甘薯NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆、分析及数目研究

根据植物抗病基因保守序列设计特异引物,对甘薯高抗茎线虫病品种AB94078-1、感病品种徐18及其8个后代品系进行PCR扩增。获得15个具有完整氨基酸读码框的片段,均具有NBS类抗病蛋白4个保守基序,其中5个片段含LRR结构。利用从亲本AB94078-1扩增的R510-AB作为探针进行Southern杂交,结果表明,其在基因组中存在多个拷贝,并估计其在基因组中的拷贝数目,克隆新的甘薯RGA序列,为进一步获得甘薯抗病基因打下基础。

应用寡核苷酸探针检测甘薯基因组中NBS与LRR序列数目

以含编码NBS及LRR结构域序列的PCR扩增产物作标准对照,根据P-LOOP模体及LRR结构域氨基酸序列设计寡核苷酸探针,应用Southern杂交定量检测甘薯基因组中NBS与LRR序列的拷贝数目。结果表明,甘薯基因组中存在多个拷贝的NBS与LRR编码序列,经计算初步获得了其在基因组中的拷贝数目,为揭示甘薯抗病分子机制及植物抗病分子育种打下基础。

颗粒裂解肽G13结构域的表达及其对大肠杆菌活力的影响

目的构建携带颗粒裂解肽G13结构域的原核表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达目的蛋白,并检测其对大肠杆菌活力的影响。方法人工合成G13结构域编码DNA序列,PCR扩增后,用T-A克隆法与pBAD/TOPOThioFusion表达载体连接。通过PCR鉴定及测序筛选阳性重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经阿拉伯糖诱导表达,SDS-PAGE检测表达情况,同时监测诱导表达前后工程菌A600值的变化及菌液中的突变体。结果工程菌经诱导,表达出相对分子质量约15000的特异蛋白,表达量占菌体总蛋白的3%左右。随着外源蛋白的表达,菌液A600值下降,随后又缓慢上升。提取的质粒测序结果表明,其启动子的-35区和-10区均发生了突变,随着诱导时间的增加,突变细胞的比例不断增加。结论已成功构建了G13结构域原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达出G13融合蛋白。该异源蛋白的表达导致工程菌的活力降低。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的研究

高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)俗称蓝耳病,是由猪繁殖和呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性疫病,该病是一种免疫抑制病,其感染宿主唯一,且常常继发其他病原感染。PRRS发病时间间隔为2～37d,一般为5d左右,任何年龄、品种猪只均可发病。猪对很多PRRSV的感染途径敏感,包括口腔、鼻腔、肌肉、腹腔和生殖道。该病传染性高,并且只要有10个或者更少的病毒粒子,就可发生PRRS。疫苗免疫是预防PRRS的重要手段之一,目前有灭活疫苗和弱毒疫苗可供使用。针对高致病性猪蓝耳病的有效防控研究正在许多科研机构深入开展,能引起猪体对PRRSV产生保护性抗体的免疫原性基因的筛选、改造和利用等相关研究正加紧进行,以期研制一种安全高效的PRRS疫苗。

我国畜禽产品安全影响因素与防控措施

畜禽产品安全是食品安全的重要内容,畜禽产品安全问题不仅关乎人体健康,更关乎到畜禽养殖业的良性发展。基于近年来我国畜禽产品安全事件频发,在介绍了畜禽产品不安全造成的危害基础上,分析了影响我国畜禽产品安全的主要因素,并对我国畜禽食品安全问题提出了应对措施。

强制换羽对皖西白鹅产蛋率和孵化率影响的研究

[目的]研究强制换羽配合科学饲养对皖西白鹅产蛋率和孵化率的影响。[方法]皖西白鹅母鹅在第一茬蛋期结束后,有大约18d的恢复期,挑选出不产二茬蛋的母鹅100羽,进行强制换羽并配合科学控饲,以研究其二茬蛋的产量和孵化率;在鹅群中有90%的母鹅第一茬蛋期结束后并开始就巢时,挑选出母鹅100羽,进行强制换羽并配合科学控饲,研究母鹅二茬蛋产量和孵化率的变化。[结果]通过强制换羽后,原本不产二茬蛋的母鹅具备产蛋能力,母鹅鹅群的二茬蛋产蛋量及孵化率得到大幅提高,分别为10.1枚和81%,且产蛋期延迟30d左右。[结论]采取强制换羽配合相应的科学管理措施对皖西白鹅产蛋率和孵化率有明显提高。

狂犬病基因工程疫苗研究进展

狂犬病灭活疫苗在全球范围内广泛使用，然而灭活疫苗在安全性与稳定性等方面仍然存在诸多不足。近年来以基因工程原理和方法生产的狂犬病疫苗不断取得新的成果。基因工程狂犬病疫苗具有效价高、安全、经济等诸多优点，表达狂犬病病毒免疫蛋白的亚单位疫苗、重组病毒疫苗及核酸疫苗等几种狂犬病基因工程疫苗的研制开发，为更有效的预防与控制狂犬病提供了一条新途径。