苯并[a]芘和慢性压力应激暴露对小鼠肝脏代谢的影响

环境污染和慢性压力是影响人类健康的两大类常见风险因子,本研究通过表征苯[a]并芘(benzo[a]pyrene,B[a]P)与慢性压力应激(chronic unpredictable mild stimulation,CUMS刺激)暴露对小鼠肝脏代谢的影响,并探讨了同时暴露时两大风险因子之间潜在的相互作用.采用靶向代谢组学结合多元统计学方法分析了两个剂量B[a]P(2.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)和20.0 mg·kg^(-1)·d^(-1))与CUMS刺激单独或联合暴露21 d后,雄性C57BL/6J小鼠肝脏中氨基酸代谢、TCA循环和胆汁酸代谢的变化.研究发现,2.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)B[a]P可使小鼠肝脏中精氨琥珀酸、精氨酸和丙氨酸显著升高,谷氨酰胺显著降低;20.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)B[a]P则主要导致丙氨酸显著上升,谷氨酰胺下降.慢性压力应激使小鼠肝脏同型半胱氨酸的含量显著下降. B[a]P与慢性压力应激同时暴露时,小鼠肝脏氨基酸和胆汁酸代谢会发生显著变化.进一步采用代谢扰乱度(metabolic effect level index,MELI)评估了两个风险因子的联合作用效果,发现2.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)B[a]P和慢性压力应激同时暴露对小鼠氨基酸代谢、TCA循环和胆汁酸代谢的影响分别为拮抗、协同和加和作用;而20 mg·kg^(-1)·d^(-1) B[a]P和慢性压力应激同时暴露的小鼠氨基酸代谢和胆汁酸代谢的影响均为加和作用,TCA循环为拮抗作用.结果表明,不同剂量的B[a]P和CUMS暴露造成小鼠肝脏氨基酸代谢和胆汁酸代谢紊乱,差异的代谢物与两者单独暴露时明显不同,且代谢的变化与B[a]P暴露剂量密切相关.

食醋中γ-氨基丁酸的检测及变化规律研究

目的建立快速准确检测高酸度食醋中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)含量的方法。方法建立高效液相色谱法检测食醋中GABA含量的方法并进行方法学验证,通过检测不同原料、酿造方法、发酵阶段、贮藏时间的32种食醋样品,分析GABA变化规律。结果该方法在0.01~1.00mg/m L范围内线性关系良好,R2为0.9992,精密度试验相对标准偏差小于2.0%,回收率在96.4%~103.0%之间,精密度和准确性均符合方法学要求。不同原料食醋的GABA含量差异显著(P<0.05),谷物醋含量最高;传统发酵工艺和菌种酿造的食醋GABA高于液体发酵、纯菌种发酵食醋(P<0.05);秋季醋GABA含量高于冬季醋(P<0.05);醋酸发酵阶段的GABA累积量高于酒精发酵(P<0.05),适当陈酿可提高产品中GABA含量;商品醋中GABA的衰减符合一级动力学反应;发芽糙米醋的GABA含量是未发芽糙米醋的2.29倍,是精米醋的4.73倍。结论所建立的检测方法GABA出峰时间为12min,分离度大于2,可快速、准确分析食醋中GABA。食醋中GABA含量与食醋原料、工艺、菌种、生产季节、贮藏时间等相关。以多种谷物或发芽谷物为原料,采用传统固态发酵工艺,秋季酿制,并适当延长陈酿时间有利于食醋中GABA的生成。

