NDV疫苗安全性的实验研究

随着分子生物学与免疫学等相关学科的发展和交叉渗透,肿瘤的生物治疗、基因治疗的研究更加深入、广泛;已从实验研究及基础研究过渡到临床试用阶段,尤其是病毒疫苗治疗肿瘤引起众多学者的重视。国内外已有比较成功的报道,采用牛痘病毒、流感病毒感染完整的瘤细胞或制成瘤细胞裂解物或直接瘤体内注射病毒来改变与增强瘤细胞的免疫原性。

NDV对小鼠H_(22)腹水瘤治疗作用的探讨

肿瘤逃避机体免疫排斥的机制之一,是肿瘤细胞存在的肿瘤相关抗原的免疫原性较弱,不足以引起宿主有效的抗肿瘤免疫反应。NDV可以改变或影响瘤细胞的免疫原性,诱发和促进机体对肿瘤的排斥反应。本文探讨了新城疫病毒(new castle disease virus,NDV)对小鼠H_(22)腹水瘤的治疗作用。对照组接种H_(22)瘤细胞后第8d死亡1只,至第16d10只小鼠全部死亡,存活率为0％,平均存活14.1d。实验组注射瘤细胞后第12d死亡2只,至23d死亡9只,1只无瘤存活,存活率为10％。死亡鼠平均存活天数为18d,比对照组延长3.9d,两组相差显著(P<0.05)。实验结果表明NDV对小鼠H_(22)腹水瘤有治疗作用,能抑制小鼠H_(22)腹水瘤的生长,可延长小鼠生存时间。NDV可作治疗肿瘤的一种新生物制剂。

胆道感染的细菌学调查

随着细菌学培养、分离及检测手段的不断提高,特别是厌氧菌细菌学在临床方面的发展,使胆道感染细菌学的研究更趋完善。在胆道感染中,细菌检出率极高,其早期检查感染灶对选用针对性抗菌药物尤为重要。现将我院1988年5月至1992年5月间124例胆道感染细菌学调查结果报告如下。

胆道细菌对抗菌药物敏感性试验结果分析

胆道疾病是危害人类健康的常见病、多发病,且与细菌感染的关系早已明确。研究胆道感染常见细菌对抗菌药物的敏感程度是临床筛选有效药物必不可少的方法。现将我们近年来从胆道感染病人的胆汁中分离出77株细菌对16种抗菌药物敏感性(简称药)试验结果分析如下。

NDV不同剂量与时间治疗小鼠腹水瘤的生存期结果比较

自从70年代初医学家将新城疫病毒（NDV）试用于治疗人类肿瘤以来,无论是动物实验,还是临床应用的研究报告,其抗肿瘤疗效肯定而正为国际医学界所重视。目前世界上一些国家对NDV的抗肿瘤作用进行了深入研究,体内外实验与临床试验显示出NDV治疗肿瘤的良好效果,将会带来极其光辉的应用前景。为了在临床上获得更好的疗效,我们将NDV不同剂量与时间治疗小鼠H22腹水瘤,对其生存期进行了观察比较,现将结果报告如下。

双岐杆菌对小鼠H_(22)腹水瘤治疗作用的探讨

目的 探讨双岐杆菌对小鼠H_(22)腹水瘤的治疗作用,以寻找治疗肿瘤新的生物制剂。方法 将H_(22)腹水瘤细胞接种小鼠腹腔后分成对照组、死菌组与活菌组,每组10只,分别用生理盐水、死菌与活菌治疗。结果 对照组平均存活14.5天,死菌组平均存活16.6天,生命延长率14,5％,活菌组平均存活20.8天,生命延长率43.4％,相差非常显著(P<0.01)。结论 双岐杆菌对小鼠H_(22)腹水瘤有治疗作用,可延长小鼠生存时间。

