高效液相非接触电导法测定盐酸二甲双胍

目的建立高效液相非接触电导检测法测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍含量的新方法 。方法 色谱系统采用Ucleosil C18柱（4.6×250 mm）;流动相：磷酸二氢铵溶液（称取磷酸二氢铵17 g,加水1000 ml溶解,用磷酸调节p H至3.0）;流速：1.0 ml/min;进样量：10μl;柱温：35℃。用非接触电导检测器对盐酸二甲双胍进行检测。结果 盐酸二甲双胍进样量在0.10-1.04μg范围内与峰面积响应值呈良好线性关系（r=0.9960）,平均回收率（n=9）为101.0%;RSD为0.26%（n=6）。结论 该方法简便、灵敏、重复性好,适用于盐酸二甲双胍的含量测定,结果满意。

抗生素类注射剂的不溶性微粒质量考察

目的考察国内生产的抗生素类注射用无菌粉末和小容量注射液中不溶性微粒的质量。方法用GW J-4型智能微粒检测仪按《中国药典》光阻法进行测定。结果293批次样品仅有1批不溶性微粒检查结果不符合2005年版《中国药典》规定。结论国产抗生素类注射用无菌粉末和小容量注射液不溶性微粒检查结果令人满意。

食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素及耐药性分析

目的:对92株食源性金黄色葡萄球菌分离株进行肠毒素及耐药性检测,以了解其致病性和耐药性。方法:采用酶联免疫吸附试验测定食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素携带情况,利用VITEK®2 Compact全自动微生物分析系统对菌株进行药敏试验,采用聚合酶链式反应对菌株mecA耐药基因进行检测。结果:92株食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素检出率为5.43%(5株),对青霉素、四环素、红霉素、克林霉素4种抗生素的耐药率较高,分别为100%、30.43%、19.57%、14.13%,检出3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结论:食源性金黄色葡萄球菌分离株产生的肠毒素不容忽视,多重耐药及MRSA的检出提示耐药形势比较严峻,加强对食源性金黄色葡萄球菌致病性和耐药性的监测,对降低食品安全风险有重要意义。

水产品中广州管圆线虫微滴数字聚合酶链反应定量检测方法的建立

目的建立微滴数字聚合酶链反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)快速、准确定量检测水产品中广州管圆线虫的分析方法。方法选择广州管圆线虫ITS2基因序列作为靶标序列,自主设计特异性引物和探针,建立广州管圆线虫ddPCR定量检测方法,通过对ddPCR反应条件的优化,确立了ddPCR最佳反应条件,从稳定性、特异性、定量限范围、定量检测低限和人工污染样品等方法,综合评价建立的广州管圆线虫ddPCR定量检测方法的效果。结果广州管圆线虫DNA质量浓度在0.320~1000.000 pg/μL的范围内,基因拷贝数与DNA浓度呈良好的线性关系,相关系数r2=1,定量检测低限为0.297拷贝/μL,人工污染样品中3次重复实验分别检出4370、4210、4310拷贝/μL。结论本研究建立的广州管圆线虫ddPCR定量检测方法特异性强、灵敏度高、稳定性好、定量范围广,为水产品中广州管圆线虫的定量检测提供新的检测手段。

鼠李糖乳杆菌工作菌株保存时间对微生物法检测食品中叶酸含量的影响

目的:明确鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)工作菌株斜面在2~8℃冰箱中的保存时间对叶酸检测的准确性和稳定性影响,获得允许保存时间,缩短实验周期,提高检验效率。方法:选择不同保存时间下(1、8、13 d)工作菌株,按照GB 5009.211-2014标准方法,接种至叶酸检测标准系列管中,并分别培养24 h和40 h,测定吸光度值,分析菌种生长曲线,得出工作菌株允许保存时间。结果:保存1 d和8 d的工作菌株培养24 h及40 h后均生长良好,曲线最大浓度OD值达到1.2以上,标准曲线的线性关系良好(R^2均> 0.99)。结论:工作菌株以琼脂斜面2~8℃冰箱中保存8 d内可直接制备接种液,无需再传种活化,解决实验前准备时间长的问题,提高了检验效率和稳定性。

基于HACCP和6S管理方法的食品检验检测机构质量控制研究

危害分析与关键控制点(hazard analysis critical control point,HACCP)体系、6S[包括整理(seiri)、整顿(seiton)、清洁(seiketsu)、清扫(seiso)、安全(safety)、素养(shitsuke)]现场精益管理是被生产企业广泛实践应用且证明行之有效的质量管理方法。本文从体系结构、管理思路、模块接口等方面分析了HACCP在食品检验检测机构应用的可行性,建立了一种基于HACCP和6S的食品检验检测机构质量控制方法,阐述了HACCP与6S现场精益管理结合的检验检测质量管理工作思路与方法,并以GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》MPN计数法为例,分析了该方法在食品检验检测机构质量控制中的应用。

