等研究进展进行综述,以期为鸡斑点肝病的研究以及防控提供参考。

鸡胚源大肠杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性分析

为了解鸡胚来源大肠杆菌的致病性和耐药性情况,本试验对山东省某白羽肉鸡孵化场6个不同批次种蛋孵化后随机抽检的174枚啄壳未出壳死胚的卵黄和胎粪进行了大肠杆菌分离。通过细菌培养、形态观察、生化试验方法鉴定大肠杆菌;通过小鼠攻毒试验和毒力基因PCR检测确定大肠杆菌分离株的致病性;利用纸片扩散法药敏试验检测大肠杆菌分离株的耐药性。结果显示,共分离鉴定大肠杆菌28株;小鼠攻毒试验结果显示,27大肠杆菌分离株对小鼠的致死率达到了50.0%以上,其中有24株超过了83.0%;在检测的14种毒力基因中,papA、papC、eaeA和vat四种基因未检出,fimC检出率最高(85.7%),另外9种毒力基因检出率介于3.6%~64.3%;菌株的致病性与携带的毒力基因数量大致呈正相关;耐药性检测结果显示,大肠杆菌分离株对10种抗菌药物具有不同程度的敏感性,耐药率介于17.9%~89.3%。结果表明,本试验分离的鸡胚源大肠杆菌绝大多数具有致病性,对临床常见抗菌药物存在不同程度的耐药。本试验结果为种鸡场加强大肠杆菌垂直传播的管理和控制以及临床用药的选择提供了参考依据。

动物源A型产气荚膜梭菌流行情况调查及α毒素基因分析

产气荚膜梭菌是一种重要的人畜共患病原菌,在一定条件下可引起多种严重疾病。为了调查不同动物A型产气荚膜梭菌流行情况及α毒素基因同源性,本试验从不同地区共采集病料307份,其中鸡133份(包括肉鸡112份、蛋鸡21份)、鸭65份、犬31份、猪14份、兔子20份、小鼠9份、牛粪便18份、鸵鸟粪便17份。取肠道内容物和粪便进行产气荚膜梭菌分离鉴定和毒素基因分型,并检测cpe、β2毒素基因携带率;从不同地区、不同动物源A型产气荚膜梭菌分离株挑选18株进行α毒素基因扩增,将所得基因序列进行同源性比较。结果显示,307份样品中68份(22.1%)呈产气荚膜梭菌阳性,不同动物源产气荚膜梭菌阳性率介于5.9%~44.4%;68株产气荚膜梭菌分离株α毒素基因阳性率为100%,所有分离株毒素基因分型均为A型,未检测到cpe毒素基因,β2毒素基因总阳性率为63.2%;分离株与NCBI参考菌株α毒素基因相似性介于97.8%~100%。结果表明,不同动物α毒素具有很高的同源性,本调查为研发A型产气荚膜梭菌α毒素通用疫苗提供数据支持。

青岛地区3株犬细小病毒全基因组分析

为了探明青岛地区免疫过犬细小病毒(CPV)疫苗的犬因犬细小病毒感染死亡的原因,本研究采用全基因序列测定、系统进化树构建、基因分型和氨基酸分析的方法,对从临床发病犬中分离的3株CPV进行分析。结果显示,本实验室于2012年和2015年分离到的2株病毒(CPV-QD12和CPV-QD15)为new CPV-2a型,本研究分离到的1株病毒(CPV-QD20)为CPV-2c型;3株CPV在VP2的第5、267、297、324、370、426、440位氨基酸,NS1的第60、544、545、572、624、630位氨基酸发生了非同义替代。目前广泛使用的进口CPV弱毒活疫苗的基因型为原始的CPV-2型,与CPV流行毒株的基因型存在差异,这可能是造成CPV临床免疫失败的重要原因。因此,为了提升CPV疫苗的保护效率,建议使用CPV流行毒株研发CPV疫苗。