肝门阻断后细菌移位和门静脉血中内毒素变化的研究

目的 研究肝门部血流阻断后肠粘膜损害所致细菌移位及门静脉血中内毒素的变化。方法 采用兔动物模型,在无菌条件下机械性阻断肝十二指肠韧带,观察阻断后15,20,30min和60min时门静脉血中内毒素值和肠系膜淋巴结细菌培养阳性数。结果 实验组肝门阻断后门静脉血内毒素值和细菌培养阳性数明显高于对照组(P<0.01),且随阻断时间延长加重。结论 缺血、缺氧是肠粘膜屏障损害的直接原因,深入对肠粘膜屏障功能保护的研究将有利于指导临床工作。

MTT比色法中应采用分析纯二甲基亚砜作为甲溶解剂

噻唑蓝（ＭＴＴ）可被哺乳动物活细胞线粒体中的脱氢酶还原成蓝色甲颗粒（ｆｏｒｍａｚａｎ），且甲生成量与活细胞数量及细胞活化状态呈线性关系〔见：ＭｏｓｍａｎＴ．Ｒａｐｉｄｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃａｓａｙｆｏｒｃｅｌｕｌａｒｇｒｏｗｔｈａｎｄｓｕｒｖ...

反义寡核苷酸抑制survivin基因表达及肝癌细胞生长的研究

目的:采用反义寡核苷酸抑制肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其对肝癌细胞生长的作用。方法:采用脂质 体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,Western blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表 达,流式细胞仪检测凋亡细胞比率,检测转染前后细胞贴壁率变化,并绘制细胞生长曲线。结果:survivin反义寡核苷酸转染 后,肝癌细胞survivin蛋白及mRNA表达均显著降低,细胞贴壁率显著降低,细胞增殖活性明显受抑,细胞凋亡率显著增加。 结论:survivin反义寡核苷酸转染可以有效降低细胞内survivin基因的表达,诱导细胞发生凋亡,抑制肝癌细胞生长。

survivin蛋白在人肝癌组织中的表达及其与细胞增殖及预后的关系

目的 研究肝癌组织中survivin蛋白的表达及其与肝癌细胞增殖及预后的关系。方法 应用免疫组织化学染色对 48例原发性肝癌组织中survivin蛋白与增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达情况进行检测 ,并结合临床预后进行分析。结果 48例肝癌组织中survivin蛋白表达阳性率为 64 .6 % ;survivin蛋白表达阳性者肝癌细胞增殖指数显著高于表达阴性者 (P =0 .0 0 7) ;survivin蛋白表达阴性患者与表达阳性患者比较 ,1年生存率差异无显著性意义 ,但 3年生存率前者显著高于后者 (P =0 .0 1 1 )。结论 survivin蛋白对促进肝癌细胞快速增殖具有重要作用 ,survivin蛋白的表达可以作为预后不良的重要指标 。

survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞生长抑制作用的研究

目的:采用反义寡核苷酸封闭肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其对肝癌细胞生长的抑制作用. 方法:针对survivin mRNA翻译起始位点设计并合成反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN);采用脂质体介导survivin ASODN转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,western-blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,检测转染前后细胞贴壁率及细胞生长抑制率变化,绘制细胞生长曲线. 结果:脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞后survivin蛋白及mRNA表达分别从69.59及75.61降低至10.71及22.94,细胞贴壁率从90.68%降低至33.16%, 细胞凋亡率从0.7%增加至31.35%,均有显著差异.转染后对细胞生长的抑制作用可以维持大约1 wk,在转染后第3 d抑制率最高可达71.8%. 结论:脂质体介导转染survivin反义寡核苷酸可以有效降低细胞内survivin基因的表达,诱导细胞发生凋亡,抑制肝癌细胞生长.

