构建松江区城乡居保基金管理风险防控长效机制的思考

近年来,上海市松江区社会保障工作按照市委、市政府的决策部署,坚持改革辟路、创新求实,唯实唯干、拼搏奋进,顺应人民对高品质生活的期待,适应经济社会发展和人民共同富裕的进程,不断推动各项民生事业取得新进展。松江区城乡居民基本养老保险现状。治国有常,利民为本。党的二十大报告指出“健全覆盖全民、统筹城乡、公平统一、安全规范、可持续的多层次社会保障体系,扩大社会保险覆盖面。要建成世界上规模最大的社会保障体系,人民群众获得感、幸福感、安全感更加充实,更有保障、更可持续,共同富裕取得新成效。”

毒素蛋白PE40的基因克隆及序列分析

细胞因子－受体介导的靶向杀伤作为导向治疗白血病与肿瘤的第二代新策略，是现代分子导向药物研究的最新领域之一。它是利用细胞因子与其受体的特异性结合来导向传递重组细胞因子－细菌外毒素融合蛋白以达到特异性杀伤高表达相应细胞因子受体的白血病及肿瘤细胞〔１～３〕...

HLA-A~*02等位基因分型技术及汉族HLA-A~*02多态性研究

建立高分辨率的套式ＰＣＲ－ＳＳＰ，对１７个ＨＬＡ－Ａ＊０２等位基因分型。利用国际标准分型细胞进行特异性鉴定，并在５４例Ａ＊０２阳性的无血缘关系汉族健康人中应用。共检测到５个Ａ＊０２亚型，显示出较高多态性：其中Ａ＊０２１１（ｎ＝２）首次在东方人群检测到；Ａ＊０２０１频率最高，占有４８．２％；其余依次为Ａ＊０２０６、Ａ＊０２０７和Ａ＊０２０３。套式ＰＣＲ－ＳＳＰ既适用于移植供体选择，又可用于人类进化研究。

造血干细胞移植中HLA-Ⅱ类基因分型影响因素的探讨

目的：为了准确地进行造血干细胞移植供－受体的ＨＬＡ－Ⅱ类配型，对ＨＬＡ－Ⅱ类基因分型实验的影响因素进行了探讨。方法：采用美国莱姆达公司提供的微量ＳＳＰ＾ＴＭＨＬＡ－Ⅱ类ＰＣＲ－ＳＳＰ分型试剂盒对４００例造血干细胞移植供－受体进行基因分型。结果：采用０．５％ＥＤＴＡ抗凝的血标本与肝素抗凝的血标本相比，前者的护增效果好。ＤＮＡ终浓度为２５～２００ｎｇ／ｕｌ，最佳浓度为１００ｎｇ／ｕｌ。

CD34^+造血细胞免疫磁性高效富集仪CMSI-100的研制及应用

根据免疫磁性分离原理 ,选用能产生高磁场强的磁性材料钕铁硼 ,其核心是将其设计成由低碳钢间隔的 4块钕铁硼 ,并且使每块钕铁硼的规格必须限制在 3.5cm× 2 .0cm× 0 .3cm ,以确保每块钕铁硼平面所具有的磁场强度平均可达 2 70 0高斯。当所切磨的钕铁硼规格达不到该标准时 ,由此产生的磁场强度 >2 70 0高斯或 <2 70 0高斯 ,对CD34+造血细胞的分离效果均不理想。经对人正常骨髓CD34+ 造血细胞的免疫磁性分离证实 ,采用CMSI 10 0富集后的CD34+ 造血细胞纯度平均 >90 % ,细胞活力 >95 % ,达到国际上最好水平 ,其性能完全可与国际通用先进的IsolexTM5

低分辨率和高分辨率HLA-Ⅱ类PCR-SSP基因分型在骨髓移植中的应用

为满足临床骨髓移植对HLA配型的要求，本研究采用先进、快速的DNA提取方法和低分辨率与高分辨率HLA-ⅡPCR—SSP分型方法，对150例临床骨髓移植供、受者进行HLA-Ⅱ类分型研究，并且对分型方法进行了改进，建立了随时间释放DNA聚合酶活性的分型方法。结果表明：DNA提取方法可以满足微量HLA-Ⅱ类DNA分型方法对DNA样本的要求，200μl全血DNA产量为4—12μg，A260／A280为1．7～1．9。低分辨率和高分辨率HLA-Ⅱ类PCR-SSP均具有良好稳定性、可靠性和准确性。低分辨率HLA-Ⅱ类PCR—SSP方法耗时1．5小时，适用于同胞兄弟姐妹间的骨髓移植配型。高分辨率HLA-Ⅱ类亚型PCR-SSP分型方法耗时2小时50分钟，适用于同胞兄弟姐妹间骨髓移植配型的特殊病例和无血缘关系骨髓移植供、受者间的配型。本研究的分型方法对于推动我国骨髓移植工作的开展和未来的发展均具有重要的意义。

