N^(6)-腺苷甲基化修饰及其对LINE-1的调控机制

长散布元件-1(long interspersed elements-1,LINE-1)是现今在人类基因组中唯一具有自主转座能力的转座子,其转座会引起细胞基因组结构和功能的改变,是导致多种严重疾病的重要因素。在转座过程中,LINE-1 mRNA是转座中间体的核心,宿主细胞对其进行相关修饰直接影响转座。N^(6)-腺苷甲基化修饰(m^(6)A)是真核细胞RNA上最丰富且动态可逆的表观遗传修饰。目前发现m^(6)A修饰也存在于LINE-1 mRNA上,参与LINE-1整个生命周期的调控,影响其转座和基因组中LINE-1相邻基因的表达,进而影响基因组稳定性、细胞自我更新与分化潜能,在人类发育和疾病中具有重要作用。本文介绍了LINE-1 m^(6)A修饰的位置、功能以及相关机制,并总结了LINE-1的m^(6)A修饰对其转座调控的研究进展,以期为相关疾病发生发展的机制研究和治疗提供新的思路。

波形蛋白在病毒感染过程中相关功能的研究进展

病毒性疾病的暴发日益频繁,促使人们积极研究不同病毒的分子生物学机制。病毒是专性细胞内寄生的病原体,依赖宿主细胞的酶系统、原料和能量进行复制和传播[1]。它们在感染过程中的发病机制一方面取决于病毒颗粒上的特定效应分子,另一方面取决于宿主细胞上的特定受体。宿主细胞骨架是指真核细胞中的蛋白纤维网架体系,主要由微管(MT)、微丝(MF)及中间纤维(IF)组成[2]。其中波形蛋白是III型细胞骨架中间纤维的一种,主要在间充质来源的细胞中表达,因此,它主要存在于成纤维细胞、内皮细胞和免疫系统细胞中[3]。波形蛋白的分布借助了与微丝、微管蛋白的相互作用从核周延伸到细胞膜,在细胞结构和动力学中起着关键作用。一方面,波形蛋白与其他细胞骨架相互作用并调节其功能,充当细胞机械功能的调控者,包括细胞迁移、分裂等[4-6]。另一方面,波形蛋白通过调控几种丝裂原活化蛋白(MAP)激酶的定位和活性、脂质代谢以及基因表达等,从而在细胞信号传导中起重要作用[7]。越来越多的研究表明,波形蛋白对于病毒感染至关重要[8-12]。在这篇综述中,我们详细介绍了波形蛋白在病毒感染各阶段的功能,包括病毒的进入、运输、复制、组装和释放。此外,我们还为靶向波形蛋白提供了一个新的视角,包括抗体或化学药物可以通过调节病毒-波形蛋白相互作用,以潜在地干扰病毒的发病机制。

脂肽类抗生素Daptomycin

daptomycin(LY146032)是 20世纪 80年代才发展起来的一种新的酸性脂肽类半合成抗生素,是A21978C的N-癸酰基衍生物,A21978C的产生菌是玫瑰抱链霉菌(S.rose-osporus NRRL 11379),该菌共产生5种结构类似物 A21978A、B、C、D、E.A21978C为主要组份,活性也最强.daptomycin具有脂肽类抗生素典型的化学结构:一个由13个氨基酸构成的环状肽和10碳的脂肪酸链,其结构式见图1.

人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮细胞恶性转化的研究

为了研究病毒和促癌物在食管癌形成中的作用，用带有人乳头状瘤病毒１８型Ｅ６Ｅ７片段的载体腺病毒（简称ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ）感染人胚食管上皮细胞，然后加ＴＰＡ协同作用，观察细胞转化。将人胚食管切碎，与ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ同孵育２小时，在加有１０％小牛血清的１９９培养液培养和传代，形成永生化细胞株，即人胚食管上皮细胞汕头株（ＳＨＥＥ）。实验分两组：一组ＳＨＥＥ细胞在传代至第５和１３代时，两次在培养基中加入ＴＰＡ（１２Ｏｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ１３ａｃｅｔａｔｅ）５ｎｇ／ｍｌ，每次诱导２周，所获得的细胞株称为人胚食管上皮癌细胞汕头株１号（ＳＨＥＥＣ１）；另一组ＳＨＥＥ细胞培养条件相同，未加ＴＰＡ，为对照组。细胞转化的形态表型由光学显微镜、电子显微镜和荧光显微镜检查；ＤＮＡ含量和细胞周期用流式细胞仪检测；用３５ｍｍ软琼脂培养皿接种１０３细胞（第２０代），每组５碟，计算集落形成率；裸鼠皮下接种１０６细胞检测致瘤性；用荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）和ＰＣＲ检测ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７。结果表明：细胞ＤＮＡ合成和增殖指数（ＰＩｘ），ＳＨＥＥＣ１组（４５％）高于ＳＨＥＥ组（３４％）；高倍体细胞数，ＳＨＥ?

