桦褐孔菌多糖对抗结核化疗所致肝脏损伤的保护机制

目的:探究桦褐孔菌多糖对利福平和异烟脱导致的肝损伤的保护机制.方法:将100只小鼠随机分为对照组;研究组,研究组分为高剂量组,中剂量组和低剂量组;空白组,每组小鼠20只.除空白组小鼠外,每组小鼠每天灌服异烟脱及利福平,灌服2h后,研究组小鼠分别被灌服不同剂量的桦褐孔菌多糖,对照组小鼠灌服生理盐水,持续4 wk.4 wk后处死各组小鼠,分别测量各组小鼠血清转氨酶、胆红素、肝组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)含量,谷胱甘肽过氧化物酶活性(glutathione peroxidase,GPx)、肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance associated protein2,MRP2)、胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-GP)、Na^+-牛磺酸钠共转运体(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)、核因子相关因子2(nuclear factor related factor 2,NRF-2)、谷胱甘肽-S-转移酶Al(glutathione-S-transfer enzyme A1,GSTA1)mRNA含量,肝细胞线粒体8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHDG)含量和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS).对小鼠肝脏进行HE染色后,观察肝脏病理变化.结果:对照组小鼠血清转氨酶、胆红素、肝组织MDA、MRP2、BSEP、P-GP、NRF-2、GSTA1 mRNA、ROS、8-OHDG显著高于空白组小鼠(P<0.05),NTCP、SOD、GPx显著低于空白组小鼠(P<0.05).研究组小鼠血清转氨酶、胆红素,肝组织MDA、MRP2、BSEP、P-GP、NRF-2、GSTA1mRNA、ROS、8-OHDG显著低于对照组小鼠(P<0.05),NTCP、SOD、GPx显著高于对照组小鼠(P<0.05),且各剂量组间存在显著差异(P<0.05).病理切片提示对照组小鼠肝脏病理改变情况明显严重于空白组和各实验组小鼠.结论:桦褐孔菌多糖可以通过降低MRP2、BSEP、P-GP、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha)、NRF-2、GSTA1mRNA、ROS、8-OHDG,升高NTCP、SOD、GPx活性来保护由于抗结核化疗导致的肝损伤.

小檗碱对大鼠结肠上皮细胞钙依赖钾通道的影响

目的研究小檗碱对结肠上皮隐窝细胞基底膜钙依赖钾通道(IK(Ca))的影响,以探讨其治疗分泌性腹泻的机制。方法用EDTA溶液分离结肠上皮隐窝细胞,运用EPC10膜片钳放大器测量全细胞模式下50、100、500μmol/L的小檗碱对结肠上皮细胞基底膜IK(Ca)的影响。结果50、100、500μmol/L的小檗碱均可抑制大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜IK(Ca)(P<0.05),当阶跃刺激为+80 mV时,其IK(Ca)分别为生理盐水(PSS)对照组的(71.43±3.61)%、(54.56±5.13)%、(38.66±3.85)%(n=8,P<0.05)。结论小檗碱能抑制大鼠结肠上皮细胞基底膜钙依赖钾通道的开放,这可能是其治疗分泌性腹泻的机制之一。

黄连素对大鼠结肠隐窝细胞钾通道的影响

目的:探讨黄连素对结肠上皮隐窝细胞基底膜cAMP依赖的钾通道[IK(cAMP)]的影响,以研究其治疗分泌性腹泻的机制.方法:用EDTA溶液分离结肠上皮隐窝细胞,以-60mV为钳制电压钳制细胞,20mV为阶跃,用EPC10膜片钳放大器测量全细胞模式下50、100、500μmol/L的黄连素对结肠上皮细胞基底膜IK(cAMP)的影响.结果:50、100、500μmol/L的黄连素可显著抑制大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜IK(cAMP)(P<0.05),且抑制效应具有浓度依赖性.当阶跃刺激为+80mV时,其IK(cAMP)分别为生理盐水对照组的78.55%±5.72%,60.42%±6.33%,43.78%±6.47%(P<0.05).结论:黄连素能抑制大鼠结肠隐窝细胞基底膜cAMP依赖的钾通道开放,这可能是其治疗分泌性腹泻的机制之一.

miR-499通过Drp1介导线粒体自噬保护缺氧/复氧心肌细胞

目的探究miR-499对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用,并从线粒体自噬方面探究其可能机制。方法缺血/再灌注(I/R)诱导心肌细胞H9c2(2-1),建立缺氧/复氧(H/R)心肌细胞模型,使用miR-499 mimics和(或)P110处理细胞。将细胞分为BC组、I/R组、I/R+mi组、I/R+NC组、I/R+mi+P110组、I/R+NC+P110组。使用CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测ROS、线粒体膜电位和细胞凋亡,试剂盒检测MDA、SOD、ATP含量,qRT-PCR和Western blot检测线粒体融合、分裂、自噬相关基因Fis1、Mfn1、Parkin、LC3-Ⅱ、p62和Drp1的mRNA和蛋白表达水平,透射电镜观察线粒体自噬。结果miR-499 mimics和/或P110可使I/R诱导的心肌细胞增殖抑制率和凋亡率下降;线粒体膜电位下降、线粒体自噬减少、ATP含量上升;Fis1、Parkin、LC3-Ⅱ和Drp1的基因和蛋白表达水平下降,Mfn1和p62的基因和蛋白表达水平上升;细胞内ROS和MDA含量减少,SOD含量增加。结论miR-499可通过降低Drp1介导的线粒体自噬减少氧化应激的发生,从而保护I/R诱导的心肌细胞。

