五味子乙素调控miR-22-3p/RUNX3分子轴对重症急性胰腺炎腺泡细胞损伤影响的研究

目的:探讨五味子乙素(Sch B)调控miR-22-3p/runt相关转录因子3 (RUNX3)分子轴对重症急性胰腺炎(SAP)腺泡细胞损伤的影响。方法:将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、SAP+Sch-L组、SAP+Sch-M组、SAP+Sch-H组、SAP+anti-miR-NC组、SAP+anti-miR-22-3p组、SAP+Sch+miR-NC组、SAP+Sch+miR-22-3p组。除Con组外,其余各组采用10 nmol/L雨蛙素联合10 mg/L脂多糖刺激AR42J细胞24 h构建SAP细胞模型。SAP+Sch-L组、SAP+Sch-M组、SAP+Sch-H组采用浓度为10、20、40μmol/L的Sch B处理细胞;SAP+anti-miR-NC组、SAP+anti-miR-22-3p组为分别转染antimiR-NC、anti-miR-22-3p;SAP+Sch+miR-NC组、SAP+Sch+miR-22-3p组为分别转染miR-NC、miR-22-3p mimics并用40μmol/L的Sch B干预。酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清中白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测miR-22-3p和RUNX3 mRNA表达水平;BCA法检测RUNX3、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved-caspase3)表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-22-3p与RUNX3的靶向结合关系。结果:与Con组比较,SAP组AR42J细胞IL-6、TNF-α、miR-22-3p、Bax、cleaved-caspase3的表达及细胞凋亡率升高(P<0.05),RUNX3、Bcl-2的表达降低(P<0.05)。与SAP组比较,SAP+Sch-L组、SAP+Sch-M组、SAP+Sch-H组IL-L、TNF-α、miR-22-3P、Bcl-2表达降低(P<0.05),Bax、cleaved-caspase3、RUNX3表达及细胞凋亡率升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。与SAP+anti-miR-NC组比较,SAP+anti-miR-22-3p组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2的表达降低(P<0.05),细胞凋亡率及Bax、cleaved-caspase3、RUNX3的表达升高(P<0.05)。与SAP+Sch+miR-NC组比较,SAP+Sch+miR-22-3p组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2的表达升高(P<0.05),细胞凋亡率及Bax、cleavedcaspase3、RUNX3的表达降低(P<0.05)。结论:Sch B可通过下调miR-22-3p/RUNX3分子轴减轻SAP腺泡细胞损伤。