医学理论课程思政视域下青年教师的能力提升研究

近年来,课程思政已成为高等教育的重要内容。各大高校均逐步将各专业课程与思政教育融合,以达到立德树人的目标。医学相关专业教育亦是如此。其中,教师将课程思政融入基础医学理论课程,有利于医学生在学习理论知识的同时,树立正确的三观以及涵养崇高的职业道德素养,成为助力社会和国家发展的优秀人才。然而,这种模式仍处于探索阶段,需要不断地进行研究改进和完善。文章就青年教师在思政教育融入基础医学理论课程过程中的相关问题进行探讨,并提出相应的建议。

甲醛对PC12细胞内源性H_2S生成的影响

目的观察甲醛对PC12细胞内源性硫化氢(hydrogensulfide,H2S)生成的影响,以探讨甲醛损伤PC12细胞的新机制。方法 RT-PCR方法检测PC12细胞的胱硫醚-β-合酶(cystathionine-beta-synthase,CBS)mRNA的表达;亚甲基蓝分光光度计法检测PC12细胞CBS活性及PC12细胞内源性H2S的含量;MTT法观察PC12细胞的存活率。结果甲醛可以抑制PC12细胞CBS的表达及其活性,减少内源性H2S的生成;甲醛可以明显地降低PC12细胞的存活率。结论甲醛能抑制CBS的表达和活性,减少内源性H2S生成,这可能与其损伤PC12细胞有关。

硫化氢对MPP^+诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨硫化氢对MPP+诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。方法以MPP+损伤PC12细胞作为帕金森病的细胞模型,甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;丙酮酸二硝基苯腙比色法检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)浓度;双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧水平变化;应用硫化氢钠(sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体。结果 200μmol/L和400μmol/L硫氢化钠呈浓度依赖性阻断MPP+引起PC12细胞存活率的降低;400μmol/L硫氢化钠能明显抑制400μmol/L MPP+诱导的PC12细胞LDH的漏出,以及抑制MDA和活性氧的产生。结论硫化氢对MPP+诱导PC12细胞的氧化应激损伤具有保护作用。

硫化氢对帕金森病模型大鼠多巴胺神经元的保护作用

目的:观察硫化氢对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠神经行为学、氧化应激以及多巴胺及其代谢产物的影响。方法:采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成偏侧PD模型。将模型动物随机分为模型组、硫化氢组(硫氢化钠做供体),每组10只;另分别取10只正常大鼠为正常组及假手术组(以抗坏血酸注射)。观察PD大鼠经过硫化氢处理后神经行为学、脑组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)含量以及多巴胺代谢产物的变化。结果:与模型组比较硫化氢组大鼠行为学明显改善(P<0.01),同时脑组织中GSH、SOD含量均升高,MDA含量降低,多巴胺及其代谢产物升高。结论:硫化氢对PD模型大鼠多巴胺神经元具有保护作用。

不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响

目的观察不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响,分析甲醛诱导内皮细胞损伤在心血管疾病发病中的意义。方法将人脐静脉内皮细胞株分别与不同浓度甲醛(分别为0、5、10、20、40和80μmol/L)的DMEM培养基孵育,同时以过氧化氢(100μmol/L)为阳性对照组,抗氧化剂维生素C(100mg/L)为保护组。共培养24h后,分光光度法检测乳酸脱氢酶漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛浓度;硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达;RT-PCR法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达。结果不同浓度甲醛呈剂量依赖性地促进细胞乳酸脱氢酶漏出,促进内皮细胞上清液丙二醛和一氧化氮的产生;降低内皮型一氧化氮合酶的活性,抑制内皮型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达;增加诱导型一氧化氮合酶活性,促进诱导型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤,机制可能与其抑制内皮型一氧化氮合酶的活性及表达,诱导诱导型一氧化氮合酶的活性及表达,从而诱导内皮细胞产生过多的一氧化氮有关;维生素C通过降低一氧化氮产生,减轻甲醛诱导的内皮细胞损伤。