抗结核一线药物及结核分枝杆菌的耐药分子机制

近年来涌现出了耐多药结核病(Multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)/广泛耐药结核病(Extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB)。MDR-TB是指由耐异烟肼和利福平两种或以上抗结核药物的结核分枝杆菌引起的结核病。XDR-TB是指不仅对一线抗结核药物耐药,而且对主要的二线抗结核药物中的至少3种也耐药的结核分枝杆菌引起的结核病。抗结核的一线药物分别为异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、链霉素和乙胺丁醇。与异烟肼的耐药相关的基因主要有katG,inhA等。它们的突变会引起结核分枝杆菌对异烟肼的耐药。rpoB、pncA及embB基因的突变分别是导致结核分枝杆菌对利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇产生耐药性的主要原因。耐链霉素的结核菌主要突变基因rpsL基因,其次是rrs基因,它们的突变也会导致耐药性的产生。对药物耐药机制的深入研究极大地推动了抗结核药物的研发及化学治疗方案的发展。

以脂磷壁酸为靶点的新抗筛选模型的建立和应用

目的 :根据达托霉素的作用机制 ,寻找与糖肽类抗生素无交叉耐药性的新抗生素。方法 :本实验建立了以脂磷壁酸为靶点的新抗筛选模型 ,并通过脂磷壁酸合成抑制模型对所筛得的阳性菌株进行复筛验证。结果 :从 12 0 0株放线菌中筛选到 2株阳性菌株 ,初步证明其抗菌活性显示出Ca2 + 依赖性 ,并在脂磷壁酸合成抑制模型上显示一定的抑制活性。结论 :阳性菌株 15 10和 16 15活性成分对MRSA等细菌具有良好的抗菌活性 ,值得深入研究。

PD-1/PD-L1/PD-L2小分子抑制剂的研究进展

据世界卫生组织相关数据显示,全球每年大约有880万人死于恶性肿瘤,且增长态势显著,对人类健康造成了严重的威胁。研究显示免疫系统在人体自身稳态的维持中起着关键性作用,特别是近十年来随着较多肿瘤免疫药物被FDA批准上市,该疗法已成为肿瘤治疗领域的焦点。因此,2013年《科学》将其选为当年＂最重要的突破＂,2015年又将肿瘤免疫联合治疗列为＂最值得关注的四项科学进展＂之一。

新形势下医药科研院所产学研一体化的探讨

随着我国事业单位改革工作不断深化,处在转型过渡期的医药科研院所,需要通过加强产学研一体化,以实现可持续发展。目前,科研立项缺乏市场调研,科技转化吸引资金难度大,复合型人才缺乏。以上因素制约了医药科研院所产学研一体化。结合国外的经验,分析医药科研院所的优势与面临的挑战,通过创新药物占领市场,多渠道加强复合型人才的建设,与市场需求准确对接,以及借助"外脑"开发引资,加快产学研一体化的进程。产学研互相促进,进而达到社会效益和经济效益的双丰收。

人乳头状瘤病毒协同^(60)钴照射促进食管上皮细胞恶性转化

为探明人乳头状瘤病毒(HPV)和促癌剂对食管上皮致癌作用,人胚食管上皮细胞转染HPV协同60钴(60Co)放射观察其恶性转化。用HPV18E6E7AAV转染的人胚食管上皮(SHEE),培养至13代,分为4组,实验组分别用60Co2、4、8Gy照射,每周1次共4周;SHEE未经照射为对照组。细胞形态用相差显微镜观察;细胞DNA合成和定量用3H TdR掺入和用流式细胞仪分析;染色体众数用常规方法分析;致瘤性用软琼脂培养和裸小鼠接种;HPVDNA用PCR检测。经60Co照射后细胞呈凋亡和坏死(危象期)。8周后SHEE4Gy组细胞增殖,增殖指数(34%)和3H TdR摄入增高,软琼脂培养和裸鼠接种出现致瘤性。对照组SHEE组细胞增殖指数24%,伴有少数3H TdR掺入,裸鼠未成瘤。染色体众数:对照组,58～62;4Gy组,63～65;两组HPV18E6E7PCR呈阳性条带。此结果表明,用HPV18E6E7协同60Coγ射线可以使人胚食管上皮恶性转化,60Coγ射线有加速食管上皮细胞恶性转化作用。

