微流控电融合芯片的研制及其在体细胞重编程中的应用

目的开发高通量的细胞电融合平台,并通过此平台将小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)与体细胞融合,探讨融合细胞的多能性。方法本实验室自主研发微流控芯片,将转染了绿色荧光的mESCs与转染了红色荧光的NIH3T3细胞进行电融合,并计算其排队率与融合率。通过流式细胞仪筛选出表达两种荧光的融合细胞,观察融合细胞的表型。RT-PCR检测NIH3T3、mESC以及融合细胞的多能性基因(Nanog、OCT4、SOX2和LIN28)mRNA的表达水平。结果自主研发了微流控芯片,构建了高通量的细胞电融合平台,通过此平台将mESCs与NIH3T3进行电融合,其排队率为(44.35±10.99)%,融合率为(59.88±20.03)%,融合细胞可形成类似于ESC样的克隆。RT-PCR法结果显示mESC和融合细胞均表达多能性基因Nanog、OCT4、SOX2和LIN28 mRNA,而NIH3T3不表达。结论通过自主研发的微流控芯片,可实现mESCs与NIH3T3的高效融合,使体细胞重编程为多能性干细胞。

人胚胎干细胞来源的视网膜色素上皮细胞超微结构观察方法的优化

背景视网膜色素上皮（RPE）细胞的正常超微结构是其执行正常生理功能的解剖基础，目前用透射电子显微镜（TEM）检测RPE细胞的超微结构时常用细胞沉淀法，但经过胰蛋白酶消化的细胞会破坏原有的细胞生长状态，无法真实地反映出体外培养的RPE细胞的超微结构。目的探索一种能够简单、真实地反映体外培养的人胚胎干细胞（hESC）来源的RPE细胞超微结构的方法。方法将hESC经自然分化法诱导为hESC来源的RPE（hESC—RPE）细胞，采用免疫荧光法检测hESC—RPE细胞特异性蛋白小眼畸形相关转录因子（MITF）和人类配对盒基因6（PAX6）的表达。将hESC—RPE细胞种植于Transwell小室上进行培养，待细胞形成细胞片后通过TEM进行超微结构的观察，并与细胞沉淀法制备的hESC—RPE细胞标本的超微结构和90日龄LongEvans大鼠体内RPE细胞的超微结构进行比较。结果hESC—RPE细胞MITF和PAX6表达阳性。TEM下可见大鼠体内RPE细胞正常的超微结构，包括顶端微绒毛、极性分布的RPE细胞色素颗粒和细胞核、细胞基底膜和细胞间紧密连接。细胞片法TEM下可见Transwell小室上细胞片中hESC—RPE细胞形成了类似于大鼠体内RPE细胞的超微结构，但细胞顶端微绒毛较短，而细胞沉淀法观察到hESC—RPE细胞的细胞质中散在分布的色素颗粒、非极性的细胞核和少量的微绒毛。结论TEM观察细胞超微结构时细胞片法不经过细胞的消化过程，保留了hESC—RPE细胞的正常结构，能简单、真实地反映体外培养RPE细胞的超微结构。

成人共同性外斜视术后双眼立体视功能重建的疗效观察

目的探讨成人共同性外斜视术后双眼立体视功能的重建效果。方法回顾性分析2009年9月至2017年11月在我科行手术治疗的44例共同性外斜视成人患者的临床资料,采用同视机及立体视检查图测定术前及术后双眼视觉功能,比较患者手术前后双眼立体视功能的变化。结果44例患者术前立体视存在率为25.0%,术后立体视存在率为68.2%,手术前后立体视存在率比较差异具有统计学意义(P<0.01);术后立体视锐度的治愈率为38.6%,好转率为25.0%,无效率为36.4%;11例术前存在立体视的患者中,术后7例达到治愈标准,1例立体视锐度好转,2例立体视锐度下降,1例立体视破坏。结论成人共同性外斜视术不仅能矫正外观,达到美容的效果,而且对部分患者可重建或改善双眼立体视功能,甚至可以达到功能治愈。术前存在立体视的间歇性外斜视患者,术后如出现眼位欠矫或过矫,可导致原有立体视下降甚至破坏。

