梅毒螺旋体重组融合蛋白的表达及免疫特性

表达纯化梅毒螺旋体重组融合蛋白,研究其抗原性和免疫原性,为梅毒诊断试剂和疫苗研究提供新候选抗原。合成梅毒螺旋体重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965基因,转入大肠杆菌中进行表达;镍柱纯化重组融合蛋白,western blot鉴定;以重组融合蛋白作为抗原,酶联免疫法(ELISA)检测人血清样本,分析其抗原性;利用该重组融合蛋白免疫新西兰兔,ELISA检测兔血清抗体滴度水平,评价其免疫原性。梅毒重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965在工程菌中成功表达,分子量为50kD。重组融合蛋白可被梅毒抗体阳性的血清识别,梅毒阴性血清与蛋白无反应。使用重组融合蛋白作为抗原检测人血清梅毒抗体,梅毒患者样本组与非梅毒患者样本组的检测结果存在非常显著性差异。重组融合蛋白免疫兔后,兔血清中可持续检测到高滴度梅毒抗体。梅毒重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965有良好的抗原性和免疫原性,可作为梅毒诊断试剂抗原和梅毒疫苗的候选蛋白。

中国菜豆凝集素序列的亲缘性分析

菜豆凝集素可专一与寡糖结合,是其发挥凝血及杀虫功能的主要原因。将菜豆凝集素序列和其他豆科凝集素进行序列对比,发现菜豆凝集素与豇豆凝集素序列相似度最高。对不同国家产地凝集素序列进行对比分析,发现菜豆凝集素高度保守,高度相似氨基酸残基达到74%,中国株菜豆凝集素序列与马来西亚株菜豆凝集素相似度最高,进化树分析显示中国株菜豆凝集素其亲缘性追溯为发源于美洲(美国),经东南亚(马来西亚)传入中国,这与菜豆传入中国的历史相符合。