miR-499通过抑制calcineurin抑制缺血/再灌注心肌细胞的凋亡

目的 探讨miR-499对钙调磷酸酶(calcineurin,CaN)的调控作用以及在缺血/再灌注(ischemia/repefusion,I/R)损伤心肌细胞中的作用机制。方法 将大鼠心肌细胞H9c2分成6组:对照组、I/R组、I/R+mimics组(转染miR-499 mimics后构建I/R细胞模型)、I/R+NC组(转染miR-NC后构建I/R细胞模型)、I/R+mimics+CsA组(转染miR-499 mimics后加入CaN抑制剂CsA处理,最后构建I/R细胞模型)和I/R+NC+CsA组(转染miR-NC后加入CsA处理,最后构建I/R细胞模型)。CCK-8检测各组细胞增殖能力,Hochest33258染色观察各组细胞形态的变化,TUNEL检测各组细胞凋亡情况,qRT-PCR检测各组细胞中miR-499、CaN和凋亡相关(Bcl-2、Bax、Caspase-3)基因的表达,Western blot检测各组细胞中CaN和凋亡相关(Bcl-2、Bax、Caspase-3)蛋白的表达。结果 与对照组相比,I/R组细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞致密浓染,呈亮蓝色,凋亡细胞增多,细胞中miR-499、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),CaN、Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.01);与I/R+NC组相比,I/R+mimics组和I/R+NC+CsA组细胞增殖能力均显著升高(P<0.01),致密浓染的细胞核均有所减少,凋亡细胞减少,细胞中miR-499、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),CaN、Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);与I/R+NC+CsA组相比,I/R+mimics+CsA组上述作用更加显著。结论 miR-499能够抑制CaN的表达,抑制I/R损伤心肌细胞的凋亡,减轻心肌细胞损伤。

丹参川芎嗪注射液联合小牛血清去蛋白注射液治疗急性脑梗死临床观察

目的探讨丹参川芎嗪注射液联合小牛血清去蛋白注射液治疗急性脑梗死的临床疗效。方法急性脑梗死患者80例随机分为治疗组与对照组。对照组单用丹参川芎嗪注射液治疗;治疗组给予丹参川芎嗪注射液联合小牛血清去蛋白注射液治疗。比较两组患者治疗前后血液流变学的变化以及两组治疗的总有效率。结果治疗14 d后,两组的血液流变学各项指标及神经功能缺损评分均明显减低(P<0.05);治疗后,观察组各项指标均明显优于对照组(P<0.05)观察组总有效率为80.0%,明显高于对照组的67.5%(P<0.05)。结论丹参川芎嗪注射液联合小牛血清去蛋白注射液治疗急性脑梗死安全有效,能改善患者的预后。

音乐疗法对脑卒中患者认知和情绪的效果

目的探讨早期认知康复训练结合音乐疗法对脑卒中患者认知功能、日常生活活动能力和心理的影响。方法2016年3月至2017年9月收治的脑卒中患者56例,随机分为对照组(n=28)和观察组(n=28),对照组予运动训练和早期认知训练,观察组在此基础上接受音乐疗法,共4周。治疗前后采用简易精神状态检查(MMSE)、洛文斯顿作业疗法认知评定(LOTCA)、改良Barthel指数(MBI)、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)进行评定。结果治疗后,两组MMSE评分、LOTCA总分和项目评分,以及MBI评分均升高(t>5.480,P<0.05),SAS和SDS评分显著降低(t>10.227,P<0.001);与对照组比较,观察组治疗后MMSE和LOTCA评分总分以及MBI评分均明显提高(t>2.648,P<0.05),SDS评分下降(t=2.818,P<0.05)。结论结合音乐疗法能促进脑卒中患者认知功能和日常生活活动能力恢复,促进心理健康。

微RNA-27a介导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制

目的研究微RNA 27a(miR 27a)介导3T3 L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制。方法将3T3 L1细胞诱导分化为脂肪细胞,采用肿瘤坏死因子 α(TNF α)法建立3T3 L1脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,检测miR 27a对3T3 L1细胞葡萄糖摄取的影响,蛋白质印迹法(Western Blot)检测miR 27a对胰岛素信号通路的影响。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)及双荧光素酶报告基因检测法检测miR 27a的作用靶点。结果miR 27a介导了3T3 L1脂肪细胞的胰岛素抵抗[正常对照组,模型组,miR 27a mimics+模型组,miR 27a inhibitor+模型组四组的吸光度值分别为(2.03±0.20),(1.28±0.27),(1.43±0.20),(1.97±0.18),P<0.01],蛋白质印迹法显示miR 27a抑制了胰岛素信号通路中胰岛素受体底物1(IRS1)及Akt蛋白的磷酸化。qPCR显示miR 27a抑制了过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达[对照组和mir 27a组的相对值分别为(1.00±0.08)和(0.59±0.14),P=0.0048],双荧光素酶报告基因检测验证了PPARγ为miR 27a的作用靶点[PPARγWT+miR NC,PPARγWT+miR 27a,PPARγMut+miR NC,PPARγMut+miR 27a四组的相对荧光值分别为(5.37±0.80)、(3.17±0.57)、(4.94±0.63)、(4.68±0.74),P<0.01]。结论miR 27a通过抑制胰岛素信号通路及靶向PPARγ介导3T3 L1细胞胰岛素抵抗。

