早熟厚皮甜瓜新品种凤蜜的选育

凤蜜是以M80813为母本、HN81214为父本杂交培育而成的早熟厚皮甜瓜杂交1代新品种。该品种在山东省春季温室栽培全生育期88 d,果实发育期31.6 d;秋季塑料大棚栽培全生育期93 d,果实发育期31.9 d。植株长势强,叶片深绿色,子蔓和孙蔓均可留瓜。果实椭圆形,果皮底色浅绿,果面有密网纹;单瓜质量2.5 kg,果肉厚度4.5 cm,果肉浅绿色,果瓤橙色,中心可溶性固形物含量(w,下同)17.0%,平均667 m2产量4627.01 kg。肉质细腻爽脆,清香味浓,品质佳,耐裂性好,货架期长,耐贮运。田间综合抗性较强。适宜在山东、河南、河北、海南大部分地区春、秋季保护地栽培。2022年6月通过农业农村部非主要农作物品种登记。

薄皮甜瓜新品种秀玉的选育

秀玉是潍坊科技学院利用地方品种刘旺甜瓜提纯改良获得的早熟薄皮甜瓜新品种。植株长势健壮,结实能力强,以孙蔓结瓜为主,单株可留瓜6~8个。全生育期93 d左右,果实发育期31 d左右。果实棒形,均匀,果实纵径16~19 cm、横径8~9 cm,果肉厚度1.9~2.2 cm。单瓜质量480 g左右,平均667 m^(2)产量7 508.69 kg。成熟后果皮浅绿色略带绿色条斑,果肉绿色,中心可溶性固形物含量(w,后同)14.8%,瓜瓤橙红色,肉质酥爽,清香味浓,品质佳,皮薄耐裂,货架期长,耐贮运,综合性状优良,适合在山东、河南、河北、海南大部分地区春秋季保护地栽培。2020年4月通过国家非主要农作物品种登记。

番茄斑萎病毒研究进展

对番茄斑萎病毒(TSWV)的生物学特性、分布、寄生范围、危害症状、传播途径、检测技术研究进展进行了综述,并对今后的研究方向进行了展望。

肠炎沙门氏菌SDA-琼脂糖凝胶电泳检测技术研究

[目的]建立肠炎沙门氏菌的SDA快速检测方法。[方法]根据肠炎沙门氏菌invA基因片段设计链置换扩增(SDA)引物,建立肠炎沙门氏菌的SDA快速检测方法,并对设计的引物的灵敏度和特异性进行研究。[结果]成功建立了肠炎沙门氏菌的SDA快速检测方法,SDA反应成功扩增了目标序列。建立的SDA检测技术对肠炎沙门氏菌的检测灵敏度达到7.0×103cfu/ml,且特异性良好。[结论]试验选取的序列和引物具有较高的特异性,可用于肠炎沙门氏菌的特异性检测。

山东省端垫刃科Telotylenchidae植物寄生线虫

于2002～2005年对山东省端垫刃科线虫Telotylenchidae主要属、种进行了系统的分类研究。共在山东省50个县市的309种寄主植物根系采集到线虫标样1528份，鉴定出端垫刃科线虫共计9个属20个种，其中，中国新记录属7个，新种4个，中国新记录种6个。

双垫刃线虫属Bitylenchus 2个中国新记录种的描述

2002-2005年从山东省植物根际土壤线虫标本鉴定出双垫刃属线虫2个种，均为中国新记录种，分别为哥伦比亚双垫刃线虫Bitylenchus colombianus和普通双垫刃线虫B．valgaris。哥伦比亚双垫刃线虫B．colombianus的鉴别特征为：头区连续，头环3～4条，口针纤细；肠中具纤维束，后肠囊大，占尾腔的2／3左右；雌虫尾亚圆柱形，末端具规则环纹，尾端角质层5-8μm厚。普通双垫刃线虫B．valgaris的鉴别特征为：头区缢缩，头环5～7条；侧线4条，外侧两条锯齿状；后肠囊延伸至尾端；雌虫尾圆锥形，尾端光滑，尾环Ran=32～43条。

垫属中国新记录种—明淑楯垫线虫Scutylenchus myungsugae的描述

2001年6～9月,在山东省莱阳市的草莓、牛蒡、玉米等植物根际土中发现明淑垫线虫Scutylenchusmyung sugae,Choi＆Geraert,1994。该种线虫主要鉴别特征:虫体表皮环纹宽,网格状;头部纽扣状,缢缩明显;雌虫尾短,亚圆柱形,末端具有环纹;阴门凹陷,阴道壁口加厚。

