IL-10调控HaCaT细胞增殖及分化的分子机制

目的探讨白细胞介素10(IL-10)对皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖影响和对氯化钙(CaCl 2)诱导的角质形成细胞分化标志物的表达影响及其可能的分子机制。方法以不同浓度IL-10(0、3、10、30 ng/ml)处理HaCaT细胞不同时间(0、24、48、72 h),MTS分析细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期;IL-10(终浓度为10 ng/ml)预处理HaCaT 1 h,加入或不加CaCl 2(终浓度为1.2 mmol/L)培养24、48、72 h,Western blot检测IL-10对HaCaT分化标志物表达影响;丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)特异性抑制剂PD98059及磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)特异性抑制剂LY294002预处理HaCaT细胞,分别提取细胞总RNA和蛋白,荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测IL-10对HaCaT细胞分化标志物(Keratin1、Keratin5、Involucrin)表达影响。结果MTS结果显示,在72 h内,IL-10(30 ng/ml和较低浓度)对HaCaT细胞增殖无影响;流式细胞分析结果提示IL-10不影响HaCaT细胞周期进程。Western blot分析显示,IL-10上调HaCaT角质形成细胞角质细胞分化标志物Involucrin表达,而对Keratin1及Keratin5没有显著的影响。机制研究分析显示,IL-10能够活化ERK1/2和AKT,增加其磷酸化水平;RT-qPCR和Western blot结果显示PD98059及LY294002部分阻断IL-10诱导的Involucrin的表达。结论IL-10在一定浓度范围内不影响HaCaT的增殖;IL-10部分通过MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径上调HaCaT分化标志物Involucrin表达。

葛根素预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元损伤的影响及其机制

目的探讨葛根素预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元损伤的保护作用及其机制。方法雄性SD大鼠30只,随机均等分为假手术组、模型组、葛根素预处理组。采用线栓法阻断大鼠大脑中动脉血供,60 min后拔出栓线造成局部脑缺血再灌注损伤。葛根素预处理组在缺血前1 h腹腔注射葛根素(100 mg/kg)。脑缺血再灌注后第5天,HE染色法观察海马CA1区神经元的组织形态学变化,免疫组化法检测海马CA1区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的表达。结果 HE染色结果显示,与模型组相比较,葛根素预处理明显减少脑缺血再灌注引起的海马CA1区神经元损伤(P<0.05);免疫组化结果显示,与模型组相比,葛根素预处理使海马CA1区Caspase-3、Caspase-9的表达明显降低(P<0.05)。结论缺血前1 h葛根素预处理对局灶性脑缺血大鼠海马CA1区神经元损伤有保护作用,其主要机制可能与抑制凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达有关。

基于MSP430单片机低功耗湿度计的设计

介绍了一种由MSP430F449单片机和HIH-3610湿度传感器构成的数字式湿度计,并给出了用MSP430F449单片机来实现湿度测量的硬件电路及相应的软件设计。该数字式湿度计可以实现低功耗测量并能保证测量精度。

灸疗与抗衰老研究进展

通过对衰老机理的认识和对艾灸抗衰作用的总结,以探讨艾灸抗衰老作用的机理;同时介绍了灼艾的穴位和灸质灸量对抗衰老影响,以及新型的电子灸疗仪在保健抗衰老方面的应用。

留学生机能实验教学与管理工作初探

随着近年来我校留学生招生规模的不断扩大,留学生课程设置得更加全面。留学生的机能实验课程作为基础医学中重要的实践课程也受到了广泛关注。总结带教留学生机能实验课程的一些经验,并提出了进一步深化教学质量的展望。

IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响

目的构建白介素28受体ɑ(IL28RA)基因的真核表达载体,并转染HaCaT细胞,观察该基因对HaCaT细胞迁移能力的影响。方法从HepG2细胞中提取总RNA,逆转录后以其cDNA为模板PCR扩增IL28RA编码片段。将其插入质粒pCMV6构建pCMV6-IL28RA重组表达体;重组体经酶切分析及测序鉴定,将其转染至HaCaT细胞中,经G418筛选出稳定过表达IL28RA细胞株。为检测转染效率,反转录实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)分析转染细胞中IL28RA mRNA相对表达水平。伤口愈合实验检测过表达IL28RA对HaCaT细胞迁移能力的影响。结果IL28RA基因成功构建并在HaCaT中表达,RT-qPCR检测转染效率显示与对照细胞相比,过表达细胞中IL28RA mRNA相对表达水平显著升高。细胞伤口愈合实验检测显示与对照细胞相比,IL28RA过表达抑制HaCaT细胞迁移能力。结论IL28RA基因过表达降低HaCaT细胞迁移能力。

基于“互联网+”虚实结合的基础医学实验技能竞赛评价系统的建立、应用及体会

医学是一门实践性科学,基础医学实验技能竞赛是培养医学生实践能力的重要手段[1],旨在强调基础医学在医学教育中的重要地位,推动基础医学实验教学改革,全面提升医学生综合素质和人才培养质量。我校已进行了七届“安徽医科大学大学生实验技能大赛”,极大地激发了学生的学习主动性,加强了学生的科研协作精神和团队意识,提高了学生观察、分析和解决问题的能力,为优秀人材脱颖而出创造了有利条件。

