一组泛耐药铜绿假单胞菌耐药相关基因的样本聚类分析

目的:调查一组泛耐药铜绿假单胞菌菌株间的亲缘关系。方法:收集2010年1-12月绍兴第二医院住院患者痰液标本中分离到的泛耐药铜绿假单胞菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析31种β-内酰胺酶基因以及膜孔蛋白oprD2基因,14种氨基糖苷类修饰酶基因,7种16SrRNA甲基化酶基因和7种可移动遗传元件遗传标志,再对检测结果作样本聚类分析。结果:20株泛耐药铜绿假单胞菌共检出5种β-内酰胺类耐药相关基因(TEM-1、CARB、KPC、OXA-10群、oprD2突变),5种氨基糖苷类耐药相关基因[aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、rmtB],4种可移动遗传元件的遗传标志(intⅠ1、tnp513、IS26、merA)。样本聚类分析把本组菌分为4个可操作分类单元。其中2号株簇群包含了16个成员均携带了TEM、CARB、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ、rmtB、intⅠ1、tnp513、IS26、merA基因,并存在oprD2缺失,为克隆传播暴发。结论:尽管本组泛耐药铜绿假单胞菌菌株药敏表型相同,但样本聚类分析仍可分辨出4个可操作分类单元,其中2号株簇群为克隆传播暴发。获得菌株之间的亲缘关系对院内感染实时监测和控制院内感染意义重大。

乙型肝炎病毒携带者外周血T淋巴细胞亚群测定

本文对我院传染科门诊84例乙型肝炎病毒携带者进行外周血T细胞亚群检测,以了解这类人群细胞免疫功能的变化。 资料与方法 一、观察对象 84例乙型肝炎病毒携带者均为1995年3月至1998年6月在本院门诊就诊者,男65例,女19例,平均年龄30.05岁。所有病例均HBsAg(+),肝功能检查正常。于两周内分别或同时检测乙型肝炎病毒血清标志物和T淋巴细胞亚群。分为1组:HBV DNA(+)和HBeAg(+);2组:HBV DNA(+)和抗-HBe(+);3组:HBV DNA(-)

尿成份对电导率和渗透压的影响

目的了解尿成份改变对电导率和渗透压的影响。方法500例标本配对用UF-100尿沉渣分析仪测定电导率和冰点渗透压仪测定渗透压。两法同时测定含不同浓度红细胞、葡萄糖、尿素、甘露醇、造影剂、电解质标本各20份。结果渗透压和电导率的回归方程是Y=33.25X+52.195,γ=0.891,P<0.01。红细胞、盐类结晶、葡萄糖、造影剂对电导率无影响(P>0.05);电导率随尿素、甘露醇浓度的增加而降低;随电解质浓度的增加而增高。红细胞对渗透压无影响(P>0.05),渗透压随葡萄糖、造影剂、尿素、甘露醇、电解质浓度的增加而增加,盐类结晶溶解前后的渗透压差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿成份改变对渗透压和电导率的影响不同,评价肾脏浓缩稀释功能时应注意。

扩散法药敏试验六种影响因素的实验评价及控制

本文对影响扩散法药敏试验的六种常见因素分别进行了实验评价.其中预孵育时间、接种菌悬液浓度、培养基厚度和琼脂浓度均与抑菌环(mm)呈直线或自然对数负相关(P<0.01).药敏纸片的含药量在规定标量的10～15%范围内,和抑菌环之间呈高度的自然对数正相关(P<0.01),提示在制备药敏纸片时抗菌素宜稍高于其标量.培养基pH 是常见的误差因素,pH7.4±1.0范围内,丁胺卡那、头孢噻肟、红霉素和四环素对金葡菌ATCC25923的抑菌环差值分别高达7.8、8、9和10mm.根据各因素与抑菌环的定量关系并结合实际工作环节,认为各误差项的排列依次为:培养基pH、纸片含药量、接种菌悬液浓度、预孵育时间、培养基厚度和琼脂浓度.本实验评价及结论有助于提高对方法学标准化的认识,并对药敏试验的全面质量控制具有指导意义.