4种常用稳定剂和丝素蛋白对搅拌型酸奶黏度和保水性的影响

为改善丝素酸奶的品质,采用二因素三水平析因试验设计,考察4种常用稳定剂(果胶、黄原胶、海藻酸钠、耐酸性羧甲基纤维素钠(CMC))与丝素蛋白对搅拌型酸奶黏度、保水性的影响。结果显示:果胶、黄原胶、海藻酸钠和丝素蛋白对搅拌型酸奶的黏度均有极显著的影响(P<0.01),上述3种稳定剂和丝素蛋白对酸奶的黏度均有极显著的交互作用(P<0.01);果胶、黄原胶、耐酸性CMC和丝素蛋白对酸奶的保水性均有极显著的影响(P<0.01),其中黄原胶和丝素蛋白对酸奶的保水性有极显著的交互作用(P<0.01)。获得4个优化组合,分别为0.5%丝素蛋白和0.01%果胶,酸奶的黏度和保水性分别为903.8mPa.s、65.5%;1%丝素蛋白和0.03%黄原胶,酸奶的黏度和保水性分别为1196.2mPa.s、68.0%;1%丝素蛋白和0.03%海藻酸钠,酸奶的黏度和保水性分别为1320.6mPa.s、68.3%;0.5%丝素蛋白和0.05%酸性CMC,酸奶的黏度和保水性分别为962.1mPa.s、65.0%。

5-二十一烷基间苯二酚抑制α-葡萄糖苷酶活性的分子机制

小麦麸皮烷基间苯二酚可抑制α-葡萄糖苷酶活性,具有控制餐后高血糖的潜在作用,但是其作用分子机制尚未阐明。本实验采用荧光光谱、圆二色光谱以及分子对接技术研究小麦麸皮中含量最高的5-二十一烷基间苯二酚与α-葡萄糖苷酶的相互作用及抑制机制。结果显示,5-二十一烷基间苯二酚可使α-葡萄糖苷酶的内在荧光静态猝灭,不同温度(298、304、310 K)条件下结合常数K_A分别为149.8、46.2、20.3 L/mol;5-二十一烷基间苯二酚与酶分子结合降低酶分子结构中α-螺旋含量,增加β-折叠、β-转角以及无规卷曲含量;5-二十一烷基间苯二酚的苯环3—OH可与酶分子Tyr158的—COOH形成氢键,苯环5—OH的氢原子和氧原子分别与Lys156的—NH_2氢原子和Leu313的—COOH氧原子形成氢键,另外推测酶分子中Phe159、Pro312、Phe314、Asn415等氨基酸是与烷基间苯二酚形成疏水作用的重要位点。

一氧化氮供体SNP干扰NBT光化还原法测定小麦叶片SOD活性的消除

NO供体硝普钠、NO和NO-2 都会干扰NBT光化还原法测定小麦叶片SOD活性 。

外源NO供体对小麦离体叶片过氧化氢代谢的影响

分析了外源一氧化氮 (nitricoxide ,NO)供体硝普钠 (sodiumnitroprusside ,SNP)对离体小麦 (TriticumaestivumL .)叶片过氧化氢 (H2 O2 )含量及其清除酶活力的调节作用。不同浓度的SNP (1mmol/L和 5mmol/L)处理 3 0min内 ,离体小麦叶片H2 O2 含量均有一个显著上升的过程 ,同时过氧化物酶 (POD)活力受到显著抑制 ,而过氧化氢酶 (CAT)活力则轻微下降 ;处理 3 0min到 2 4 0min时 ,POD活力的抑制状态基本维持不变 ,而CAT活力开始恢复上升 ,H2 O2 含量也相应地开始下降。粗酶液的体外实验也表明 ,SNP对POD和CAT的抑制类型不同 ,前者可能是不可逆抑制 ,后者则可能是可逆抑制。因此NO可通过对POD和CAT的不同抑制作用来调节小麦叶片内源H2 O2

