目的明确外源性胰岛素样生长因子1(IGF-1)多肽对体外培养的人牙周膜干细胞(hPDLSC)增殖及分化的影响。方法有限稀释法分离培养hPDLSC,流式细胞术检测细胞表面标志物的表达。结晶紫染色观察细胞集落形成。采用成骨及成脂诱导液诱导hPDLS...目的明确外源性胰岛素样生长因子1(IGF-1)多肽对体外培养的人牙周膜干细胞(hPDLSC)增殖及分化的影响。方法有限稀释法分离培养hPDLSC,流式细胞术检测细胞表面标志物的表达。结晶紫染色观察细胞集落形成。采用成骨及成脂诱导液诱导hPDLSC分化。采用CCK-8法分析(1、10、30、50、100)ng/m L IGF-1处理对hPDLSC增殖活性的影响。实时定量PCR检测IGF-1处理的hPDLSC中1型胶原蛋白α1(Col1α1)、3型胶原蛋白α1(Col3α1)、抗Runt相关转录因子2(Runx2)、骨涎蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)、牙骨质蛋白1(CEMP1)、scleraxis(SCXA)m RNA的表达。Western blot法检测Col1、Col3、Runx2、CEMP1及SCXA蛋白表达的水平。结果有限稀释法分离培养的hPDLSC高表达干细胞表面标志物CD105(95.4%)和CD90(96.1%),而低表达造血细胞标志物CD34(1.58%)、CD45(1.74%)。hPDLSC可形成集落并具有向成骨和成脂分化能力。IGF-1可提高hPDLSC的增殖活性,并呈剂量依赖效应。与对照组相比,IGF-1处理的hPDLSC中Runx2、BSP、OPN及CEMP1 m RNA的表达水平无明显变化,而Col1α1、Col3α1、SCXA显著增加。并且IGF-1处理后hPDLSC中Col1、Col3及SCXA的蛋白含量增加。结论 IGF-1可促进hPDLSC增殖和胶原蛋白合成,加速其向牙周膜成纤维细胞分化。展开更多
文摘目的明确外源性胰岛素样生长因子1(IGF-1)多肽对体外培养的人牙周膜干细胞(hPDLSC)增殖及分化的影响。方法有限稀释法分离培养hPDLSC,流式细胞术检测细胞表面标志物的表达。结晶紫染色观察细胞集落形成。采用成骨及成脂诱导液诱导hPDLSC分化。采用CCK-8法分析(1、10、30、50、100)ng/m L IGF-1处理对hPDLSC增殖活性的影响。实时定量PCR检测IGF-1处理的hPDLSC中1型胶原蛋白α1(Col1α1)、3型胶原蛋白α1(Col3α1)、抗Runt相关转录因子2(Runx2)、骨涎蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)、牙骨质蛋白1(CEMP1)、scleraxis(SCXA)m RNA的表达。Western blot法检测Col1、Col3、Runx2、CEMP1及SCXA蛋白表达的水平。结果有限稀释法分离培养的hPDLSC高表达干细胞表面标志物CD105(95.4%)和CD90(96.1%),而低表达造血细胞标志物CD34(1.58%)、CD45(1.74%)。hPDLSC可形成集落并具有向成骨和成脂分化能力。IGF-1可提高hPDLSC的增殖活性,并呈剂量依赖效应。与对照组相比,IGF-1处理的hPDLSC中Runx2、BSP、OPN及CEMP1 m RNA的表达水平无明显变化,而Col1α1、Col3α1、SCXA显著增加。并且IGF-1处理后hPDLSC中Col1、Col3及SCXA的蛋白含量增加。结论 IGF-1可促进hPDLSC增殖和胶原蛋白合成,加速其向牙周膜成纤维细胞分化。
