人肾小球系膜细胞原代培养方法的改进

背景:肾小球系膜细胞原代培养成功率低,生存时间短,传代次数少。其中分离提取肾小球一直是培养高纯肾小球系膜细胞的最大瓶颈。目的:建立一种操作简单、成功率高、重复性好的人肾小球系膜细胞原代培养方法。方法:取自愿水囊引产的胎儿肾,采用肾皮质组织块法合优生选择法培养人肾小球系膜细胞。相差显微镜、透射电镜观察系膜细胞形态,免疫荧光技术鉴定细胞表型,激光共聚焦显微镜观察波形蛋白的表达。结果与结论:培养的肾小球系膜细胞呈梭形/不规则星形和细长形,胞质中各种细胞器丰富,细胞突起明显,胞膜上有很多微绒毛,细胞表达α-肌动蛋白、肌球蛋白、波形蛋白、结蛋白,而不表达细胞角蛋白、Ⅷ因子,激光共聚焦显微镜下发现系膜细胞波形蛋白表达阳性并具有特征性纤维束。说明培养的系膜细胞符合肾小球系膜细胞的生物学特征。肾皮质组织块法合优生选择法是一种简单、高效的培养人肾小球系膜细胞的方法。

慢性肾衰竭血液透析患者的中医证候学临床研究

目的:研究慢性肾衰竭血液透析患者的中医证候及其发病规律。方法:对115例维持性血液透析患者进行中医证候及其发病规律进行总结。结果:维持性血液透析患者以肺脾气虚、气阴两虚证型最常见,兼证中早期以寒湿中阻与湿热内阻多见,随着透析时间的延长血燥生风的发病频次逐渐提高。结论:肺脾气虚、气阴两虚仍是透析患者的常见证候,但是随着透析时间的延长兼证血燥生风的发病频次明显提高。

高糖对原代培养人系膜细胞表达FN与IL-6的影响

目的:了解高糖对原代培养的人肾小球系膜细胞表达FN、IL-6的影响,并进一步探讨糖尿病肾病的发病机制。方法:取自愿水囊引产的胎儿肾,解剖取肾皮质剪碎,应用肾皮质组织块法合优生选择法培养人肾小球系膜细胞。ELISA方法检测FN、IL-6的表达。结果:与正常组相比较,高糖组FN、IL-6在24 h、48 h、72 h均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:高糖能够升高系膜细胞FN、IL-6分泌,这可能与肾小球系膜细胞细胞外基质积聚和糖尿病肾病发病密切相关。

高糖对原代培养人肾小球系膜细胞表达MMP-9、TIMP-1的影响

目的了解高糖对原代培养的人肾小球系膜细胞表达MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1的影响,进一步探讨糖尿病肾病的发病机制。方法取自愿水囊引产的胎儿肾,解剖取肾皮质剪碎,应用肾皮质组织块法合优生选择法对人肾小球系膜细胞进行原代培养。ELISA方法检测MMP-9、TIMP-1的表达变化。结果与正常组相比较,高糖组MMP-9在24h、48h、72h均显著降低(P<0.01),TIMP-1在24h、72h可显著升高(P<0.05),48h表达降低;MMP-9/TIMP-1的比值在24h、48h、72h均显著降低(P<0.01)。结论高糖能够降低MMP-9/TIMP-1,与肾小球系膜细胞细胞外基质降解能力降低密切相关。

高糖对原代培养人系膜细胞表达TGF-β1的影响

目的了解高糖对原代培养的人肾小球系膜细胞表达TGF-β1的影响,并进一步探讨糖尿病肾病的发病机制。方法取自愿水囊引产的胎儿肾并解剖取肾皮质剪碎,应用肾皮质组织块法合优生选择法培养人肾小球系膜细胞。以ELISA方法检测TGF-β1的表达。结果与正常组相比较,高糖组TGF-β1在24、48、72h均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论高糖能够升高系膜细胞TGF-β1分泌,这可能与肾小球系膜细胞细胞外基质积聚和糖尿病肾病发病密切相关。

藻黄合剂防治糖尿病肾病的基础研究

目的:研究藻黄合剂防治糖尿病肾病的作用机制。方法:体外培养人肾小球系膜细胞并在高糖培养基中孵育,用不同浓度的藻黄合剂培养液孵育高糖环境下培养的GMC,于不同时间(24h、48h)采用MTS方法检测各组系膜细胞增殖的变化。分别观察24h、48h系膜细胞增殖和FN的分泌。结果:不同浓度的ZHM作用于GMC 24h、48h,除低剂量组24h无显著作用外(P>0.05),其余各组均能显著抑制GMC的增殖(P<0.01或P<0.05)。藻黄合剂各剂量组在24h、48h时均能显著抑制高糖下FN的分泌(P<0.01或P<0.05)。结论:ZHM在一定时间内可明显抑制体外培养的GMC在高糖环境下的增殖,同时抑制FN的分泌,这可能是藻黄合剂延缓糖尿病肾病、保护肾功能的作用机制之一。

藻黄合剂含药血清体外培养人肾小球系膜细胞结缔组织生长因子的表达

背景:结缔组织生长因子是转化生长因子β1的下游效应因子,其异常表达在肾小球硬化及纤维化发生、发展中起重要作用。目的:观察藻黄合剂含药血清对肾小球系膜细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法:血清药理学方法制备藻黄合剂低、中、高剂量,空白对照及海昆肾喜阳性对照大鼠含药血清,分别用体积分数10%各含药血清培养基孵育高糖作用下肾小球系膜细胞48h,另设低糖组为对照。免疫细胞化学和RT-PCR方法检测各组系膜细胞结缔组织生长因子蛋白及mRNA的表达。结果与结论:结缔组织生长因子蛋白及mRNA表达在高糖组较低糖组明显升高(P<0.01);藻黄合剂各剂量组结缔组织生长因子蛋白及mRNA表达均低于高糖组,且具有剂量依赖性;藻黄合剂高剂量组与海昆肾喜组比较结缔组织生长因子蛋白及mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05)。提示高糖可诱导肾小球系膜细胞中结缔组织生长因子的表达,而藻黄合剂可抑制高糖条件下肾小球系膜细胞中结缔组织生长因子蛋白及mRNA的表达。