蔬菜作物根结线虫病害防治研究进展

根结线虫(Meloidogyne spp.)是重要的蔬菜作物寄生线虫,分布于世界各地而且寄主范围广泛。目前根结线虫的危害程度已成为仅次于真菌的第二大植物病害。本文综述了蔬菜作物生产过程中农业防治、作物育种、生物防治和化学防治4种防治根结线虫的方法,探讨了各种防治方法的优势和局限性,并展望了现代有机绿色农业中根结线虫科学防治的研究方向和趋势。

番茄溃疡病菌的环介导等温核酸扩增技术检测方法

目的建立番茄溃疡病菌的环介导等温核酸扩增技术检测方法。方法应用环介导等温核酸扩增技术(LAMP)对番茄溃疡病菌的16SrRNA特异性基因进行扩增,采用4对引物识别目的片段的6个特异性区域,62℃恒温1h完成扩增。结果设计的引物与对照菌皱纹假单胞菌、茄假单胞菌、丁香假单胞菌番茄致病变种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。这些对照菌在茄科蔬菜上易引起类似症状。结论 LAMP检测程序便捷,所需设备简单,其结果可以通过肉眼观察来判断,比常规PCR灵敏且能更早得到反应结果,因此该技术具有更大的优势。

霍乱弧菌SDA-琼脂糖凝胶电泳检测技术研究

选取霍乱弧菌ompW基因片段,设计链置换扩增(strand displacement amplification)特异性引物,建立霍乱弧菌SDA快速检测方法,同时对设计的引物的灵敏度、特异性进行研究,结果发现所建立的SDA检测技术对霍乱弧菌的检测灵敏度达到7.0×102cfu/mL,特异性检测发现,SDA技术可以特意性地扩增霍乱弧菌。

燕麦属进境检疫性杂草种子的SSR标记检测

本研究对燕麦属中检疫性杂草细茎野燕麦、法国野燕麦、不实野燕麦与非检疫性杂草野燕麦、燕麦利用分子标记技术进行检测,并对其反应条件及反应体系进行优化,筛选出1对引物AM1对应的标记在五种燕麦中具有多态性,能够用于检测进境检疫性燕麦种子,这对以后利用分子标记技术进行种间检疫性杂草检测具有一定的指导和实践意义。

番茄黑环病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

利用RT-PCR方法获得了番茄黑环病毒(TBRV)外壳蛋白(coat protein,CP)基因,将CP基因克隆到pMD19-T Simple载体,并进行测序,大小为1 399 bp。与GenBank中已报道的TBRV的CP基因核苷酸相似度达99%以上。将TBRV CP基因定向插入双酶切的pET30a中,成功构建了原核表达载体pET30a-TBRVCP,转化大肠杆菌BL-21,表达重组蛋白。SDS-PAGE电泳分析发现,通过诱导条件的优化,重组蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG、4 h条件下表达量最高。

保护地黄瓜新品种‘天潍3号’的选育

‘天潍3号’黄瓜是以‘H1082’为母本、以‘G2036’为父本选育而成的杂交1代品种。该品种植株长势强,中早熟,叶片中等,节间稳定,瓜条油亮顺直,瓜皮墨绿,刺瘤明显,肉厚,质密,瓜把短,瓜条长度35~37 cm,单瓜质量250 g左右,商品性好,产量高;耐低温弱光,抗白粉病、霜霉病和黄瓜花叶病毒病。适合我国北方地区春季、秋季、冬季温室和春季、秋季拱棚栽培。2018年通过中华人民共和国农业农村部非主要农作物品种登记。

进境韩国兰花细菌性褐腐病菌的分离与鉴定

[目的]鉴定进境韩国兰花细菌性褐腐病菌。[方法]从韩国进境的大花蕙兰植株病变叶片中分离到细菌菌株,并通过形态鉴定、培养特征、生理生化及16S rDNA序列分析和致病性测定对其进行了鉴定。[结果]确认该病菌为兰花细菌性褐腐病菌(Erwinia cypripe-dii),这是我国首次从进境兰花中检出该病害。[结论]为我国兰花细菌性褐腐病菌的预防及控制奠定了基础。

菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

[目的]克隆菜豆荚斑驳病毒(BPMV)外壳蛋白(CP)基因,并对其进行原核表达。[方法]利用RT-PCR方法克隆BPMV CP基因,将其连接至pMD19-T Simple载体后对阳性克隆进行测序,检测其与已知病毒外壳蛋白基因序列的同源性;将CP基因定向插入双酶切的pET30a,构建其原核表达载体并转化大肠杆菌BL-21表达重组蛋白。[结果]试验克隆得到的CP基因大小为1 122 bp,与NCBI中目标基因的相似度达99%以上;试验成功构建了原核表达载体pET30a-BPMV CP,发现重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导4 h条件下表达量最高。[结论]该研究为BPMV抗血清的制备与液相芯片检测方法的建立奠定了基础。

马铃薯茎线虫Ditylenchus destructor Thorne,1945的描述

1995～ 2 0 0 2年期间 ,在辽宁省、吉林省、河北省、山东省的多种植物的根际土壤里发现马铃薯茎线虫Dity lenchusdestructorThorne,1 945 。

南方菜豆花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

[目的]克隆南方菜豆花叶病毒(SBMV)外壳蛋白(CP)基因,并对其进行原核表达。[方法]利用RT-PCR方法克隆SBMV CP基因,将CP基因定向插入表达载体pET28a中,构建其表达载体,并转化大肠杆菌BL-21表达重组蛋白。[结果]试验成功克隆到大小为799 bp的SBMV CP基因,测序分析发现与NCBI中目标基因的相似度达99%以上;成功构建了该基因的原核表达载体pET28a-SBMVCP,并确定重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG、4 h条件下表达量最大。[结论]该研究为SBMV抗体的制备奠定了基础。

普鲁兰短梗霉N2-3菌株碱性蛋白酶的纯化及性质研究

[目的]对普鲁兰短梗霉N2-3菌株的碱性蛋白酶进行纯化,并对其性质进行研究。[方法]利用层析柱Sephadex G-75与阴离子交换柱DEAE Sepharose Fast Flow纯化菌株N2-3的胞外碱性蛋白酶,并对纯化的酶进行SDS-PAGE凝胶电泳检测,同时对纯化蛋白酶的最适反应温度、温度稳定性、最适反应pH、pH稳定性进行测定,研究金属离子及各种化合物对蛋白酶活性的影响。[结果]试验中N2-3菌株的碱性蛋白酶纯化倍数和回收率分别为2.34和25.9%;SDS-PAGE凝胶电泳显示该酶的分子量约为33 kDa;该酶的最适反应温度和pH分别为52℃和9.0;Mn2+、Mg2+、Na+离子浓度在5 mmol/L时对纯化蛋白酶的酶活有激活作用,Zn2+、Ca2+、K+、Li+对酶活的影响不大,而当存在Fe2+、Fe3+、Cu2+、Co2+、Ag+、Hg2+离子时,蛋白酶活明显降低;苯甲基硫酰氟(PMSF)强烈抑制了该蛋白酶的活性,而乙二胺四乙酸(EDTA)与碘乙酸微弱抑制了该蛋白酶的活性。[结论]为普鲁兰短梗霉N2-3菌株碱性蛋白酶的工业化生产提供了一定的理论基础。

链置换恒温扩增快速检测单核细胞增生李斯特氏菌

目的开发单核细胞增生李斯特氏菌快速、简便、准确的链置换恒温扩增(strand displacement amplification,SDA)检测方法。方法根据单核增生李斯特菌特异性基因prfA基因片段,设计链置换扩增特异性引物,建立单核细胞增生李斯特菌SDA快速检测方法,同时对设计的引物的特异性和灵敏度进行研究。结果所建立的单核细胞增生李斯特菌SDA扩增方法灵敏度达到了7.0×10~2 CFU/mL,检验技术可以特异性地扩增单核增生李斯特菌。结论本试验所建立的单核细胞增生李斯特菌SDA检验技术具有快速、简便、特异性强的特点,具有在进出口实验室推广应用前景。

口感番茄新品种“潍科玉玲珑”的选育

“潍科玉玲珑”是潍坊科技学院用自交系WKFQ015作母本、自交系YLL48作父本杂交选育而成的口感番茄新品种。该品种长势旺盛,早熟,果圆形底部略扁,未成熟果实带绿肩,成熟后果实亮深粉色,色泽亮丽,平均单果质量120 g,皮薄且有韧性,肉厚汁多,酸甜适度,风味浓郁,香味独特,维生素C含量22.1 mg·(100g)^(-1),番茄红素含量80.9 mg·kg^(-1),可溶固形物含量7.4%,品质优良。2020年1月通过国家非主要农作物品种登记,适合山东省、河北省等大部分地区早春设施种植。