较低剂量甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤的时相特征及机制

目的观察较低剂量甲醛(formaldehyde,FA,浓度为40μmol/L)诱导人脐静脉内皮细胞损伤时相特征及一氧化氮(NO)含量变化的时相规律,分析甲醛在诱导内皮细胞损伤中的作用机制。方法将人脐静脉内皮细胞(HU-VEC-12株)与甲醛浓度为40μmol/L的DMEM培养基孵育。分别处理一定时间后(0,4,12,24,48,72h)H-E染色-光学显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定细胞的活性;丙酮酸二硝基苯腙比色-分光光度法检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)浓度;硝酸还原酶法测定培养液中NO浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的蛋白表达;RT-PCR法测定eNOS和i NOS的mRNA表达。结果较低浓度甲醛呈时间依赖性地促进细胞LDH漏出,以及内皮细胞上清液MDA和NO的产生;降低eNOS的活性,抑制eNOS在蛋白和基因水平的表达;增加i NOS活性,促进i N-OS在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导HUVEC-12细胞损伤,机制可能与其抑制eNOS的活性及表达,诱导i NOS的活性及表达,增加病理性NO产生,从而导致内皮细胞损伤。

基于卓越医师培养要求的地方院校生理学教学改革探索

实施"五年制卓越医师教育培养计划"项目对医学基础课程教学提出了新的要求。对生理学课程而言则更加强调基础知识、基本理论和基本技能,更加强调批判性思维能力和创新能力培养。结合南华大学"卓越医师班"的改革实践,文章从生理学课程的体系整合、实验教学内容优化、合理联系临床、融入人文教育、引入PBL和案例教学、完善考核评价体系等方面介绍了其生理学教学改革。

高校研究型实验室仪器设备管理浅议

高校研究型实验室仪器设备的管理是实验室管理的重要组成部分,对研究生培养质量的提高起着至关重要的作用。如何维持仪器设备的性能稳定,保证仪器设备的正常运转以提高研究人员的工作效率,已经是实验室管理的一个焦点问题。

甲醛对人脐静脉内皮细胞氧化损伤作用

目的 探讨甲醛对人脐静脉内皮细胞的损伤作用及可能机制。方法 将人脐静脉内皮细胞暴露于不同浓度甲醛（0、5、10、20、40、80μmol／L）下；同时以过氧化氢为阳性对照组，抗氧化药物维生素C为保护组。24h后通过MTT比色法检测细胞生长抑制率，硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛含量，观察甲醛是否对内皮细胞具有损伤作用及维生素C对甲醛损伤的内皮细胞是否具有保护作用。结果 甲醛能抑制细胞的生长活性，细胞生长抑制率随甲醛浓度的增加而增加；甲醛诱导细胞外丙二醛的生成，且其含量随甲醛浓度的增加而增加。维生素C能降低甲醛对内皮细胞的生长抑制率，降低细胞外MDA含量。结论 甲醛能诱导内皮细胞产生损伤作用，这种作用与其增加内皮细胞产生过多的脂质过氧化物有关。抗氧化刺维生素C能减轻甲醛对内皮细胞的氧化损伤。

CBS基因过表达PC12细胞株的建立及鉴定

目的建立胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因过表达PC12细胞株并进行鉴定。方法根据Gen Bank数据库中的CBS c DNA序列设计合成CBS基因引物,PCR扩增CBS基因,并将其克隆到慢病毒过表达载体GV341中,用慢病毒过表达载体连同两种包装病毒载体对293T细胞进行转染,收获含CBS慢病毒载体的上清液,用其感染正常的PC12细胞,用嘌呤霉素进行筛选得到CBS基因过表达PC12细胞株。用实时荧光定量PCR法检测所得PC12细胞(观察组)、空载体转染的PC12细胞(对照组)、正常PC12细胞(空白组)中的CBS mRNA。用Western blot法检测上述三组细胞中的CBS蛋白。结果观察组、对照组、空白组PC12细胞CBS mRNA表达量分别为162.20±11.20、1.00±0.03、2.30±0.07,CBS蛋白表达量分别为1.53±0.09、1.00±0.10、0.96±0.10。观察组PC12细胞CBS mRNA、蛋白表达量均高于对照组和空白组(P均<0.05),对照组PC12细胞CBS mRNA、蛋白表达量与空白组相比差异均无统计学意义。结论成功构建CBS基因过表达PC12细胞株。

