基于PDTX模型研究原发性肺癌顺铂耐药与ERCC1 IGFBP5表达水平的关系

目的:构建PDTX(patient-derived tumor xenografts)肺癌模型,探索ERCC1、IGFBP5的表达水平与原发性肺癌顺铂耐药的关系。方法:取新鲜切除的84例肺癌组织移植于裸鼠(BALB/c)的皮下,构建PDTX模型,分析一代成瘤率与临床病理参数关系。三代移植瘤接受顺铂化疗,采用免疫组织化学方法检测敏感组和耐药组ERCC1、IGFBP5的表达情况。结果:移植瘤一代成瘤率32.14%(27/84),二代成瘤率88.89%(24/27),三代成瘤率95.83%(23/24),能否一代成瘤与肿瘤的大小、分化、分级、病理类型相关;此模型移植瘤在传代中能够保持亲代肿瘤的结构特征。ERCC1在耐药组表达高于敏感组,而IGFBP5在耐药组表达低于敏感组。结论:构建了肺癌组织块移植瘤模型,其能够保持亲代癌种的结构特征,是研究肺癌发生和探索肿瘤耐药机制的理想模型。原发性肺癌顺铂耐药性与ERCC1、IGFBP5的表达水平相关。

56℃30 min灭活病毒方法对输血检验的影响

目的探讨标本56℃30 min加热处理后对输血科常规检验的影响。方法收集本院临床科室送检的交叉配血标本40人份,每份标本均分为二,56℃30min加热处理前后标本的ABO血型检测采用手工法和卡式法(凝胶卡和玻璃珠卡),抗体效价的检测采用凝聚胺法,交叉配血采用抗球蛋白卡式法,通过卡方检验和秩和检验来比较2组数据(加热处理前后)的差异。结果实验组与对照组比较,手工试管法测出率为100%(40/40),凝胶卡和玻璃珠卡血型检出率为37.5%(15/40)和80%(32/40)(P<0.01);对照组和实验组血型效价几何均数分别为抗-A IgM型(14.936,10.556)、IgG型(3.563,4.489),抗B IgM型(9.849,10.556)、IgG型(5.039,4.489)(P>0.05);两组标本采用凝聚胺法与相应献血者标本交叉配血,相合率均为100%(40/40),抗球蛋白卡式法则分别为100%和25%(10/40)(P<0.01);实验组其他30例标本次侧均有弱凝集。结论 56℃加热30min灭活病毒的处理对试管法血型鉴定、抗体效价及凝聚胺法交叉配血结果影响甚小,同时又减少了输血科工作人员的职业暴露。

TAP63γ基因调节Col10a1基因表达及软骨细胞分化成熟

目的拟应用两种软骨细胞模型MCT和ATDC5细胞阐明TAP63γ基因如何调节十型胶原蛋白基因(Col10a1)基因表达及软骨细胞分化、成熟。方法应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测TAP63γ基因和Col10a1基因分别在增殖/肥大状态下小鼠MCT细胞和ATDC5细胞中的表达。应用基因转染,在MCT细胞和ATDC5细胞中过表达或抑制TAP63γ基因的表达,以研究其对Col10a1基因表达的调控作用。在细胞诱导培养的第4、7、14、21天,用阿尔新蓝染色、碱性磷酸酶染色和茜素红染色分别对稳定转染TAP63γ表达质粒的目的组和转染空载体pCMV的对照组及未转染的空白组进行染色,统计分析阳性染色面积,从而确定过表达TAP63γ基因在软骨细胞骨化期间给软骨内成骨所带来的影响。结果与增殖型软骨细胞比较,TAP63γ基因与Col10a1基因在MCT和ATDC5两种肥大型软骨细胞的相对表达量都明显升高(P<0.05)。在MCT细胞和ATDC5细胞中抑制TAP63γ基因的表达,结果导致Col10a1基因的相对表达量明显降低,而过表达TAP63γ基因则明显升高Col10a1基因的相对表达量。阿尔新蓝染色在诱导培养的第7天显示出最强的染色强度,但目的组与对照组没有明显差异;在诱导培养的第21天,碱性磷酸酶染色目的组比对照组显示出更强的染色强度,茜素红染色未见差异。结论TAP63γ基因与两种软骨细胞模型MCT和ATDC5细胞中Col10a1基因的表达一致,TAP63γ基因促进软骨细胞的成熟分化。TAP63γ基因可能与多种转录因子一起构成调节Col10a1基因表达的新型机制进而影响骨骼发育与疾病中软骨细胞成熟的进程。

人肺鳞癌组织在裸鼠体内的移植成瘤性与其Ki-67表达水平的关系

目的 ：构建人肺鳞癌组织的裸鼠移植模型,并探讨组织移植成瘤性与Ki-67表达水平的关系。方法 ：选取安徽省立医院胸外科2013年8月—2014年1月经手术切除获得的21例人肺鳞癌组织,1 h内移植于裸鼠皮下,观察成瘤情况,并回顾性比较移植成瘤组和未成瘤组对应患者的肿瘤特性。采用免疫组织化学法检测移植瘤和患者肿瘤组织中p63、细胞角蛋白5/6（cytokeratin 5/6,CK5/6）、甲状腺转录因子-1（thyoid transcription factor-1,TTF-1）和Ki-67的表达情况,并以组织化学评分（H-score）法进一步对Ki-67表达进行半定量分析。采用扩增阻滞突变系统（amplii cation refractory mutation system,ARMS）-PCR方法检测裸鼠移植瘤和患者肿瘤组织中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因第18-21外显子突变情况。结果 ：21例人肺鳞癌组织行裸鼠体内移植后有12例成瘤。裸鼠体内移植的成瘤性和患者肿瘤分化程度（Z=-2.821,P=0.005）及大小（Z=-2.809,P=0.005）有关。裸鼠移植瘤组织中p63、CK5/6、TTF-1和Ki-67表达情况以及EGFR基因突变情况均与来源患者的肺鳞癌组织相一致。裸鼠体内移植成瘤的相应患者肿瘤组织中Ki-67的H-score分值为2.76±0.54,显著高于未成瘤的患者肿瘤组织评分1.37±0.77,差异有统计学意义（t=4.855,P=0.001）。结论：成功构建了人肺鳞癌组织的裸鼠移植瘤模型,移植成瘤性与肿瘤组织中Ki-67表达水平有关,且移植瘤保留了患者肿瘤的基本生物学特性,提示该裸鼠移植瘤模型可为肺鳞癌的研究提供良好平台。

基于组织块法建立的移植瘤模型在肿瘤方面的研究进展

基于组织块法建立的移植瘤（PDTX）模型就是取患者的癌组织在免疫缺陷鼠体内增殖传代,培养出的肿瘤组织不仅保留了亲代肿瘤的生物学特征、染色体特征、肿瘤标志物等,还保留了亲代肿瘤的组织结构特征,更大程度的模拟人体内环境.此模型可用于评价抗肿瘤药物的疗效、探索抗肿瘤药物的耐药机制、分析生物标志物等,从而为患者提供个体化治疗方案.