食品分析能力评估计划能力验证样品中大肠埃希氏菌O157:H7的分离鉴定及质量控制

目的从食品分析能力评估计划能力验证样品沙拉中分离、鉴定大肠埃希氏菌O157:H7,判断2份样品是否有检出。方法参照GB 4789.36-2016《食品安全国家标准食品微生物学大肠埃希氏菌O157:H7/NM》进行检测,将VITEK 2 compact生化结果符合的菌株进行O157和H7抗原血清学鉴定。结果样品编号M221d11B检出大肠埃希氏菌O157:H7,样品编号M221d11A未检出大肠埃希氏菌O157:H7。测试样品的背景干扰菌是成团泛菌和铜绿假单胞菌。结论取得满意的能力验证结果需要注意以下因素:培养基试剂的质量、样品之间的交叉污染、样品的正确复苏和制备、菌落特征的识别以及干扰菌株的排查等。

食醋浑浊现象的微生物因素分析与探讨

目的对明显有浑浊现象的食醋样品进行分析,了解和探讨浑浊是否由微生物因素引起。方法以浑浊食醋、醋醅为测试样本,采用感官评定、微生物培养、显微镜检、加热灭菌实验等手段对食醋浑浊的原因进行分析,并对醋醅分离出来的微生物采用全自动微生物生化鉴定仪进行鉴定。结果采用平板计数法和薄膜过滤法培养浑浊食醋,样本均未检出,醋醅样本有检出。染色结果显示浑浊食醋样本A中发现有未知革兰氏阴性菌和酵母菌,并无明显增殖现象;样本B中未检出微生物;醋醅样本检出酵母菌和未知革兰氏阴性菌。晶形镜检和加热灭菌试验表明,浑浊成分有糊精和蛋白质。结论食醋样本浑浊现象产生原因不是由可培养微生物引起,可能是非可培养微生物或者是非生物因素引起。

生鲜肉制品沙门氏菌分离鉴定过程中的干扰菌分析

目的对不同种类的生鲜肉制品进行沙门氏菌检验,了解沙门氏菌分离鉴定过程中出现的干扰菌种类和特性。方法对25份生鲜肉制品进行沙门氏菌的分离鉴定,通过生化试验和全自动微生物鉴定分析系统对出现的可疑菌进行鉴定。结果在分离鉴定过程中,干扰菌同沙门氏菌初步生化试验结果相似,可疑率为79.5%;鉴定出的干扰菌有奇异变形杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、拉氏普罗威登斯菌、温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌、海藻希瓦菌。结论沙门氏菌分离鉴定过程中存在大量无法通过初步生化排除的干扰菌,可结合ONPG试验及O多价血清试验进行排除;鉴定出的干扰菌均为条件致病菌,需引起重视,开展其致病性研究。

环介导等温扩增技术快速检测植物蛋白饮料中大豆成分

目的建立环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测植物蛋白饮料中大豆成分的技术方法。方法根据大豆Lectin基因保守序列,设计大豆成分环介导等温扩增检测特异性引物和反应体系,对方法特异性、灵敏度和稳定性进行测试,并以实时荧光聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)方法为参比方法,对32种植物蛋白饮料进行检测应用验证。结果本研究建立的LAMP方法特异性强,32种植物成分中除了大豆外,其他均未发生扩增,稳定性好,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为6.05%,最低检出限为0.1%(以质量分数计)。通过参比方法验证,方法特异性和灵敏度为100%,不存在假阳性和假阴性。结论本研究建立的LAMP技术快速检测植物蛋白饮料大豆成分的方法具有操作简单、快速准确、检测成本低等优点,可为植物蛋白饮料大豆成分掺杂掺假提供一种快速检测方法。

椰毒假单胞菌酵米面亚种检测方法研究进展

近年来,由椰毒假单胞菌酵米面亚种引起的食物中毒事件常有发生,其毒素米酵菌酸的致病性极强,死亡率高,引起人们的高度关注。本文主要从国标法中的微生物培养技术、基因测序技术、PCR技术(包含常规PCR和实时荧光PCR技术)、环介导等温扩增技术及微滴数字PCR技术等方面总结椰毒假单胞菌酵米面亚种的检测方法,并对该菌未来的研究方向进行展望。

微生物法测定婴幼儿乳粉叶酸含量的不确定度评估

根据GB 5009.211—2014《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》的要求对婴幼儿乳粉中叶酸含量进行测定,依据CNAS-CL01-G003:2018、JJF1059.1—2012和GB/Z 22553—2010对影响检验结果的因素进行评估、分析。结果表明,婴幼儿乳粉样本中叶酸含量为(138.7±19.0) μg/100 g(P=95%,k=2)。经评估得到叶酸的不确定度主要受标准曲线拟合及标准物质称量和稀释的影响。因此,对于非生物影响可定期校准仪器设备,对于生物因素影响,则需建立详细的标准化操作流程,保证试验条件的一致性。