HIV-1初始传播病毒Vpr基因遗传变异对诱导G_2期阻滞及细胞凋亡的影响

人免疫缺陷病毒(HIV-1)急性感染过程中,病毒的遗传多样性显著减少,往往只有一株或几株病毒可以建立有效感染,这种病毒被称为初始传播病毒(Transmitted/Founder virus)。病毒蛋白R(Vpr)是HIV-1的辅助蛋白之一,在病毒复制过程中起重要作用。研究初始传播病毒Vpr基因遗传变异与生物学特征对于阐明病毒建立感染的关键环节具有重要意义。文章利用流式细胞术分析了C亚型HIV-1初始传播病毒株与慢性感染株MJ4的Vpr蛋白诱导细胞G2期阻滞和细胞凋亡的能力。结果显示,初始传播病毒ZM246和ZM247的Vpr诱导细胞G2期阻滞和细胞凋亡的能力显著高于慢性感染株MJ4 Vpr。氨基酸序列分析表明,初始传播病毒Vpr在第77、85和94位上存在高频突变。研究结果提示初始传播病毒可能在病毒感染早期,通过Vpr基因的遗传突变,提升病毒诱导细胞停滞G2期和细胞凋亡的能力,进而促进病毒在宿主体内的复制和传播。

新型siRNA抗流感病毒活性的研究

目的设计合成具有广谱性抗流感病毒活性的siRNA,分别在细胞内和小鼠体内进行活性评价。方法从甲型流感病毒毒株A/WSN/33的基因(PB2、PB1、PA、M、NS)中提取高度保守的序列设计合成siRNA。通过293T-Gluc系统和单轮感染流感病毒系统对siRNA进行活性筛选。然后在细胞水平检测siRNA对流感病毒复制的抑制作用,并且经雾化给药途径对siRNA的体内抗流感活性进行评价。结果活性筛选得到4条具有50%以上抑制活性的siRNA(siPB2-1、siPB2-2、siPB1-2和siNS-1),EC50值在0.4~1.3 nmol/L之间。4条siRNA对另外两株A/PR/8/34和B/Beijinghaidian/1386/2013(Victoria系)流感病毒均表现出较好的抑制活性。动物实验表明,siPB2-1经雾化给药途径可以对流感病毒感染的小鼠产生一定的保护作用。结论新合成的siRNA在细胞水平和小鼠体内均具有良好的抗流感病毒活性。

中洛线断裂管材的机械性能分析

中洛线濮阳出站处管道发生断裂,为此进行了系列机械性能测试。单向拉伸试验结果表明,尽管管材的屈服与强度极限数值较高,但塑性较差,在应力-应变曲线中并没有表现出明显的屈服阶段,焊缝处材料明显呈现脆性。管材的冲击韧性最大值仅为50.30J/cm2,韧性较差;焊缝处韧脆转变温度在15～20℃之间,明显偏高;试样的断口和金相分析等均表明焊缝处管材具有很高的脆性。

“病原微生物遗传学研究进展专刊”编者寄语

在整个人类文明史上，微生物与人类如影随形，恩怨情仇不断。作为人类的朋友，微生物为我们的奶酪、面包、泡菜、啤酒、葡萄酒、抗生素以及免疫系统的发育等提供了重要的资源和动力。另一方面，人类文明的发展史浓缩了与瘟疫的历次战役，如鼠疫、霍乱、流感、非典、埃博拉等。

