拟态弧菌重组蛋白OmpUa的表达条件优化及其抗原性分析

目的分析重组蛋白OmpUa的表达形式和抗原性,优化拟态弧菌OmpUa基因工程重组菌(pMALc4X-OmpUa/TB1)的表达条件。方法诱导基因重组工程菌表达,分别采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白OmpUa的表达形式及其抗原性。采用正交试验设计L9(34)方案,通过SDS-PAGE和电泳图谱光密度扫描分析培养基种类、诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度等因素对重组蛋白表达的影响。结果重组蛋白OmpUa主要以可溶性形式表达,具有良好的抗原性。基因工程重组菌接种LB培养基,37℃振荡培养3 h时加入0.5 mmol/LIPTG诱导4 h,即可获得高表达量的重组OmpUa蛋白。结论摸索出拟态弧菌OmpUa基因工程重组菌的最佳表达条件,为下一步大量制备OmpUa诊断性抗原奠定了基础。