实时荧光PCR检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的结果分析与探讨

目的:对实时荧光PCR检测单核细胞增生李斯特氏菌假阳性结果的原因分析探讨。方法:对假阳性的样本进行传统培养法鉴定分析,将鉴定的菌落进行实时荧光PCR检测,同时对样本基质的影响和培养基本底的影响进行实时荧光PCR检测。结果:样本中的可疑菌落、样本的基质、培养基本底对实时荧光PCR检测结果均无假阳性影响。结论:实时荧光PCR检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的假阳性主要原因可能是样本中存在死亡目的菌基因造成的干扰。

婴幼儿乳粉叶酸含量两种测定方法的研究

目的:对比婴幼儿乳粉中叶酸含量检测的两种方法,探究其准确性及更方便快捷的检测流程。方法:分别采用GB5009.211-2014与试剂盒法测定乳粉质控样品及市售的30批次婴幼儿乳粉样品中叶酸含量。结果:国标法和试剂盒法对质控乳粉样品中叶酸含量的测定值分别为147.6±5.8μg/100g、146.4±2.9μg/100g,RSD分别为3.93%和1.98%;两种方法的回收率分别为110.38%±3.39%、98.03±8.62%。对使用国标法和试剂盒法测定30批次婴幼儿乳粉样品叶酸含量的两组数据进行配对t检验,t=1.881,P=0.070,P>0.05说明两组检测结果无显著性差异。结论:国标法及试剂盒法均能对婴幼儿乳粉中叶酸含量进行有效测定且结果接近,均可作为检验方法及质控方式用于实际检验工作当中。

能力验证乳粉样品中双歧杆菌计数培养基的选择探究

目的:探讨能力验证中双歧杆菌计数培养基的选择及注意事项。方法:依据《食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验》(GB 4789.34—2016)和乳粉中乳酸菌检验能力验证[ACAS-PT926(2020)]参试指导书的要求,通过采用人员比对及不同培养基(MRS培养基、双歧杆菌培养基),比较分析双歧杆菌计数结果的差异性。结果:相同培养条件下,同一样品使用MRS培养基和双歧杆菌培养基,结果的再现性均较低,两种培养基的稳定性较好。同一样品在双歧杆菌培养基中的菌落计数均比MRS培养基高,但两者的再现性(r=0.17,r=0.21)均小于再现性限(r=0.45),表明两者的差异是可以接受的。结论:MRS培养基和双歧杆菌培养基均可作为双歧杆菌计数培养基,两者的稳定性均较好。在日常样品检验过程中,为了提高工作效率,可选用更为便捷的MRS培养基,若要尽可能多地计算样品中双歧杆菌含量,可选用BBL培养基进行培养计数。

高效液相非接触电导法测定阿咖酚散3种有效成分的含量

目的建立高效液相非接触电导检测法快速测定阿咖酚散中3种有效成分含量的新方法。方法色谱系统采用ODS反相柱,流动相：甲醇-水-乙酸（35∶60∶5）,流速：1.0 mL/min,柱温：35℃,进样量：10μL,用非接触电导检测器对阿司匹林、对乙酰氨基酚、咖啡因进行分离和检测。结果阿司匹林线性范围为36.00-359.96μg/mL（r=0.9866）,平均回收率（n=9）为99.6%;对乙酰氨基酚线性范围为19.97-199.32μg/mL（r=0.9863）,平均回收率（n=9）为100.5%;咖啡因线性范围为4.9-49.04μg/mL（r=0.9680）,平均回收率（n=9）为100.1%。结论方法简便、灵敏、重复性好,适用于阿咖酚散中3种有效成分的含量测定,结果满意。

三重微滴数字PCR定量检测即食米粉中致病菌方法研究

目的建立三重微滴数字PCR(ddPCR)方法同时定量检测即食食品中的沙门菌、蜡样芽胞杆菌和单核细胞增生李斯特菌。方法选择以沙门菌ttrA/ttrC、蜡样芽胞杆菌essC、单核细胞增生李斯特菌侵袭相关内肽酶基因等3个单拷贝基因对应的3对引物探针,采用实时荧光定量PCR验证引物/探针特异性后,建立三重ddPCR方法同时定量检测3种致病菌的拷贝数。结果该方法的线性范围分别为:沙门菌25~22687 copies/20μL;蜡样芽胞杆菌19~15620 copies/20μL;单核细胞增生李斯特菌18~23373 copies/20μL,线性相关因子r^(2)≥0.999,6个浓度3次重复测定3种菌的相对标准偏差(RSD)≤12%,重复性好,对于上述菌株的最低检出限分别为6、3和7 copies/20μL;采用已建立的ddPCR方法和平板计数方法对模拟染菌米粉样品进行检测,两种方法测定值结果RSD小于9%,结果一致性较好。结论本研究建立的三重ddPCR同时定量检测即食食品中沙门菌、蜡样芽胞杆菌和单核细胞增生李斯特菌的方法与平板计数法相比,更快速、灵敏,结果准确。