灵芝CRZ1的亚细胞定位及其编码基因在子实体不同发育阶段的转录水平分析

克隆灵芝(Ganoderma lucidum)钙调磷酸酶响应锌指转录因子(calcineurin-responsive zinc finger transcription factor,CRZ1)的完整cDNA序列,测序表明其全长为1077 bp。对其进行原核表达后,凝胶电泳结果表明该蛋白的相对分子质量为3.9×10~4。通过cNLS Mapper进行氨基酸序列分析,预测第217~330个氨基酸为核定位信号区域。构建表达CRZ1-GFP融合蛋白的灵芝菌株,荧光检测发现,添加外源Ca~(2+),CRZ1-GFP融合蛋白聚集在灵芝菌丝体的细胞核内。对子实体不同发育阶段crz1的转录水平进行分析,发现从菌丝体到子实体的发育过程中,crz1的转录水平呈下降趋势。菌丝体、原基、子实体的crz1相对表达量分别为1、0.3、0.02,表明crz1可能参与灵芝子实体生长发育的调控。