水浸束缚应激模型在小鼠结肠损伤研究中的探索与实践

目的探索不同造模时间对水浸束缚应激(water immersion restraint stress,WIRS)模型小鼠结肠损伤程度的影响,对比研究病理损伤程度和肠道菌群构成。方法本研究共用34只KM小鼠,首先将18只小鼠随机分为对照组和WIRS4 h、12 h、24 h、36 h、48 h组,造模结束后,通过HE染色观察不同造模时间的结肠损伤程度。评估出较优的造模时间后,将16只小鼠随机分为对照组和WIRS24 h组,使用ELISA法检测结肠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)含量,使用16S rRNA测序检测结肠内容物的菌群组成改变。结果WIRS各组结肠腔均出现不同程度弥漫性充血和泛红,HE染色显示WIRS小鼠出现炎症细胞浸润等病理改变。WIRS24 h组损伤较明显,与WIRS36 h、48 h组相比小鼠成活率高,TNF-α、IL-6、IFN-γ水平均显著升高(P<0.0001)。与对照组相比,WIRS24 h组小鼠结肠菌群失调,弯曲杆菌门、脱铁杆菌门丰度显著增加(P<0.01),而脱硫杆菌门、放线菌门丰度明显减少(P<0.05);幽门螺杆菌属、拟杆菌属、罗氏菌属、norank_f__Ruminococcaceae、unclassified_f__Oscillospiraceae等丰度显著升高(P<0.05或P<0.01);而norank_f__norank_o__Clostridia_UCG-014、脱硫弧菌属、内脏臭杆菌属等丰度显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论WIRS模型会导致小鼠结肠组织病理损伤,并且出现明显的肠道菌群组成改变。