壳聚糖-甘油-丝素共混膜的制备及性能研究

采用流涎法制备壳聚糖-甘油-丝素共混膜,以膜的伸长强度和断裂伸长率为指标,考察各组分混配比例对膜性能的影响。结果显示:壳聚糖可增强膜的拉伸强度,但当壳聚糖浓度≥10g/L,膜的断裂伸长率出现下降;添加甘油可提高膜的拉伸强度和断裂伸长率;丝素蛋白的添加可使膜的拉伸强度略有上升,同时较明显地提升了断裂伸长率。进一步采用10g/L壳聚糖、10g/L甘油、0～20g/L丝素蛋白成膜,并考察其抑菌性能。结果表明:含5g/L丝素蛋白的共混膜即可完全抑制金黄色葡萄球菌的生长,含20g/L丝素蛋白的共混膜可完全抑制大肠杆菌的生长,丝素蛋白的添加大大提高了壳聚糖共混膜的抑菌性能。

壳聚糖的抑菌效果研究及其与苯甲酸钠的比较

考察了脱乙酰度和分子量对壳聚糖抑菌效果的影响，结果表明：随着脱乙酰度的增大，其对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌的抑菌效果增强；而分子量对其抑菌效果的影响则针对供试细菌的不同而有所不同，对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌抑制作用最强的分子量范围为50～100kDa，对大肠杆菌的则为10．50kDa。选择最适的抑菌条件，将壳聚糖的抑菌效果与苯甲酸钠进行对比，结果显示：壳聚糖的抑菌效果优于苯甲酸钠，在浓度达到0．25％时即可完全抑制上述四种细菌的生长。

小麦麸皮烷基间苯二酚抑制α-葡萄糖苷酶的构效关系研究

为了阐明两亲性酚类类脂烷基间苯二酚(alkyresorcinols,ARs)抑制α-葡萄糖苷酶的构效关系,以小麦麸皮ARs(C17∶0、C19∶0、C21∶0、C23∶0、C25∶0)为研究对象,测定其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制,并利用分子对接及LogP值分析软件初步研究了抑制活性差异的可能机制.结果表明,随着烷基侧链的增长,ARs的LogP值逐渐增加,对α-葡萄糖苷酶活性的抑制呈先上升后下降的变化,其中ARs(C19∶0)的抑制活性最强,IC50值为66.17μmol/L.ARs(C17∶0)通过亲水头部进入酶分子活性区,通过苯环羟基和酶分子Glu422形成氢键,而ARs(C19∶0)则是以疏水性尾部进入酶分子活性区,通过苯环羟基、酶分子Glu422及His423形成氢键,同时还存在疏水性氨基酸和烷基侧链之间的疏水作用;ARs(C21∶0)与酶的作用类似于ARs(C19∶0),但是苯环羟基仅和酶分子Glu422形成氢键,烷基链与酶分子的疏水作用则增强;ARs(C23∶0)和ARs(C25∶0)均未能在酶分子活性区域完成分子的对接.由此可知,ARs分子亲水、亲脂基团的平衡是影响其与酶分子相互作用及抑制活性的重要因素.

一氧化氮对小麦叶片老化过程的调节(英文)

用不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.50 mmol/L)的外源一氧化氮(nitric oxide,NO)供体硝普钠(sodiumnitroprusside,SNP)处理正常生长小麦(Triticum aestivum L.)叶片(二叶一心期时全展第一叶)。结果显示低浓度SNP(0.05、0.10、0.20 mmol/L)可以明显降低叶片H2O2和MDA的水平,其中0.10 mmol/L SNP的作用最为明显;而较高浓度SNP(0.50 mmol/L)则作用相反。进一步采用0.10 mmol/L SNP处理不同叶位的小麦叶片(四叶一心期),结果表明低浓度NO对不同老化阶段中叶片的H2O2、O2-.和MDA累积都有缓解作用,并明显减缓叶绿素、可溶性叶蛋白尤其是Rubisco的降解,有效延缓了叶片的老化进程。在完整叶绿体体外老化实验中也发现,不同浓度SNP(0.05、0.10、0.20、0.50、1.00、5.00 mmol/L)的作用同样表现双重性,其中0.20 mmol/L SNP对膜结构及Rubisco保护作用最明显。上述结果证实,低浓度外源NO可延缓小麦叶片的老化过程,并可能与其降低叶片活性氧(ROS)水平及缓解氧化损伤有关。