槟榔碱对泡沫细胞胆固醇流出和ABCA1表达的影响

目的探讨槟榔碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的鼠源性巨噬细胞性泡沫细胞形成的影响及可能机制。方法采用体外培养的鼠源性巨噬细胞株作为研究对象,加入ox-LDL(50 mg/L)诱导泡沫细胞,同时加入不同浓度的槟榔碱处理,油红O染色进行形态学观察,高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)的水平,3H标记的胆固醇测定胆固醇流出率。采用实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达。结果 ox-LDL处理48 h后,与正常巨噬细胞相比,油红O染色阳性细胞显著增加,细胞体积明显增大,形态多呈圆形或不规则形;槟榔碱(10-6、10-5和10-4mol/L)组油红O染色阳性细胞数比泡沫细胞模型组显著减少,细胞体积明显缩小。与泡沫细胞模型组相比,槟榔碱(10-5和10-4mol/L)显著性降低细胞内TC、FC、CE水平及CE/TC,显著性增加细胞胆固醇流出率和ABCA1的表达。结论槟榔碱抑制ox-LDL诱导的鼠源性巨噬细胞性泡沫细胞形成,上调泡沫细胞中ABCA1的表达。

小鼠间充质干细胞诱导分化成脂肪细胞miRNA表达的变化

目的:探讨小鼠间充质干细胞(MSCs)定向诱导分化成脂肪细胞微小RNA(miRNA)表达的变化,为进一步研究miRNA调控MSCs向脂肪细胞分化的分子机制奠定基础。方法:采用全骨髓体外分离结合差速贴壁法纯化扩增C57BL/6小鼠MSCs,形态学观察细胞生长情况,并用免疫组化方法鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34的表达。脂肪细胞分化诱导剂诱导MSCs分化为脂肪细胞,利用油红O染色,判断MSCs成脂分化情况。运用miRNA芯片技术检测MSCs和脂肪细胞中差异表达的miRNA。结果:①倒置显微镜下观察,传5代后可获得均一性较高的MSCs;免疫组化显示90%以上的骨髓间质干细胞CD29、CD44阳性,CD34阴性。MSCs经脂肪诱导剂诱导后,胞内大量脂滴形成,油红O染色阳性;②基因微阵列分析表明,小鼠MSCs分化成脂肪细胞差异表达的miRNA共75个,其中20个表达上调、55个表达下调。结论:MSCs分化成脂肪细胞存在miRNA表达的变化,某些miRNA很可能具有重要的调控MSCs成脂分化的作用。

创建医学院校基础医学实验中心的探索

着眼于培养综合型创新型医学人才的实验教学改革,探讨创建跨学科、多层次、综合性的基础医学实验中心的必要性,为进一步促进优质资源整合和共享,加强专业实验教学队伍的建设,提出基础医学实验中心管理的若干建议,促使基础医学实验中心走上可持续发展之路,适应新形势下高等医学教育管理体制改革的逐步深化。

高学历实验技术队伍建设的探讨

随着高学历人才不断充实到高校的实验技术岗位,实验技术队伍结构日趋合理,实验技术队伍整体素质已有明显改善,但各高校对高学历实验技术人员的管理没有与时俱进,并没有充分发挥人才资源的优势。从高学历人才这个独特视角,对目前高校实验技术队伍存在的问题进行分析,建议在高校各职能部门和高学历实验技术人员自身两个层次上,进行更新观念、科学评价、完善机制、持续发展等多个方面改革,建设一支业务水平高、管理能力强的实验技术队伍,以满足人才培养和科学研究的需求。

糖尿病合并肺结核61例临床分析

目的观察糖尿病合并肺结核的临床特点及治疗方法。方法对我院2型糖尿病合并初治肺结核患者61例的临床资料进行分析,并随机抽取同期单纯肺结核患者70例进行对比分析。结果糖尿病合并肺结核空洞发生率、痰菌阳性率明显高于单纯肺结核,血糖控制较好糖尿病合并初治肺结核组与单纯肺结核组抗结核治疗效果相近,血糖控制较好组比血糖控制较差组抗结核治疗效果好。结论糖尿病并发肺结核时,两病应同时治疗,积极控制血糖,早期合理抗结核治疗,能提高肺结核的治愈率。