不完全相合造血干细胞移植中GVHD的预测研究:模拟HLA抗原结构的比较与应用

采用通用的微量淋巴细胞毒实验和序列测定方法对拟进行造血干细胞移植的患者及供体进行HLA分型 ;用计算机分子模拟手段 ,从HLA分子三维结构方面探讨预测移植物抗宿主病 (GVHD)发生程度 ,以预测移植后GVHD的发生情况。结果发现 ,8例供受体中 ,3例为半匹配移植 ,其中 2例发生了Ⅳ度GVHD ,1例发生了Ⅱ度GVHD ;3例为两个抗原不相合移植 ,其中 1例发生了Ⅱ度GVHD ,2例发生了Ⅱ度GVHD ;2例患者为一个抗原不相合移植 ,分别发生了Ⅰ度、Ⅱ度GVHD ;GVHD的发生程度与HLA不相合抗原RMSD差异的大小呈正相关。提示异基因造血干细胞移植时 ,GVHD发生程度与HLA分子三维结构的差异有密切关系 。

IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力

目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6R在 8种极具代表性的人类白血病细胞系U937,HL 6 0 ,KG1,TF1,K5 6 2 ,CEM ,HuT2 8和Raji上的表达密度及亲和力 ,同时应用流式细胞术 (FACS)检测IL 6R的α和 β亚单位蛋白在这些白血病细胞上的表达。结果 :RBA表明 ,粒、单、红白血病细胞系HL 6 0 ,U937,KG1和TF1表面存在着高亲和力IL 6R ,平均IL 6R密度 /细胞分别为 2 5 0 2个 ,2 874个 ,2 319个及 932 9个 ,而淋系白血病细胞系CEM ,HuT2 8和Raji以及慢粒K5 6 2细胞系则未测到IL 6R。FACS显示 ,HL 6 0 ,KG1,U937和TF1均高表达IL 6R的α亚单位蛋白 ,而CEM ,HuT2 8及K5 6 2则不表达IL 6Rα亚单位蛋白 ;IL 6Rβ亚单位蛋白在U937,KG1,TF1,HuT2 8及CEM中呈阳性表达 ,而在HL 6 0 ,Raji和K5 6 2细胞中则为阴性。结论 :鉴于粒、单、红白血病细胞异常高表达IL 6R ,而淋系和慢粒白血病呈阴性表达这一事实 ,提示急非淋白血病可能更适合用重组IL 6 PE40外毒素融合蛋白进行IL 6 /IL 6R介导的靶向治疗。

HL-60细胞中IL6基因的克隆及鉴定

目的：为探索性构建重组人白细胞介素６－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＩＬ６－ＰＥ４０）以选择性杀伤高表达ＩＬ６受体（ＩＬ６Ｒ）的白血病细胞，本研究试图从人急性早幼粒细胞白血病细胞株（ＨＬ－６０）中克隆Ｎ－末端缺失２４个氨基酸的人ＩＬ６基因（ＩＬ６ｃＤＮＡ）并构建含此基因的重组质粒。方法：根据ＩＬ６基因序列设计合成可扩增ＩＬ６ｃＤＮＡ的特异性引物；利用基因重组技术，构建含ＩＬ６基因的重组质粒ｐＵＣ－ＩＬ６。结果与结论：本文首次从ＨＬ－６０中扩增出预期４８０ｂｐ的ＩＬ６ｃＤＮＡ，将其克隆至ｐＵＣ１８质粒中，命名为ｐＵＣ－ＩＬ６，并经ＥｃｏＲＩ／ＢａｍＨＩ双酶切电泳及序列分析鉴定加以确证，为进一步构建重组人ＩＬ６－ＰＥ４０奠定了坚实基础。

人B7-1和B7-2cDNA的克隆及鉴定

目的 :为探索性构建全新型重组人B7 PE40绿脓杆菌外毒素融合蛋白以长期诱导免疫耐受 ,本研究从急性B淋巴细胞白血病细胞株Raji中克隆N 末端分别缺失 34和 1 6个氨基酸的人B7 l和B7 2基因胞外区 ,并构建含此基因的重组质粒。方法 :根据B7 1和B7 2基因序列设计合成可扩增B7 1和B7 2cDNA的特异性引物 ,用RT PCR的方法从Raji细胞总RNA中扩增B7 1和B7 2cDNA ,并克隆至 pGEM T载体中 ,经酶切鉴定后再进行序列分析。结果和结论 :从Raji细胞中扩增出预期的 6 2 4和 6 75bp的B7 1和B7 2cDNA ,将其克隆至 pGEM T载体中 ,分别经EcoRI/HindⅢ和BamHI/Sphl双酶切电泳和序列分析确证 ,为进一步构建人B7