中国西部地区脱髓鞘性视神经炎患者AQP4-IgG表达及其临床特征关系分析

目的:比较142例脱髓鞘性视神经炎(demyelinated optic neuritis,DON)患者血清或脑脊液中AQP4-IgG表达与其临床特征的关系。方法:回顾性收集2016年1月至2020年10月于陆军军医大学第一附属医院眼科收治的142例DON患者AQP4-IgG检验结果,对AQP4-IgG阳性及阴性患者的临床资料进行分析。结果:①检测到AQP4-IgG阳性者48例(33.8%),女性与男性比为5.9∶1,双眼同时发病者31例(64.6%),发病时LogMAR视力为0.48±0.64,随访结束时LogMAR视力为0.55±0.65。②检测到AQP4-IgG阴性者94例(66.2%),女性与男性比为1.7∶1,双眼同时发病者53例(56.4%),发病时LogMAR视力为0.54±0.61,随访结束时LogMAR视力为0.39±0.49。③AQP4-IgG阳性女性患者比例明显高于AQP4-IgG阴性患者(χ^(2)=7.827,P<0.01);二者双眼患病率不具有统计学差异(χ^(2)=0.884,P>0.05);二者在发病时LogMAR视力并无统计学差异(t=-0.721,P>0.05),但AQP4-IgG阳性患者视力预后更差(t=2.058,P<0.05)。AQP4-IgG阳性患者血沉升高(χ^(2)=5.403,P<0.05),以及合并自身抗体结果阳性的比例比AQP4-IgG阴性患者更高(χ^(2)=5.231,P<0.05),二者均具有统计学差异。结论:AQP4-IgG阳性的视神经脊髓炎谱系疾病患者女性发病率更高,视力预后更差,且可能合并自身抗体结果异常或者自身免疫性疾病。根据AQP4-IgG检测结果,准确地进行临床分型对治疗方案选择及预后分析具有重要指导意义。

不同年龄Marfan综合征晶状体半脱位两种术式的疗效观察

目的探讨两种晶状体摘除联合一期人工晶状体(IOL)悬吊术治疗不同年龄Marfan综合征晶状体半脱位的效果。设计回顾性病例系列。研究对象Marfan综合征先天性晶状体半脱位患者10例(18眼)。方法 >12岁患者3例(5眼)采用晶状体超声乳化术摘除晶状体同时行一期IOL悬吊术(乳化组);≤12岁患者7例(13眼)采用晶状体切除联合一期IOL悬吊术,同时行前段玻璃体切除术(晶切组)。平均随访(1.40±1.02)年。主要指标最佳矫正视力、眼压、并发症。结果 18眼术前平均最佳矫正视力(0.29±0.20),术后(0.51±0.24)(P=0.008)。乳化组术前平均最佳矫正视力(0.17±0.04),术后(0.41±0.16)(P=0.026);晶切组术前平均最佳矫正视力(0.34±0.22),术后(0.55±0.25)(P=0.000)。两组间比较,平均矫正视力改善无统计学差异(P=0.062)。所有患者术前等效球镜为(-2.76±14.1)D,术后为(-0.79±1.95)D。无一例出现严重并发症。结论晶状体超声乳化与晶状体切除及前部玻璃体切除联合一期IOL悬吊术两种手术方式均能有效改善不同年龄Marfan综合征晶状体半脱位患者视力,手术方式选择与视力改善无明显关系。

磁共振成像在视神经炎诊断中的应用进展

视神经炎并非单指视神经的炎症，实际上系指能够阻碍神经传导功能，引起视功能的一系列改变的视神经病变，如炎症、退变及脱髓鞘疾病等，临床上分为视神经乳头炎和球后视神经炎。随着影像学技术的发展，临床上运用于视神经炎诊断中的辅助手段逐渐增加，目前，磁共振成像（Magnetic resonance imaging,MRI）在视神经炎诊断中的价值已引起广泛关注。本文就视神经炎的MRI成像技术、MRI表现、与视功能和疼痛的相关性、以及向多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）发展的预测等研究现状作以简要介绍。

电融合技术进展及其在干细胞研究中的应用

电融合作为细胞融合的技术之一,在单克隆抗体制备、基因转移、抗肿瘤免疫等研究中占据了重要作用。目前电融合技术已经被广泛应用于发育生物学,以阐明胚胎发育过程并培养优良的品系。电融合技术结合体细胞核移植技术和体细胞重编程等技术可建立符合伦理学原则、避免排斥反应的个体化多能干细胞。就电融合技术在发育生物学和干细胞研究中的应用作一综述。

细胞融合致体细胞重编程机制研究进展

已分化的体细胞能够通过重编程转化回多能干细胞,在细胞移植、疾病细胞模型的制备以及药物筛选等领域具有重要意义。通过干细胞和体细胞的细胞融合,可使体细胞重编程。细胞融合致体细胞重编程速度快、效率高,是一种研究重编程机制的重要手段。对细胞融合致体细胞重编程的机制作一综述。

血浆置换联合糖皮质激素治疗视神经脊髓炎相关性视神经炎一例

患者女，52岁。因左眼无痛性渐进性视力下降5d来我院就诊。主诉右眼3年前开始出现视物模糊，时好时坏，1年前失明，一直未检查治疗。无头晕头痛、恶心呕吐、耳鸣、眼球转动痛。既往有高血压病史1年，血压控制良好。无吸烟、饮酒、服用药物病史。

房地产财务成本管理问题与应对策略探究

随着时代的发展,我国的人口总数日益增多,这也为我国房地产事业的发展提供了扎实的群众基础,近年来,房地产企业之间的竞争也愈发激烈。在这种背景下,如果房地产企业想在激烈的市场竞争中存活下来,就必须想尽一切办法提升自身的竞争力,其中,资金链、财务情况在很大程度上决定着房地产本身的生死存亡。因此,房地产企业及其领导层面必须从根本上对公司的财务情况给予最根本的重视,优化自身管理体系,才能在激烈的市场竞争中存活并实现良好的发展。