基于转录组测序筛选不同性别C57BL/6J小鼠差异基因及通路

目的通过转录组测序筛选雌性与雄性C57BL/6J小鼠差异基因及通路,为进一步探讨小鼠雌雄间行为学差异的分子机制奠定基础。方法C57BL/6J品系的8周龄雌性与雄性小鼠,完整分离小鼠海马体组织,提取总RNA后逆转录构建cDNA文库,并在华大基因平台上生成单端为50个碱基的读数进行转录组测序。测序结束后基于GO和KEGG数据库,结合R语言中的phyper函数对数据进行筛选、校正和富集分析,计算P值;然后对P值进行矫正得到Q值并基于超几何测试方法对带注释的不同基因表达情况进行了分析,筛选出不同性别小鼠海马体中的差异基因及通路。测序结束后,使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证在雌雄小鼠海马中筛选出的差异基因并比较差异基因在不同信号通路上的表达情况。结果通过雌雄差异比较,筛选出325个差异基因,其中上调基因233个,下调基因92个,这些差异基因功能主要富集于长时程增强(LTP)、钙离子信号通路、尼古丁成瘾等过程;雌雄差异基因相互作用网络共有362个连接点和1703个相互作用边,筛选出的10个核心基因分别为:赖氨酸脱甲基酶5D(Kdm5d)、细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdkl5)、细胞输出介质(Cle1)、多巴胺受体6a3(Slc6a3)、盒式转录因子(Fox)、前体mRNA加工因子4B(Prpf4b)、甘氨酸受体4(Glur4)、钙离子受体2(Camk2)、DNA和RNA结合蛋白家族(Son)、5-羟色胺受体5b(Htr5b)。RT-qPCR验证结果与测序结果一致。结论从雌雄小鼠海马体中筛选出差异基因为研究不同性别小鼠行为学差异提供实验思路并为后续小鼠行为学研究做出针对性实验设计。

全血CRP测定在儿科呼吸道感染性疾病诊断中的应用价值

目的探讨超敏全血C反应蛋白测定在儿科感染性疾病诊断中的重要性,以推广全血C反应蛋白在儿科的应用。方法对该院2012年8月份接诊的268例感染性疾病患儿的白细胞(WBC)、中性粒细胞比值(GR%)、超敏全血C反应蛋白(CRP)结果进行综合统计分析。结果在WBC和GR%均升高的患儿中,CRP升高者占87.1%;在WBC升高,GR%正常的患儿中,CRP升高者占33.3%;在WBC正常,GR%升高的患者中,CRP升高者占48.6%;在WBC和GR%正常的患儿中,CRP升高者占47.7%;可见在WBC和GR%均正常时,CRP升高者也占了很大比例。结论全血CRP联合血常规检测可提高儿科医生对患儿炎性疾病诊断的准确性和早期性,为临床合理用药治疗提供积极有效的依据,建议儿科感染性患者做血常规检查的同时做CRP检查。

泌尿生殖道支原体感染状况及药敏分析

目的了解长沙地区男性和女性支原体流行病学情况,建立本地区支原体药敏谱,为临床合理用药提供参考依据。方法利用珠海浪峰生物技术有限公司提供的支原体试剂盒,对1 947例泌尿生殖道感染患者的尿道(宫颈)分泌物标本进行解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)培养、鉴定及药敏试验。结果在1 947例疑似病患中,支原体阳性805例,阳性率41.4%,以Uu检出率最高,达22.6%;其次为Uu+Mh混合感染检出率为14.0%;单纯Mh感染检出率最低为4.8%。从性别看,男性阳性率为24.5%,女性阳性率为44.0%,女性感染率明显高于男性。药敏结果表明交沙霉素,强力霉素,美满霉素3种抗菌药物对支原体有较高的抑菌能力,而红霉素的耐药性最高也最普遍。结论长沙地区支原体感染以Uu感染为主,Uu+Mh混合感染也逐年增多。男女性泌尿生殖道支原体(Uu、Mh、Uu+Mh)对常用抗生素药敏谱基本接近,交沙霉素,美满霉素,强力霉素可作为本地区经验性治疗支原体感染的首选抗生素。

杀菌类烟薰剂农药在蔬菜上的合理使用

杀菌类烟薰剂(下简称烟剂)农药,是防治蔬菜病害的主要农药之一。其具有不增加保护设施内湿度、极适宜早春或冬季阴雨雾雪、低温等不利条件下使用的特点,并使用方便简捷、效果明显或显著。烟剂目前广泛用于茄果类、瓜类、葱蒜类、菊科等蔬菜的早疫病、晚疫病、灰霉病、叶霉病、霜霉病、白粉病、炭疽病等病害的防治,是生产上长期普遍采用的剂型种类。笔者连续多年经销、使用烟剂,并长期深入生产过程,发现菜农使用烟剂中存在一些不当做法,为提高烟剂防效与免除药害,特把烟剂合理用法及注意事项作一归纳。

白粉虱综合防治技术

分析白粉虱防治的习性及其防治难点和最佳防治期,提出综合防治技术,以为白粉虱的防治提供参考。