IL-6D_(24)- Linker-PE40重组毒素的分子生物学特性预测

目的：探讨重组毒素ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０融合蛋白及其接头设计的合理性。方法：应用核酸和蛋白质序列分析软件系统ＧＯＬＤＫＥＹ软件，对ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０重组毒素融合蛋白的柔性、抗原性、亲水性、表位等分子生物学特性进行计算机模拟预测，并做Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析进行验证。结果：ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０分别保留了ＩＬ６Ｄ２４和ＰＥ４０的表位特征，没有新的抗原表位出现，而且柔性接头处具有极低的抗原性。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析结果表明融合蛋白能分别与ＩＬ６和ＰＥＡ的单克隆抗体发生特异结合，这说明融合蛋白保留了ＩＬ６和ＰＥ４０的空间结构特征。

HLA-DRα*0101、DRβ1*04051和DRβ1*07011的分子克隆、测序及空间结构模建

目的 :为探索HLA(humanleukocyteantigens,HLA)不同分子的空间结构差异与功能之间的关系以及结构差异能否对预测造血干细胞移植GVHD(graft versus hostdisease ,GVHD)的发生奠定基础。方法 :提取人外周血总RNA ,RT PCR扩增HLA DR等位基因全序 ,连接、转化大肠杆菌后并测序。将第二外显子氨基酸序列输入微机 ,通过INTER NET传送至SWISS MODELLING蛋白质空间结构模建服务器进行结构模建。结果 :本文反转录了 2例健康无血缘关系个体的HLA DR位点基因全序 ,测序结果与HLA DRα 0 10 1、DRβ1 0 40 5 1和DRβ1 0 70 11的公布序列完全一致。对后两者的蛋白质空间结构模建发现它们在空间结构上存在显著差异。结论 :对HLA基因位点进行全长测序可以明确判断基因型别 ;空间结构模建可以直观地辨别HLA不同分子在空间结构上的差异 。

GVHD病因学的新视野:HLA分子三维结构研究

目的 :进一步探索GVHD的发病机理 ,提高临床移植疗效。方法 :采用国际通用的微量淋巴细胞毒试验和混合淋巴细胞培养方法 ;基因分型采用PCR SSP方法 ,对基因亚型进行DNA测序 ,再进行HLA三维结构模拟。结果 :① 4名骨髓移植患者中 ,例 1供 受体间HLA Ⅰ、Ⅱ类血清学分型相合 ,DQB1基因亚型不同 ,例 2、3、4均有 1个Ⅰ类抗原 (分别为HLA A、B和A)血清学分型不合和 1个基因亚型不同。HLA三维结构模拟例 1、3、4供 受者差别明显 ,骨髓移植后发生了Ⅲ～Ⅳ度GVHD ;例 2三维结构模拟差别不明显 ,仅发生Ⅰ度GVHD ;② 4个病例供 受体间HLA分子分别相差 14、17、2 0、12个氨基酸 ,相差数量与GVHD无相关性 ;3例重度GVHD供 受体的HLA分子三维结构均在抗原结合区的β转角处出现明显差异 ,而 1例轻度GVHD则无明显差异。 结论 :当异基因骨髓移植供 受体间HLA基因亚型不同时 ,移植后发生GVHD的程度与HLA分子三维结构差别大小有密切关系 ;三维结构的差别又与差异氨基酸所处的位置有关 ;GVHD与抗原氨基酸差别的数量多少没有直接关系。

CJ818客机尾翼周期电热除冰系统计算分析

针对CJ818客机尾翼的周期电热除冰系统进行计算分析,内容涉及尾翼的周期电热除冰系统的初步设计、加热条布置方式、外流场CFD计算、水滴撞击特性计算、防护范围以及加热条功率的确定等。计算了最佳加热功率时尾翼蒙皮在加热条中心上方和间隙上方的温度分布以及随时间的变化情况,并由此判断一定周期之后该周期电热除冰系统是否达到系统设计的要求。