NDV对体外培养的肿瘤细胞杀伤性研究

目的：探讨ＮＤＶ病毒体外对肿瘤细胞的杀伤性。方法：人的ＳＧＣ－９７０１和ＳＭＭＣ－７７２１肿瘤细胞为靶细胞，观察了ＮＤＶ对其直接杀伤作用。结果：ＮＤＶ病毒能作用于瘤细胞，并最终使肿瘤细胞死亡。结论：ＮＤＶ病毒是一种有效的肿瘤细胞溶解剂，在体外具有明显的直接杀伤瘤细胞作用。

缺血再灌注期间兔移植肝糖原水平对供肝活力的影响及意义

目的研究兔供肝糖原在缺血再灌注期间的变化及其代谢特点,并探讨其意义。方法供体组兔(n=21)均分为三组:A组(禁食24h)、B组(正常喂食)和C组(正常喂食+葡萄糖补充),运用自创的兔肝保存-再灌注模型来观察冷保存、复温和再灌注期间供肝组织中糖原含量、乳酸含量及肝功酶学的变化,并计算缺血期间糖原下降速率。其中B组为正常对照组。结果同B组相比较,禁食24h后,A组肝糖原含量显著下降(15.4mg·g^(-1)±2.6mg·g^1) vs (51.8mg·g^1+6.6mg·g^1),P<0.01,而C组经补充250g·L^1葡萄糖120mL后,肝糖原水平显著提高(63.2mg·g^1±5.8mg·g^1)vs(51.8mg·g~±6.6mg·g^1),P<0.05:经冷存6h。各组糖原水平均显著下降(P<0.05);于复温末,各组肝糖原水平均降至—最低值,彼此相差无显著性(P>0.05),同时意外发现复温期间肝糖原下降速率与冷存末糖原水平呈显著性正相关(P<0.01),于冷存末、各组供肝组织中的乳酸水平均显著升高(P<0.05),于复温末,B,C两组达到最大值,两两间相差具有显著性。于再灌注期间,C组肝功明显好于A,B两组。结论禁食或补充葡萄糖可显著性改变兔肝糖原含量;供肝获取前糖原水平越高,于缺血期间无氧酵解水平越高;复温缺血可能在缺血再灌注损伤中起重要作用。

肝细胞糖原拮抗肝脏缺血再灌注损伤及其相关机理的研究

为了探讨增加细胞内糖原含量能否改善肝脏缺血再灌注损伤程度，本实验对３组糖原含量显著不同的兔肝脏缺血再灌注过程中的组织形态学、肝脏酶学、组织ＡＴＰ含量、细胞膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性及胞浆内游离Ｃａ２＋浓度进行了观察。结果：糖原含量高的肝脏，其细胞能量代谢旺盛，细胞膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性强，胞浆内游离Ｃａ２＋浓度相对稳定，组织结构及功能损伤轻。本实验结果提示：缺血前增加肝脏糖原含量可显著地拮抗肝脏缺血再灌注损伤。

生脉注射液和尼莫通对家兔肠缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 :观察生脉注射液、尼莫通及二者联合应用对家兔实验性肠缺血再灌注损伤的影响。方法 :夹闭肠系膜上动脉 90分钟后松夹 ,复制家兔肠缺血再灌注模型。动物随机分为 :A.假手术组 ;B.模型组 ;C.尼莫通治疗组 ;D.生脉注射液治疗组 ;E.生脉注射液 +尼莫通治疗组。结果 :(1)再灌注后各实验组平均动脉压显著下降 ,下降幅度以 D、E组最小 ,B组最大 (观察终点组间 F=15 .5 4,P<0 .0 1) ;(2 )再灌注后各实验组心率显著减慢 ,减慢程度以 D、E组最小 ,C组最大 (观察终点组间 F =8.38,P<0 .0 1) ;(3)门静脉血内毒素含量在 C、D、E组均低于模型组 (F=10 .30 ,P<0 .0 1) ,但与假手术组比较 ,仅 E组无显著差异 ;(4 )小肠病理组织学损害程度B组 >C组 >D、E组 ,A组正常。结论 :生脉注射液和尼莫通能显著减轻家兔肠缺血再灌注后低血压及小肠组织学损害 ,降低门静脉血内毒素含量 ,二者联用效果更好 ,并能逆转尼莫通减慢心率的效应。