邻-甲联苯胺法测定血浆游离血红蛋白的基质效应及消除方法

目的研究邻-甲联苯胺法(经典方法)测定血浆游离血红蛋白(Hb)的基质效应及消除方法。方法以用生理盐水1 000倍稀释的Hb储存液(浓度为103.1 g/L)作为标准液,将此Hb标准液再用无Hb血浆分别稀释500、1 000、2 000、4 000倍(游离Hb理论浓度分别为206.20、103.10、51.55、25.78 mg/L),然后用经典方法测定游离Hb浓度,比较与理论值的差异。将Hb储存液分别用生理盐水(经典方法)、无Hb血浆(消除方法 1)、混合血浆(消除方法 2)1 000倍稀释作为标准液。经典方法和消除方法 1的计算公式为血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度(A)值×标准液浓度÷标准管A值;消除方法 2的计算公式为血浆游离Hb(mg/L)=测定管A值×标准液浓度÷(标准管A值×混合血浆A值);消除方法 3操作同经典方法,计算公式为血浆游离Hb(mg/L)=测定管A值×标准液浓度×2.35÷标准管A值。测定40份标本,比较各消除方法的结果。在血浆中分别加入206.20、103.10、51.55 mg/L Hb,测定各消除方法的回收率。分别取6.25、12.50、25.00、50.00μg/L维生素C溶液4.5 m L,各加1.031 g/L Hb标准液0.5 m L,用经典方法测定回收率。结果采用无Hb血浆500、1 000、2 000、4 000倍稀释的Hb标准液的游离Hb测定结果分别为87.85、43.16、21.90、10.99 mg/L。40份标本采用经典方法、消除方法 1、消除方法 2、消除方法 3测定的游离Hb浓度分别为(7.99±4.90)、(18.61±11.42)、(19.18±11.77)、(18.77±11.52)mg/L;消除方法 1、消除方法 2、消除方法 3的结果均高于经典方法(P均<0.01),但3种消除方法之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。经典方法、消除方法1、消除方法 2、消除方法 3的平均回收率分别为42.54%、98.33%、100.98%、97.56%。采用经典方法检测Hb在6.25、12.50、25.00、50.00μg/L维生素C溶液中的回收率分别为98.57%、98.17%、97.17%、95.16%。结论邻-甲联苯胺法测定血浆游离Hb存在基质效应,3种消除方法均可消除基质效应影响。

泛耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶与16SrRNA甲基化酶基因检测研究

目的研究泛耐药铜绿假单胞菌对氨基糖苷类的耐药机制,以指导临床合理使用抗菌药物,降低细菌耐药性的产生。方法收集2010年1-12月浙江绍兴第二医院住院患者痰液标本中分离到的泛耐药铜绿假单胞菌共20株,用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析14种氨基糖苷类修饰酶基因与7种16SrRNA甲基化酶基因。结果 20株铜绿假单胞菌均检测到aac(6′)-Ⅱ及rmtB基因,检出率100.0%;17株检测到aac(6′)-Ⅰb,检出率85.0%;18株检测到ant(2″)-Ⅰ,检出率90.0%;2株检测到ant(3″)-Ⅰ,检出率10.0%。结论 aac(6′)-Ⅱ型氨基糖苷类修饰酶与rmtB型16SrRNA甲基化酶基因流行是泛耐药铜绿假单胞菌对氨基糖苷类耐药的重要原因。

国内首次从泛耐药铜绿假单胞菌中检出KPC型β-内酰胺酶基因

目的调查一组泛耐药铜绿假单胞菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在情况。方法收集2010年1-12月浙江绍兴第二医院住院患者痰液标本中分离到的泛耐药铜绿假单胞菌共20株,用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析15种A类β-内酰胺酶基因、10种B类β-内酰胺酶基因、2种C类β-内酰胺酶基因、4种D类β-内酰胺酶基因检测以及膜孔蛋白oprD2基因。结果 20株泛耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶基因检出率,TEM为90.0%、CARB为100.0%、KPC为5.0%(经测序和BLASTn比对,确认为KPC-2型)、OXA-10群为10.0%,膜孔蛋白oprD2基因均为缺失。结论 20株泛耐药铜绿假单胞菌均存在产β-内酰胺酶和膜孔蛋白缺失是对β-内酰胺类药物耐药的重要原因;从泛耐药铜绿假单胞菌中查出KPC型β-内酰胺酶基因是国内外首次报道。

绍兴地区女性高危型人乳头状瘤病毒感染的流行病学调查

目的了解绍兴地区女性高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染的最新流行趋势和亚型分布情况,为宫颈癌的防治提供数据支持。方法收集2016年1月-2018年12月来本院检查或就诊的门诊、住院和体检女性标本9 174例,按年龄分为青年组(≤35岁) 2 764例、中年组(36岁~59岁) 5 855例、老年组(≥60岁) 555例3组。采用荧光定量PCR法检测HPV 15种高危型,用SPSS 25.0软件分析结果。结果共收集标本9 174例,HPV阳性标本1 390例,阳性率为15.15%;3年间HPV阳性率呈上升趋势,分别为9.37%(208/2 220)、15.08%(493/3 270)、18.70%(689/3 684)(χ趋势^2=92.140,P <0.01)。年龄分布以中年为主(占59.50%),感染亚型分布以单一感染为主(占79.14%),高危亚型以HPV52(占28.71%)、HPV16(占18.20%)、HPV58(占17.77%)为主。结论绍兴地区HPV52阳性率最高与本地区早期调查以及其他地区的研究结果不同。另外,HPV阳性率在2016年-2018年呈递增的趋势,应加强预防治疗措施。