紫外诱变选育壳聚糖酶高产菌株的初步研究

以实验室筛选烟曲霉菌为出发菌株,采用紫外诱变的方法,选育出壳聚糖酶高产菌株4株CX01-7、CX01-8、CX01-18、CX01-22,酶活力分别为0.9557U/mL、0.8624U/mL、0.8628U/mL、0.8901U/mL,较出发菌株提高50.25%、36.30%、35.65%和39.95%。经连续传5代,菌株产酶活力稳定。

麦麸皮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

为深度开发麦麸资源,考察3种麦麸皮提取物对酵母和鼠源α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用,结果显示：水、95%乙醇、乙酸乙酯提取物的得率分别为12.24%、3.49%、1.44%,组间差异具有统计学意义（P〈0.01）。0.3mg/mL提取物对2种来源酶的抑制效果不同,抑制率分别为44.5%、56.4%、31.9%和26.3%、32.6%、26.8%,其半抑制浓度（IC50）分别为0.32、0.25、0.80和0.77、0.52、0.89mg/mL。选取抑制活性较好的95%乙醇提取物,针对与人体情况更为接近的鼠源α-葡萄糖苷酶,进一步考察其作用浓度和时间对抑制活性的影响,以及其抑制类型。结果表明：麦麸皮95%乙醇提取物是α-葡萄糖苷酶的竞争性抑制剂,抑制作用迅速,并呈现一定的剂量依赖关系。

天然产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选研究进展

综述天然产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的理化性质及其筛选方法。目前用于α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选的天然材料主要包括草药、海洋无脊椎动物、海藻以及一些药食两用的农产品。这些天然抑制剂的筛选主要以体外α-葡萄糖苷酶抑制活性为依据,分离纯化则主要经有机溶剂提取、分步萃取后,硅胶或大孔吸附树脂、凝胶过滤分离纯化,高效液相色谱、质谱、核磁共振等检测方法进行物质结构的鉴定。

壳聚糖酶的研究进展与应用现状

壳聚糖酶是以内切方式催化水解部分乙酰化壳聚糖中的β-1,4-氨基葡萄糖苷键的酶,其催化产物壳寡糖在调节植物生长、改善肠道微生物的种群分布、抑制肿瘤等方面具有良好的效果。本文对壳聚糖酶的来源、生产、分离纯化、理化性质及其固定化技术等方面的研究进展进行了综述,并从农业、食品工业、医药等领域展示了壳聚糖酶的巨大应用前景及其进一步开发利用的迫切性。

家蚕5龄幼虫蛋白质代谢研究初探

家蚕幼虫5龄期间蛋白质含量的变化约为体重变化的3倍,整个蚕体的蛋白质含量在第3和第4天之间有一个明显的突增。分析相应的蛋白水解酶活力变化,发现酶活力呈现先升后降的变化趋势,在第4和第5天时活力达到峰值。进一步提取血液、消化液以及脂肪体蛋白水解酶进行研究,结果表明血液和消化液蛋白水解酶的活力变化与蚕体消化、吸收和转化桑叶蛋白的生理进程基本一致。

蚕蛹醇提物萃取组分对α-葡萄糖苷酶的抑制动力学研究

为了有效利用缫丝蚕蛹的功能性成分开发高附加值的降血糖药物,采用95%乙醇浸提蚕蛹活性物质,并依次选用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇对蚕蛹醇提物进行梯度极性溶剂萃取,获得不同萃取组分及水相组分。测定各相萃取组分对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性,结果显示:当石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取组分及水相组分的质量浓度为0.33mg/mL时,各相萃取组分对α-葡萄糖苷酶的体外抑制率分别为100%、58%、38.1%、36.93%、21.53%;各相萃取组分对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50)分别为0.049、0.272、0.434、0.645、0.449 mg/mL。选择对α-葡萄糖苷酶抑制活性较强的石油醚相和乙醚相萃取组分,采用双倒数作图法检测其抑制作用类型均属于非竞争性抑制。