一例比格犬肺炎克雷伯氏菌病的诊断及防控

为了诊断青岛博隆实验动物养殖基地比格犬病死原因并制定有效防控措施,试验通过临床观察和病理解剖对病犬进行初步诊断;无菌采集病死幼犬肺组织,采用特异性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)诊断三种常见犬呼吸道病毒,通过细菌形态学观察、生化试验、基因测序鉴定分离病原菌,并通过小鼠致病性试验和药敏试验分析其致病性和优化用药方案。结果表明:犬发病时主要表现为咳嗽、流鼻涕、食欲不振和轻度腹泻等症状。剖检可见胸腔积液,肺叶淤血和坏死。PCR鉴定犬腺病毒2型(canineadenovirus type 2,CAV 2)、H3N2亚型犬流感病毒(H3N2 subtype canine influenza virus,CIV)和犬副流感病毒(canine parainfluenza virus,CPIV)均为阴性。细菌分离培养显示为该菌革兰氏阴性的粗短杆菌;生化试验和16S rDNA测序鉴定该菌为肺炎克雷伯菌。回归试验结果表明该菌可引起小鼠肺炎症状,具有较强致病力。药敏试验结果显示分离菌株对阿奇霉素、环丙沙星、恩诺沙星敏感,对氨苄西林、头孢他啶、庆大霉素、头孢噻肟、头孢替安、头孢曲松耐药。经犬舍消毒和药物治疗后,该犬养殖场的病情得到有效控制。

鸵鸟新城疫病毒分子流行病学研究

应用RT-PCR、基因序列测定和分析以及鸡胚平均死亡时间(MDT)等方法,对1997～2000年间从中国北方分离的10株鸵鸟源新城疫病毒进行了F-糖蛋白基因序列测定、系统进化分析、基因分型和毒力测定。结果显示：10株鸵鸟源新城疫病毒分属Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ四个基因型。除1株为中发型毒株,其他均为速发型毒株；分析表明,引起鸵鸟发病的新城疫毒株有多种不同的来源。

鸵鸟新城疫的临床诊断病毒分离和鉴定

鸵鸟新城疫的临床诊断病毒分离和鉴定＊尹燕博蔡丽娟孙淑芳李葳徐瑞（农业部动物检疫所，青岛２６６０３２）１９９７年春季，数个鸵鸟场发生严重传染病，从２～３月龄的小鸟到３～４岁的成年鸟均有发病，但小鸟的发病率高，有的鸵鸟场２～３月龄小鸟发病率达５０％，而成...

RT-PCR和RFLP对我国部分传染性支气管炎病毒分离株分型

用2 对引物分别对4 株传染性支气管炎病毒(IBV)标准毒株(Gray、M41、H120、MA5)和5 株国内地方分离株(KF8、18KF7、QF3、XF7、XF18)进行RT-PCR,结果均获得了与预期大小一致的片段。对此2 种PCR 产物进行了限制性片段长度多态性(RFLP)分析,分别用3 种限制性内切酶(HaeⅢ、HinfⅠ、PvuⅡ)进行酶切,根据不同的酶切图谱将测试的IBV 毒株分为不同的基因型。2 对引物的PCR 产物酶切分型结果基本一致。9 株IBV 毒株分为3 种基因型,即H120、M41、XF7、XF18、MA5 和KF8 属于Ⅰ型,Gray 属于Ⅱ型,QF3、18KF7

鸵鸟新城疫实验病理学研究

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。

绿脓杆菌引起狐狸流产的临床病原学和病理学诊断

绿脓杆菌引起狐狸流产的临床病原学和病理学诊断尹燕博徐瑞李葳孙淑芳蔡丽娟（农业部动物检疫所青岛２６６０３２近两年来，山东半岛地区某乡镇狐狸养殖场每逢春季约有一半以上的母狐狸发生空怀、死胎和流产。一般在配种后２０天左右表现精神沉郁、食欲减少、尿白（个别有...

猪链球菌病病原和病理学诊断

对两个邻近的规模化养猪场发生的猪链球菌病进行了病原和病理学诊断。病猪主要表现为关节和皮下脓肿，融合性、小叶性肺炎，纤维素性心外膜炎和心包炎。两株分离物ＬＫ—１株和ＬＫ—２株经生化特性检查符合致病性链球菌的基本特征，经综合防制特别是猪链球菌蜂胶灭活疫苗的应用。

鸵鸟主要血液生化指标的测定

本文测定了 5、1 2、3 0、4 8月龄鸵鸟血清主要生化指标。月龄对各生化指标值的影响结果显示 :Ca2 +、Mg2 +、Cl- 、K+等随月龄的增长而升高 ;P(无机磷 )除 5月龄时较高 ;Na+及渗透压随月龄波动变化 ;CO2 浓度、阴离子间隙测值 :AST ALT以及胆固醇在各月龄之间无显著差异 ,其它指标在两个月龄段之间存在着显著差异。各生化指标测值在性别上的差异显示 :Ca2 +、K+离子浓度及阴离子间隙在三个月龄段内两性之间均呈显著差异 :Na+、Cl- 及渗透压在 1 2、4 8月龄 ,P在 3 0、4 8月龄 ,CO2 在 3 0月龄 ,Mg2 +在 1 2月龄两性之间血清浓度值差异显著 ;各月龄ALB :GLO ,LDH浓度两性差异显著 ,而D .Bi,ALT ,AST :ALT以及CK浓度在各月龄段两性之间均无显著差异 。