烟台开发区农民高血压发病特点及肾损害分析

目的:调查烟台开发区城镇化农民高血压及高尿酸、高三酰甘油发病情况,为该地区居民有效预防、控制高血压提供科学依据。方法:根据本次流行病学调查资料,对693名居民饮食情况、生活习惯和健康指标进行统计分析,计算高血压、高尿酸、高三酰甘油发病情况及肾损害等合并因素。结果:高血压患病率为30.23%,高尿酸患病率10.39%,高三酰甘油患病率28.35%,高血压患者合并以上情况者比例明显升高,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:这一特定区域生活条件、生活方式等较传统农村有改变,高血压发病率较高,控制率低,且高血压患者有较高的高尿酸、高三酰甘油及肾损害患病率,应采取预防控制措施。

烟台开发区城镇化农民高尿酸血症发病及相关因素分析

目的通过问卷调查和健康体检,探讨烟台开发区城镇化农民高尿酸血症发病情况及相关影响因素。方法根据本次流行病学调查资料,对693名城镇化农民饮食情况、生活习惯和健康指标进行统计分析,计算高尿酸血症患病率,采用logistic回归分析,探讨高尿酸血症的影响因素。结果高尿酸血症患病率为10.39%,男女性发病率比较有显著性差异(P<0.05)。多因素logistic回归分析发现,家庭人口数、高血压和饮酒是高尿酸血症的危险因素,适当体育活动是保护因素。结论这一特定区域男女性高尿酸血症患病率比较有明显差异(P<0.05),且高尿酸血症患者有较高的高血压、高甘油三酯患病率,应针对相关影响因素采取预防控制措施。

参松养心胶囊治疗维持性血液透析患者心律失常的临床研究

近年来，随着医学科学技术的提高，血液净化技术得到进一步普及，越来越多的慢性肾脏病患者需要依靠血液透析维持生命，而在维持性血液透析患者的心血管病死亡原因中，心律失常占血液透析患者心源性死亡原因的64％。因此，如何积极有效预防并治疗透析患者心律失常，对进一步提高尿毒症透析患者的生活质量和存活率具有重要意义。

雷公藤多苷联合达格列净治疗糖尿病肾病的疗效分析

目的探讨雷公藤多苷联合达格列净治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法将2020年1月—2021年6月本院确诊的2型糖尿病肾病患者120例,按照随机数表法分为对照组及观察组,每组患者60例。两组均进行常规治疗,在此基础上对照组给予达格列净治疗,观察组给予雷公藤多苷联合达格列净治疗。比较两组的临床治疗效果,包括治疗前后的肾功能指标、代谢指标,同时记录治疗过程中出现的不良反应。结果治疗效果方面,观察组的血肌酐、24 h尿蛋白定量均较对照组下降,血白蛋白较对照组升高,肾功能指标差异具有统计学意义(P<0.05);两组的空腹血糖、糖化血红蛋白、血尿酸水平均较治疗前明显下降,但组间无统计学差异(P>0.05)。不良反应方面,观察组和对照组治疗后低血糖、肝功损害等相关不良反应发生率分别为8.33%和6.67%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在糖尿病肾病的治疗中,雷公藤多苷联合达格列净可有效降低患者血肌酐和尿蛋白水平,升高人血白蛋白,进而改善患者的肾脏预后,同时不良反应无明显增加,整体临床效果较理想。

痈疽疮疡病人饮食禁忌刍议

疾病的治疗效果,除取决于用药得当与否外,也受病人饮食的影响。中医认为食物对人体不仅具有调养作用,而且是恢复健康的一个重要手段。《素问·藏气法时论》:“肝色青,宜食甘,粳米、牛肉、枣、葵皆甘……毒药攻邪,五谷为养,五果为助,五畜为益,五菜为充。气味合而服元,以补精益气。此五者,有辛、酸、甘、苦、咸,各有所利,或散、或收、或缓、或急、或坚、或软,四时五脏,病随五味所宜也。“

甘露醇治疗脑血栓形成早期40例疗效观察

脑血栓形成以往多用低分子右旋糖酐、维脑路通等药治疗,效果不理想。近来我们以甘露醇为主治疗脑血栓形成早期,疗效满意。现报告如下:

藻黄合剂对高糖环境人肾小球系膜细胞分泌MMP-9及TIMP-1的影响

目的:研究藻黄合剂对体外培养人肾小球系膜细胞(GMC)在高糖下分泌MMP-9、TIMP-1的影响。方法:体外培养人肾小球系膜细胞并在高糖培养基中孵育,用含有不同浓度的藻黄合剂培养液进行干预,分别观察24、48h系膜细胞MMP-9和TIMP-1的分泌。结果:藻黄合剂各剂量组在24、48h均显著升高髙糖下MMP-9的分泌(P<0.01);同时降低TIMP-1在48h的分泌(P<0.05,P<0.01)。结论:藻黄合剂可以升高高糖下系膜细胞MMP-9分泌,降低TIMP-1的分泌,这可能是藻黄合剂降解细胞外基质、防治糖尿病肾病的作用机制之一。