生理学教学引入循证医学的探讨

生理学是基础医学的一门重要课程,其内容复杂,学习难度大。在生理学教学过程中引入循证医学的理念,可提高医学生的学习兴趣,改变学生的学习方法,变被动学习为主动学习,从而提高教学质量。

HO-1介导H_2O_2预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用

目的探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对H2O2预处理的适应性细胞保护效应的介导作用。方法PI染色流式细胞仪(Flowcytometer,FCM)检测PC12细胞凋亡,流式细胞仪检测PC12细胞HO-1蛋白的表达。结果PC12细胞经10μmol/L H2O2预处理90 min后,20、30、50、100μmol/L H2O2对PC12细胞凋亡的诱导作用明显下降;10μmol/L H2O2预处理90 min后,PC12细胞HO-1蛋白表达量明显增加;给予10μmol/L的HO-1蛋白特异性阻断剂ZnPP后,可显著阻断10μmol/L H2O2预处理90 min对50μmol/L H2O2损伤PC12细胞的保护作用。结论血红素氧合酶-1(HO-1)介导了H2O2预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用。

脑发育期甲状腺功能低下大鼠脑组织NO含量及NOS活性的变化

目的探讨脑组织一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性在脑发育期甲状腺功能低下大鼠脑发育障碍的发病机制中的作用。方法将孕SD大鼠8只,随机分成对照组和甲低组,每组4只。对照组:普通饮食喂养,饮普通自来水。甲低组:普通饮食喂养同时孕17天起至仔鼠生后30天饮0.03%甲巯咪唑自来水诱发脑发育期甲状腺功能低下大鼠。从两组所生仔鼠分别取25只,将其随机分为5小组,每小组各5只。分别于生后20天?生后30天?生后50天?生后70天和生后90天处死,同时分别检测血清游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、脑组织NO含量和NOS活性。结果甲低大鼠生后20天和30天血清FT3和FT4的水平明显低于对照组,生后50天、70天和90天血清FT3和FT4的水平与对照组比较差异无显著性。甲低大鼠生后20天和30天脑组织NO含量及NOS活性均明显低于对照组,生后50天、70天和90天脑组织NO含量及NOS活性与对照组无显著差异。相关分析表明:甲低大鼠生后20天和30天血清FT3和FT4与脑组织NO含量及NOS活性呈显著正相关。结论NO和NOS在脑发育期甲状腺功能低下致脑发育障碍中发挥一定作用。

甲醛对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的探讨甲醛对体外培养小鼠胚胎的发育毒性。方法采用植入后全胚胎培养模型，将8．5d龄昆明种小鼠胚胎移入含甲醛的即刻离心血清中培养48h，甲醛终浓度为0．000、0.726、7．260、72．600、726．000μmol／L，观察甲醛对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果随着甲醛剂量的增加，胚胎在体外的生长发育受影响越严重，呈现出明显的剂量-反应和剂量-效应关系。甲醛对体外培养小鼠胚胎生长发育毒性的最大无作用剂量为0．726μmol／L；当剂量为7．260μmol／L时，甲醛可诱发胚胎生长发育迟缓；≥72．600μmol／L时，甲醛可诱发小鼠卵黄囊生长和血管分化不良，形态分化异常，同时胚胎畸形发生率明显增高，主要表现为神经管闭合不全、体位翻转不全和脑、心脏、腮弓发育异常及视觉系统、前肢芽、后肢芽、体节等畸形；当剂量为726．000μmol／L时，甲醛对体外培养胚胎呈致死效应。结论甲醛对体外培养的小鼠胚胎具有一定的胚胎毒性和致畸性。

对成人高等医学教育中生理学课堂教学的探讨

构建终身教育体系是新世纪我国发展计划的重要组成部分，成人高等教育是实现终身教育的重要手段和有效途径。针对成人高等医学教育培养应用型人才的特点，改进生理学课堂教学方式和方法，提高成人高等医学教育生理学课堂教学质量。