RT-PCR一步法检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

根据已发表的ＩＢＶＳ基因核苷酸序列，自行设计合成了一对跨幅约０．９ｋｂ的引物。该区段包括了Ｓ１基因Ｃ末端的４００ｂｐ和Ｓ２基因Ｎ末端的５００ｂｐ。用该引物对５株ＩＢＶ参考毒株Ｇｒａｙ、Ｍ４１、Ｈ１２０、Ｈ５２和ＭＡ５进行ＲＴ－ＰＣＲ一步法扩增均获得预期的ＰＣＲ产物，该引物的ＲＴ－ＰＣＲ灵敏度检测结果表明，可以检测出０．１１２ｐｇ／μＬ的模板。用该引物对３０个地方分离株进行检测，１８株呈阳性，与鸡胚传代及电镜观察结果一致。

我国Ⅰ群禽腺病毒主要流行血清型及其防控

对2007~2017年从我国主要养殖区临床病料中分离的86株禽腺病毒(FAd V)血清型鉴定结果表明,我国流行的主要血清型为FAd V-11、FAd V-4、FAd V-8b和FAd V-8a,常与鸡传染性贫血病病毒混合感染。蛋鸡流行的FAd V血清型主要为FAd V-4(88.9%),肉鸡主要为FAd V-11(47.6%),而危害最大的是FAd V-4引起的心包积水-肝炎综合征。在鸡LMH细胞上进行的交叉中和试验结果表明,FAd V-4的高免阳性血清可中和其自身和FAd V-11,但不能中和FAd V-8a、FAd V-8b。提示,有必要研制FAd V-4、FAd V-8a和FAd V-8b三价灭活疫苗和FAd V亚单位通用疫苗。

鸵鸟精子的超微结构

为了丰富鸵鸟精子的形态资料和为提高鸵鸟的人工授精技术提供参考,采用透射电镜和扫描电镜对鸵鸟精子的超微结构进行观察,并且与其它非雀形目鸟类以及哺乳动物的精子结构进行了比较。结果表明,鸵鸟精子呈细长的圆柱状,分为头部、颈段、中段、尾段、末段,其结构与美洲鸵和Tinamou精子相似。鸵鸟精子头部由顶体和精子核组成,精子核中有一条顶体刺。鸵鸟精子没有明显的颈部。中段的外周环绕着线粒体鞘。主段的中央为轴丝,轴丝外周有纤维鞘。鸵鸟精子的超微结构与美洲鸵和tinamou相似,但是与其它非雀形目的鸟类和哺乳动物的精子有很大的区别。

从第十一届世界禽病国际会议看禽病研究发展方向

第十一届世界禽病国际会议已开过一年多了，这次会议所展现的禽病研究发展方向，对我国的禽病研究工作具有重要的意义。１禽病诊断和疫苗研制已进入分子生物学时代以单克隆抗体、聚合酶链反应（ＰＣＲ）、限制性酶切片段分析（ＲＦＡ）以及基因表达为代表的分子生物学技术...

兽医病理教学的方法与思考

病理乃医学之本,同样,兽医病理学也是兽医各临床学科之本。纵观兽医学科本科教学的所有专业课程,没有其他课程象兽医病理学这样,几乎将跟专业相关的所有课程贯穿在一起,将学生的专业知识,从基础课程中对动物机体正常状态的了解,引向对动物机体疾病状态的认识。兽医专业学生的培养方向,说到底,是让学生掌握认识疾病、处理疾病的能力,而学生对动物疾病的认识,是从学习病理课程才正式开始的。

我国H_9N_2亚型禽流感流行现状分析

自从1994年在我国首次分离到 H9N2亚型禽流感病毒以来，该病已经在我国广泛流行，可以说我国凡是有鸡的地方，就有 H 9N 2亚型禽流感流行。除此之外，又有不断从猪、鸵鸟、鸭、鹅等动物分离到H 9N 2病毒的报道。