新城疫病毒联合热固化瘤苗抗小鼠肿瘤作用探讨

为探讨新城疫病毒（简称 Ｎ Ｄ Ｖ）联合热固化瘤苗对小鼠肿瘤的抑瘤作用和免疫调节作用，实验检测了荷瘤小鼠的抑瘤率和细胞免疫功能。实验将接种上 Ｓ Ｐ２／０ 及 Ｈ２２ 瘤细胞的荷瘤小鼠分为单纯 Ｎ Ｄ Ｖ 治疗组（实验Ⅰ组）和 Ｎ Ｄ Ｖ＋ 热固化瘤苗治疗组（实验Ⅱ组）。结果显示： 实验Ⅰ组与实验Ⅱ组抑瘤率分别为 ２４．８％ 和 ４１．１％ ，两组的平均瘤重明显小于对照组，且实验Ⅰ组和实验Ⅱ组在不同时段的自然杀伤（ Ｎ Ｋ）细胞活性均高于对照组（ Ｐ＜ ０．０１），实验Ⅱ组的抑瘤率和 Ｎ Ｋ 细胞活性比实验Ⅰ组更高。提示 Ｎ Ｄ Ｖ 联合热固化瘤苗对荷瘤小鼠的抑瘤作用和增强 Ｎ Ｋ 细胞活性均比单独应用 Ｎ Ｄ Ｖ 的效果好。

NDV/MC联合治疗小鼠H_(22)腹水瘤的实验研究

目的:探讨NDV/MC联合治疗小鼠H_(22)腹水瘤的协同增效作用,以提高对肿瘤的治疗效果。方法:将H_(22)瘤细胞接种小鼠腹腔后分成Hanks液、NDV、MC、NDV与MC组,每组给8只;分别用Hanks液、NDV、MC、NSV与MC联合治疗。结果:Hanks液组平均存活14.8d,存活率0.0％;NDV组存活19.6d,存活率12.5％;MC组存活18.8d,存活率25.0％;NDV与MC联合治疗组存活24.4d,存活率37.5％。结论:NDV与MC联合治疗小鼠H_(22)腹水瘤,疗效显著高于单纯NDV与单纯MC组,抗肿瘤效果有显著差异。

NDV/IL-2治疗小鼠H_(22)腹水瘤的生存期结果分析

目的:探讨NDV/IL—2联合治疗小鼠H_(22)腹水瘤的协同增效作用,以提高对肿瘤的治疗效果。方法:将H_(22)腹水瘤细胞接种小鼠腹腔后分成Hanks液,IL—2,NDV,NDV/IL—2组,每组10只,分别用Hanks液,IL—2,NDV,NDV/IL—2治疗。结果:Hanks液组平均存活14.3d,存活率0.0％,IL-2组存活15.4d,存活率0.0％,NDV组存活23.5d,存活率20.0％,NDV/IL—2组存活23.6d,存活率30.0％。结论:NDV与NDV/IL—2组治疗小鼠H_(22)腹水瘤,疗效无显著差异(P>0.05),二者协同增效作用较差。

双活素辅助治疗中晚期恶性肿瘤的评价

近年来恶性肿瘤发生率有逐渐上升的趋势,由于早期诊断尚有一定困难,部分病人确诊时已属中、晚期,失去早期手术根治的机会。因此,治疗中、晚期恶性肿瘤病人仍是目前临床上的重要课题之一。我们于1993年7月～1995年6月,采用将双活素口服液(1993成制FRI0274)作为化疗的辅助药物治疗中晚期恶性肿瘤病人70例。

NDV联合热固化瘤苗的抗肿瘤作用

为了研究新城疫病毒（ＮＤＶ） 联合热固化瘤苗抑制肿瘤生长和免疫调节的作用，检测了荷瘤小鼠的抑瘤率和细胞免疫。结果显示，实验组Ⅰ与Ⅱ抑瘤率分别为２４．８％ 、４１．１％ ，２ 组的平均瘤重明显小于对照组，实验组Ⅱ在不同时间段的ＮＫ 细胞活性高于对照组（ Ｐ＜０ ．０１） 。提示ＮＤＶ联合热瘤苗对荷瘤小鼠的抑瘤作用和增强ＮＫ 细胞活性均比单独应用ＮＤＶ效果好。