DHA介导GPR40转染PC12细胞内的钙离子动员

目的构建GPR40基因质粒转染PC12细胞，用DHA干预后测定细胞内Ca^2＋浓度的变化，从而探讨DHA通过GPR40信号途径介导Ca^2＋上调的作用机制。方法将PC12细胞分成4组，分别为未转染组，空载体转染组，GPR40基因-pCruz载体转染组及GPR40基因-pCruz载体转染＋阻制剂Xestospongin C组；构建大鼠GPR40质粒并转染PC12细胞。采用RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白质水平观察GPR40的表达。DHA（10μmol／L）干预后，测定细胞内Ca^2＋浓度。结果DHA干预后，未转染组和空转染组PC12细胞内Ca^2＋浓度没有受到明显影响；GPR40基因-pCruz载体转染组细胞内的Ca^2＋浓度明显增加，且这种作用不受细胞外Ca^2＋浓度的影响：添加阻滞剂组Ca^2＋浓度变化也不明显。结论DHA能动员GPR40基因转染的PC12细胞内Ca^2＋浓度且这种作用完全能被IP3受体特异性阻止剂Xestospongin C所阻断，提示DHA可能通过GPR40信号途径动员细胞内Ca^2＋浓度并因此改善神经功能。