补阳还五汤治疗脑梗死恢复期气虚血瘀证的Meta分析

目的系统评价补阳还五汤治疗脑梗死恢复期气虚血瘀证病人的临床疗效和安全性。方法收集补阳还五汤治疗脑梗死恢复期气虚血瘀证的随机对照试验研究文献进行Meta分析。结果共纳入22篇文献(共2 123例研究对象),其中15项试验对临床总有效率进行了评定,15项试验对神经功能缺损评分进行了评定,11项试验对病人日常生活活动能力进行了评定,5项试验对中医证候疗效进行了评定。15项试验临床总有效率的Meta分析结果提示补阳还五汤组疗效优于对照组,RR=1.20,95%CI[1.14,1.26],P<0.000 01;15项试验神经功能缺损评分的Meta分析结果提示,补阳还五汤组对神经功能缺损的改善优于对照组,SMD=-0.93,95%CI[-1.17,-0.69],P<0.000 01;11项试验日常生活活动能力的Meta分析结果提示,补阳还五汤组优于对照组(SMD=0.73,95%CI[0.56,0.90],P<0.000 01;5项试验中医证候疗效的Meta分析结果提示,补阳还五汤组疗效优于对照组,RR=1.23,95%CI[1.10,1.37],P=0.000 2。结论补阳还五汤治疗脑梗死恢复期气虚血瘀证病人有明显疗效,且安全性较高。

急性脑血管病发病特点的研究

目的探索急性脑血管病发病特点及其与气候变化的关系,为预防其发生提供理论依据。方法收集陕西省西安市西京医院急诊科近3年收治的急性脑血管病患者3287例。其中,脑出血患者1288例,脑梗死患者1999例。分别按照性别、年龄、季节和节气进行分类计数,运用χ~2检验统计分析其分布规律。结果不同性别急性脑血管病发病率差异有统计学意义(P<0.05);男性患者多于女性患者。不同年龄组急性脑血管病发病率差异有统计学意义(P<0.01);脑出血患者在51~60岁这一年龄段发病率最高,脑梗死患者在61~70岁这一年龄段发病率最高。不同季节急性脑血管病发病率差异有统计学意义(P<0.01);脑出血患者冬季发病率最高,秋季次之;脑梗死患者春季发病率最高,冬季次之。不同节气急性脑血管病发病率差异有统计学意义(P<0.01);脑出血患者发病节气排在前四位的是春分、霜降、立冬、立春;脑梗死患者发病节气排在前四位的是立夏、雨水、清明、芒种。结论急性脑血管病的发病与气候变化有着密切的关系。总的来说,冬季是急性脑血管疾病的高发季节。人们需多注意气候的变化,做好相应措施预防急性脑血管病的发病。

浅谈叶天士胃阴学说及其现代应用价值

中医的辨治胃阴由来已久,著名温病学家叶天士在脾胃分治的理论指导下,首创了胃阴学说,它完善了脾胃学说,使后世医家受益匪浅。本文重点探讨了随着社会环境的更迭,生活习惯的改变,胃阴不足之证的发病日渐增多,拓展到脾胃病的诊治,其发病与肝关系最为密切。人们生活、工作压力俱增,肝气横逆犯脾胃,致使脾胃功能受损。军人作为一个特殊的群体,面临更大的压力,更易情志过极,肝病及胃。因此,对于脾胃病的辨治,当以肝为枢纽,疏肝解郁,滋养胃阴。同时对其预防调摄也是很有必要和意义的。

加味补阳还五颗粒对脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响

目的观察加味补阳还五颗粒对脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响。方法将健康雄性SD大鼠90只,按体质量用数字表法随机分为正常组、假手术组、模型组、加味补阳还五颗粒低剂量组、加味补阳还五颗粒中剂量组、加味补阳还五颗粒高剂量组、HMGB1抑制剂组、RAGE阻断剂组、阳性药物组各10只。分别取大鼠梗死区脑组织和血清。ELASA法检测血清中HMGB1和RAGE水平;Western blotting法分析脑组织中HMGB1表达水平。结果中等剂量的加味补阳还五颗粒可降低梗死区脑组织中HMGB1表达水平,可降低脑梗死大鼠血清中HMGB1和RAGE的含量。结论加味补阳还五颗粒可能通过影响脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路而发挥脑保护作用。中等剂量的加味补阳还五颗粒,折合人体剂量后每味药剂量如下:黄芪30 g,当归10 g,川芎6 g,赤芍10 g,丹参10 g,地龙10 g,茯苓10 g,陈皮6 g,杜仲10 g,天麻10 g。成人每日1剂,分两次服用。