HLA-A抗原的三维结构模型预测GVHD的发生<英文>

如何准确预测GVHD的发生始终是造血干细胞移植领域中十分棘手的难题。采用HLA抗原三维结构的模型来预测GVHD的发生是移植免疫研究的最新进展之一。我们在对17个移植家系进行筛选时，发现了一个供、受体HLA-A位点不合的家系，临床移植后该患者发生了Ⅳ级GVHD。本实验采用南分辨巢式PCR-SSP和DNA序列测定证实患者的HLA-A位点发生了重组(A^*6901→A^*0201)。进行蛋白质三维结构模型分析显示，供、受体差异抗原的空间构象存在明显差异。可能会成为移植后发生GVHD的分子基础，从而验证了我们的实验结果和理论推断。由此可见，该HLA抗原三维结构模型在预测GVHD的发生中具有重要意义。

在骨髓移植中人类白细胞抗原三维结构的差异引发移植物抗宿主病的研究

为进一步探索移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的发病机制，提高临床移植疗效。采用人类白细胞抗原（ＨＬＡ）分型方法，包括血清－细胞学、基因和基因亚型分型。血清－细胞学分型采用国际通用的微量淋巴细胞毒试验和混合淋巴细胞培养；基因分型采用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法，对基因亚型进行ＤＮＡ测序，再进行ＨＬＡ三维结构模拟。结果：①供－受体间ＨＬＡ－Ｉ、ＩＩ类血清学相合，组基因相合，基因亚型不同，但ＨＬＡ 三维结构模拟两者差别不明显，骨髓移植后仅发生了ＩＩ度ＧＶＨＤ； ②供－受体间ＨＬＡ－ＤＲ分子只差１ 个氨基酸，但基因亚型不同，供－受体间抗原三维结构差别明显，导致骨髓移植后发生ＩＶ度ＧＶＨＤ；③受体为ＨＬＡ－Ａ０２０１，供体为Ａ６８０１，二者血清学呈强交叉反应，其它位点均相合，移植后发生ＩＶ 度ＧＶＨＤ，后经ＨＬＡ三维结构模拟，两者差别明显。结论：当异基因骨髓移植供－受体间ＨＬＡ 基因亚型不同时，移植后ＧＶＨＤ的发生程度与ＨＬＡ分子三维结构差别大小有密切关系；三维结构的差别又与差异氨基酸所处的位置有关；

基因重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3融合蛋白在猕猴中的药代动力学

目的 研究重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素 3融合蛋白 (PIXY32 1)在猕猴中的药动学。方法 12 5I 标记结合反相高效液相和酸沉淀法。结果 12 5I PIXY32 1纯度为 94 5 % ,标记前后PIXY32 1对TF 1细胞增殖的ED50 分别为 0 12 5和 0 119μg·L-1。12 5I PIXY32 1在体内迅速降解。iv和sc后末端T1/ 2 相近 ,为 6 6～ 8 2h。AUC随sc剂量增大 ,全身清除率ClS 相近 ,sc生物利用度6 3 %± 2 1%。泌尿系统浓度最高 ,胆汁其次 ,骨髓和脾脏高于其它组织略低于血清 ,脑内最低。主要经尿排泄 ,少部分在尿中以原型排出。结论 猕猴sc12 5I PIXY32 12 0～ 80 μg·kg-1后为线性药代动力学。肾脏在12 5I PIXY32

幼仓鼠肾细胞表达重组人红细胞生成素在猕猴中的药动学

目的：研究幼仓鼠肾（ＢＨＫ）细胞表达红细胞生成素（ＥＰＯ）在猕猴体内的药动学。方法：ＥＬＩＳＡ法测定血清浓度。结果：ｉｖ２００ｕ·ｋｇ－１后符合二室开放模型，ｔ１／２α和ｔ１／２β分别为（１．８±０．３）ｈ和（１１．３±１．７）ｈ。ｓｃ５０，２００和８００ｕ·ｋｇ－１后符合一级吸收一室模型，ｔ１／２Ｋｅ分别为（１０．５±３．２）ｈ、（１０．０±１．３）ｈ和（７．４±１．０）ｈ，吸收速率受剂量限制，ｔ１／２Ｋａ分别为（０．４±０．４）ｈ，（１．１±０．６）ｈ和（１．９±０．６）ｈ（Ｆ＝８．２，Ｐ＜０．０５）。ｔｍａｘ分别为（３．０±１．２）ｈ，（４．０±０．０）ｈ和（５．５±１．９）ｈ。ＡＵＣ随剂量增加，Ｃｌｓ相近，生物利用度为０．６４。结论：ＥＰＯ体内总过程基本符合线性药动学。

论医患纠纷中医务人员权利的维护

我国卫生改革和发展面临诸多压力的新形势下。加强医院自律和维护医院合法权益，成为当前广大医院工作者和医务人员必须正视的问题。

关注教材插图细节 挖掘生物学教学资源

本文以苏教版初中生物学教材中的插图为例,指出插图细节部分在挖掘教学资源中的作用。