黄芩素对人牙周膜细胞骨向分化能力的影响

目的:探讨中药黄芩提取物黄芩素对人牙周膜细胞(h PDLCs)增殖和成骨分化功能的影响。方法:原代培养h PDLCs,向h PDLCs中分别加入浓度为0.3125、0.625、1.25μmol/L的黄芩素作为实验组,对照组不加黄芩素。MTT法检测黄芩素对h PDLCs增殖的影响后,分别采用碱性磷酸酶(ALP)活性测定、茜素红S染色、Real-time PCR和Western Blot法研究黄芩素对h PDLCs ALP活性、矿化结节形成、I型胶原(Col-I)m RNA和蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,各浓度黄芩素对h PDLCs增殖均无明显影响;各浓度黄芩素组均表现为ALP活性上升;同时骨向诱导21 d后可见黄芩素组矿化结节形成增加,定量分析结果显示1.25μmol/L黄芩素组形成矿化结节数量最多;Real-time PCR和Western Blot结果显示各浓度黄芩素组Col-I m RNA和蛋白表达均有上升,7 d时随浓度的增加其表达上升,1.25μmol/L黄芩素组达到最高水平。结论:黄芩素能促进h PDLCs的骨向分化能力,具有进一步研究其辅助牙周再生治疗的价值。

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对THP-1源性巨噬细胞CD36和LOX-1表达的影响

目的该文以THP-1源性巨噬细胞为研究对象,研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞内胆固醇代谢关键分子CD36、LOX-1表达的影响。方法以160 nmol/L佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞48 h,使其分化为巨噬细胞。建立P.g-LPS与THP-1源性巨噬细胞共孵育的体外模型,在负荷50μg/m L低密度脂蛋白(LDL)的条件下,分别用浓度为0.1、1.0、10.0μg/m L P.g-LPS与巨噬细胞共孵育48 h;1μg/m L P.g-LPS与巨噬细胞共孵育24、48和72 h。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法探讨巨噬细胞胆固醇代谢关键分子CD36和LOX-1表达变化。结果与空白对照组相比,随着P.g-LPS浓度的增加和1μg/m L P.g-LPS孵育时间的延长,巨噬细胞内CD36 mRNA和蛋白表达均逐渐下降;LOX-1mRNA和蛋白表达无明显变化。结论 P.g-LPS可促进巨噬细胞CD36的表达,对LOX-1表达无影响,从而可能对巨噬细胞脂质代谢产生影响。

牙龈卟啉单胞菌感染对THP-1源性巨噬细胞胆固醇代谢的影响

目的以THP-1来源的巨噬细胞为研究对象,初步研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)感染促进巨噬细胞形成泡沫细胞的影响。方法以160 nmol/L佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞48 h,使其分化为巨噬细胞。在负荷50μg/m L低密度脂蛋白的条件下,建立P.g感染巨噬细胞的体外模型,采用胆固醇测定法检测细胞内胆固醇酯含量的变化。结果经160 nmol/L PMA诱导48 h后,THP-1单核细胞成为巨噬细胞。6 h时P.g感染组细胞胆固醇酯(CE)与总胆固醇(TC)比值(CE/TC)为0.445±0.386,24 h时,P.g感染组CE/TC值为0.557±0.430,均显著高于空白对照组和6 h组(P<0.05)。结论本研究成功建立了P.g感染巨噬细胞的体外模型,P.g感染可显著促进巨噬细胞总胆固醇和胆固醇酯含量增加,从而可能参与心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)发生和发展。