丹参多酚酸盐对刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察丹参多酚酸盐(Salvianolate,SVL)对刀豆蛋白A(Con A)诱导BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,观察丹参多酚酸盐对模型小鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α,肝组织匀浆SOD、MDA水平以及肝组织病理学改变的影响。结果:丹参多酚酸盐可显著降低小鼠血清中ALT和AST水平,减少炎症因子IL-6、TNF-α释放,同时能降低肝匀浆MDA含量,升高SOD活性,改善肝组织病理性损伤。结论:丹参多酚酸盐对刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤具有保护作用,其机制可能与减少炎症因子IL-6、TNF-α的释放有关。

电刺激小脑顶核对脑梗死大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43的影响

目的 观察电刺激小脑顶核（FNS）对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响.方法 选用随机数字表法将60只健康成年雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、FNS组及模型组,采用线栓法将FNS组及模型组大鼠制成左侧大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/R）模型.FNS组大鼠于制模3h后给予FNS治疗,模型组仅将针电极置于大鼠小脑顶核部位,但不给予电刺激.分别于制模1d、3d及7d时采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力,并于上述时间点采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脑梗死部位GAP-43 mRNA表达.结果 制模后1d、3d及7d时模型组与FNS组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期均较正常组及假手术组明显延长（均P＜0.05）;FNS组大鼠上述时间点逃避潜伏期[分别为（25.72±0.42）s,（24.27±0.55）s和（23.82±0.63）s]则较模型组显著缩短（均P＜0.05）.在制模后1d、3d及7d时正常组与假手术组大鼠脑组织中仅存在少量GAP-43 mRNA表达;模型组及FNS组GAP-43mRNA表达在上述时间点均较正常组及假手术组显著增多（均P＜0.05）;并且上述时间点FNS组GAP-43mRNA表达[分别为（1.54±0.34）,（2.03±0.56）和（2.78±0.81）]亦显著强于模型组（均P＜0.05）.结论 FNS干预有助于改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力,其治疗机制可能与上调脑梗死部位神经元GAP-43mRNA表达、从而促进脑梗死灶周围神经轴突再生及修复有关.

黄连素对大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜钾通道的影响

目的研究黄连素对结肠上皮隐窝细胞基底膜钙依赖钾通道[I_K(Ca)]和环磷酸腺苷(cAMP)依赖钾通道[I_K(cAMP)]的影响,探讨其治疗分泌性腹泻的机制。方法用乙二胺四乙酸(EDTA)溶液分离结肠上皮隐窝细胞,运用EPC 10膜片钳放大器测量全细胞模式下50、100、500μmol/L黄连素对结肠上皮细胞基底膜I_K(Ca)和I_K(cAMP)的影响,并设PSS对照组。结果50、100、500μmol/L黄连素可抑制大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜I_K(Ca)和I_K(cAMP)(P值均<0.05),当阶跃刺激为+80mV时,其I_K(Ca)分别为对照组的(71.43±3.61)%、(54.56±5.13)%、(38.66±3.85)%(P<0.05);其I_K(cAMP)分别为对照组的(78.55±5.72)%、(60.42±6.33)%、(43.78±6.47)%(P<0.05)。结论黄连素能抑制大鼠结肠上皮细胞基底膜I_K(Ca)和I_K(cAMP)的开放,这可能是其治疗分泌性腹泻的机制之一。

FOXO1基因多态性与2型糖尿病易感性的meta分析

目的综合评价叉头框蛋白1(forkhead box O1,FOXO1)基因多态性与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网全文数据库(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)、万方数据库以及维普数据库,收集FOXO1基因多态性与T2DM相关性的病例-对照研究。检索时间均从建库至2017-08月,按文献纳入和排除标准筛选相关文献,选取在2篇及以上文献中有共同研究的位点,应用RevMan 5.3.5软件进行Meta分析。结果最终纳入6篇病例-对照研究文献,其中英文文献4篇,中文文献2篇,纳入四个多态性位点:rs2297627,rs17592236,rs1078892,rs7324943。Meta分析结果显示:rs17592236与T2DM易感性无关,rs1078892与T2DM易感性负相关,rs2297627,rs7324943与T2DM易感性正相关。结论 rs1078892位点G等位基因可能对T2DM有保护作用,rs2297627位点C等位基因以及rs7324943位点T等位基因可能增加T2DM风险。