纳洛酮减弱白细胞介素-2对大鼠心肌的抑制作用

目的 :研究白细胞介素 - 2 (IL - 2 )的心脏作用并探讨其相关机制。方法 :采用视频跟踪系统测定大鼠单个心室肌细胞的收缩 ;细胞内双波长钙荧光系统检测细胞内游离钙离子浓度 ;应用 Langendorff灌流装置 ,观察 IL - 2对完整心脏收缩力学的影响。结果 :与对照相比 ,IL - 2 (5、5 0 U/ml)显著抑制单个心室肌细胞的收缩幅度 [(74 .95±4 .79vs98.0 9± 5 .0 2 ) % ,(6 4.30± 5 .2 4 vs97.38± 4 .0 5 ) % ]、最大收缩速度 [(70 .2 3± 4 .85 vs98.0 9± 5 .4 6 ) % ,(6 1.15± 5 .2 0 vs97.38± 6 .85 ) % ]、最大舒张速度 [(71.2 2± 4 .79vs98.32± 6 .0 8) % ,(6 8.16± 5 .2 4 vs97.5 5±5 .0 0 ) % ]和舒张末细胞长度 [(88.2 8± 5 .84 vs97.95± 5 .5 2 ) % ,(84 .18± 6 .5 2 vs98.94± 6 .76 ) % ];IL- 2 (5、5 0 U/ml)显著降低电刺激诱导的心肌细胞内钙瞬变幅度 [(74 .94± 4 .90 vs98.0 9± 3.74 ) % ,(71.0 0± 5 .2 8vs97.38±5 .5 2 ) % ],使舒张末钙水平升高 [(113.91± 5 .93vs10 0 .10± 3.0 2 ) % ,(119.0 9± 7.12 vs10 0 .5 2± 6 .0 0 ) % ]。阿片受体阻断剂纳洛酮 (10 nmol/L)可阻断 IL- 2对心肌细胞收缩和细胞内钙的作用。在离体心脏 ,与对照相比 ,IL- 2 (5 0U/ml)

家蚕5龄幼虫蛋白水解酶的最适反应温度和pH值

调查了家蚕(华峰×雪松)5龄幼虫的血液、消化液以及脂肪体蛋白水解酶的反应条件,发现其最适反应温度均在37 ℃左右,最适反应pH分别为8.0、9.8和6.8左右.血液蛋白水解酶在pH 6.8～9.8之间其活力变化不大.

家蚕丝素固定化单宁酶的研究

以家蚕丝素为载体,采用交联-吸附法固定化单宁酶。正交试验结果表明,最佳的固定化条件为戊二醛浓度为0.45%,固定化pH值为5.0,给酶量15mg/g载体,固定化时间9 h,固定化温度10℃。与游离酶相比,该固定化单宁酶的热稳定性明显提高,25℃贮存6d后酶活仍保持57.5%。以没食子酸甲酯为底物,固定化单宁酶经连续6次酶促反应后,酶活仍保持77.4%。

外源壳聚糖对离体桑树叶片防御酶系及其他相关抗性指标的影响

分别取3个桑树品种湖桑32号、育71-1、金10的叶片,采用0.025%、0.05%、0.075%、0.1%、0.125%的壳聚糖离体处理2 h,测定叶片中防御酶系及其他相关抗性指标的变化。结果显示:3个桑树品种的叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活力均随着壳聚糖浓度的增大而呈现先上升后下降的变化趋势,但是不同品种对于外源壳聚糖的反应有所不同,活力出现最大值的壳聚糖浓度也有所不同,三者的抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活力均基本无变化;与对照相比,在0.025%～0.1%壳聚糖处理的离体叶片中膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的含量都略有降低,游离脯氨酸的含量则有所增加。