人类免疫缺陷病毒初始传播病毒的鉴别及其表型特征

人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)简称艾滋病病毒,在粘膜传播过程中,病毒的遗传多样性是显著减少的。绝大多数的HIV-1粘膜感染由一个或者少数几个病毒建立并最终发展为系统感染,上述病毒称为初始传播病毒(Transmitted/founder virus,T/F virus)。通过对初始传播病毒表型特征的研究,可进一步了解病毒在新宿主体内成功复制的关键特性,为艾滋病疫苗的发展、暴露前预防及其他治疗性干预措施提供更好的策略。文章综述了初始传播病毒的发现、进化特征以及感染后初期宿主的免疫反应等,以期为深入研究初始传播病毒的特征提供理论基础。

以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒的构建

目的构建以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒用于药物作用机制的快速鉴别。方法通过使用分泌型荧光素酶(Gluc)序列替代流感病毒HA基因,并利用表达质粒反式提供HA蛋白,借助甲型流感病毒WSN反向遗传学产毒系统,构建带有报告系统的单轮感染流感病毒。结果首轮接种单轮感染流感病毒的细胞上清中可以检测到Gluc信号,但检测不到病毒滴度,而在第二轮感染的细胞上清中检测不到Gluc信号,表明该单轮感染病毒在感染过程中能够分泌Gluc蛋白并且不能产生具有感染性的子代病毒颗粒。通过对复制动力学和时相的观察,明确了单轮感染病毒的生活周期,同时结合4种已知作用机制的抗流感药物的阻断实验结果,证明该系统可以用来快速、有效地鉴别药物的作用机制。结论成功构建了以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒,该系统可以用于抗病毒药物作用机制的快速鉴别。

非雄激素竞争型雄激素受体拮抗剂设计策略

雄激素受体(androgen receptor,AR)是前列腺癌治疗中最为重要的药物靶点,但抗雄激素药物在使用过程中产生的耐药性问题给前列腺癌患者的治疗带来了巨大挑战。本文回顾了雄激素受体的结构功能及传统治疗位点产生药物抗性的原因,并总结非雄激素竞争型的雄激素受体拮抗剂设计策略,为发展新型抗前列腺癌药物提供依据。

逆转录转座子LINE-1与肿瘤的发生和发展

LINE-1是现今人体内存在的唯一具有自主转座活性的转座子,约有500 000个拷贝,占人类基因组总量的17%。LINE-1是通过转录和逆转录在内的转座过程产生新的DNA拷贝,并使新产生的DNA拷贝插入基因组的不同位置。LINE-1转座会影响基因组中其他基因的表达或调控,因而会对基因组的稳定性产生影响,从而导致基因疾病或肿瘤的发生。本文总结了近年来国际上对LINE-1转座与肿瘤的发生和发展之间关系的研究进展,为肿瘤的治疗和机制研究提供一些线索。

甲型流感病毒宿主适应的分子基础及其相关宿主因子的研究进展

甲型流感病毒宿主广泛,传染性强,可引起人畜共患病,严重威胁人类健康和公共卫生安全。甲型流感病毒可以通过基因突变和基因重配等机制不断变异,如果新毒株打破宿主限制获得在人类传播的能力,有可能造成流感大流行。理解流感病毒突破种间屏障的遗传学基础和分子机制,是科学界亟待解决的问题,对有效监控和预防潜在流感大爆发的具有重要的提示作用。本文对目前研究流感病毒宿主适应的分子决定因素展开了综述,着重介绍了病毒本身的遗传变异以及和病毒相互作用的宿主因子的作用,以便为应对下次流感大流行做好理论储备,为抵抗流感寻找新策略。

LINE-1编码的逆转录酶在肿瘤形成过程中的作用

逆转录转座子LINE-1是人类基因组中最大的转座子家族,约有500 000个拷贝,占人类基因组总量的17%,同时它也是人类基因组中唯一具有自主转座能力的转座子。LINE-1编码的逆转录酶是LINE-1转座所必需,近年来的研究表明该酶在包括肿瘤形成等重要的病理或生理过程中都发挥着重要的作用。抑制该酶的活性可阻滞肿瘤发展的进程、恢复肿瘤细胞的分化状态以及改变肿瘤细胞的转录组谱。本文根据近年来对LINE-1编码的逆转录酶的研究进展,介绍该酶通过对非编码RNA转录组谱的调控在肿瘤形成过程中产生的作用,以期为肿瘤的早期诊断以及抗肿瘤药物的开发提供一些线索。

电焊作业危害分析及防护对策

对电焊作业的危害进行了分析,并结合实际有针对性地提出了防护对策。