重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)的原核表达及纯化

目的合成重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)蛋白。方法利用基因工程技术,克隆并重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A盒基因;利用原核表达技术,表达并纯化重组大鼠HMGB1-A盒蛋白,并利用Western blot法进行验证。结果琼脂糖凝胶电泳分析显示HMGB1-A盒基因大小约为250 bp;重组克隆p UC-A经双酶切鉴定,产物大小约为3000 bp、250 bp;重组克隆p GEX-A PCR产物大小约为250 bp。原核表达产物Mr大小约为36 000,与预期一致。结论成功表达并纯化HMGB1-A盒蛋白。

水蛭素融合蛋白的表达及其与靶向适配子的偶联

目的:优化表达并纯化水蛭素融合蛋白SA-H-RGD,检测其生物学活性,获得能够与生物素标记的纤维蛋白适配子G81-2结合的偶联物。方法:将序列正确的质粒p ET-44b-SA-H-RGD进行原核表达,采用不同浓度的IPTG及时间优化融合蛋白表达条件,镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白,Western-blot鉴定蛋白。通过凝血酶原时间(PT)和抗血小板聚集实验检测融合蛋白活性;之后按照生物素-G81-2:SA-H-RGD摩尔比为4:1的比例制备纤维蛋白特异性的偶联物,用凝胶迁移阻滞实验(EMSA)验证二者的偶联。结果:融合蛋白SA-H-RGD在IPTG 0.9 mmol/L、5 h时在大肠杆菌中获得可溶性高效表达,纯化的融合蛋白具有延长PT的作用和抑制血小板聚集的活性,EMSA表明SA-H-RGD具有结合生物素标记的G81-2适配子的功能。结论:本研究成功地优化表达了具有抗凝血和抗血小板聚集功能的融合蛋白SA-H-RGD,获得了水蛭素融合蛋白与生物素-G81-2适配子组成的靶向偶联物。

SELEX技术筛选纤维蛋白适配子的研究

目的:用纤维蛋白作为靶物质对ss DNA随机序列文库进行筛选,旨在获得高亲和力的纤维蛋白适配子。方法:在体外人工合成长度为99个核苷酸的ss DNA随机序列文库,文库中间区域为63个核苷酸的随机序列,两端为18个核苷酸的固定的引物序列;然后以羧基磁珠为介质包被纤维蛋白,利用指数级富集的配体系统进化技术(SELEX)对ss DNA随机序列文库进行反复筛选,当结合率不再提高时对筛选出的适配子进行连接、转化及测序分析。结果:羧基磁珠成功地包被了纤维蛋白,包被效率为87.65%,经15轮逐步递增压力的筛选,获得了纤维蛋白适配子群,经测序分析比对发现适配子有很好的多样性。结论:应用SELEX技术初步筛选出了亲和力较高的纤维蛋白适配子群,为下一步的鉴定及功能研究奠定了良好基础。

适配子纤维蛋白靶向性验证及其抗凝活性测定

目的:验证适配子G81的纤维蛋白靶向性,评估适配子对凝血系统的影响。方法:以复钙法制备鼠源、人源体外纤维蛋白,将不同浓度Cy5.5标记的适配子溶液与之孵育,置于激光共聚焦显微镜下以固定的参数成像,用ImageJ软件进行相对荧光强度分析;将适配子G81溶液加入血浆中,通过倍比稀释法得到含浓度梯度适配子的血浆,采用SYSMEX CS-5100全自动血凝仪检测PT、APTT、TT,评估适配子G81对凝血功能的影响。结果:激光共聚焦显微镜显示适配子能与纤维蛋白结合,随着加入适配子量的增加其相对荧光强度逐渐增强,表明适配子可与纤维蛋白结合,统计分析提示荧光强度与适配子存在量效关系;人源、鼠源纤维蛋白结合的荧光强度无统计学差异(P>0.05)。在抗凝活性检测中,血浆中适配子G81浓度达到200 pmoL/mL时,各浓度统计分析结果均显示P>0.05,表明适配子对PT、APTT、TT的测量均没有统计学差异上的影响。结论:适配子G81具有纤维蛋白靶向性,且当加入的适配子剂量低于200 pmol/mL时对内、外源性凝血功能、凝血酶时间均无明显影响。