右旋氨基酸对粪肠球菌生物膜形成和离散的影响

目的:探讨不同右旋氨基酸(D-AA)及D-AA混合物对粪肠球菌生物膜形成和离散的影响。方法:首先将不同浓度的右旋色氨酸(D-Trp)、右旋蛋氨酸(D-Met)、右旋亮氨酸(D-Leu)、D-AA混合物-1(D-Trp、D-Met、D-Leu、D-酪氨酸)及不含药物的BHI液体培养基(阴性对照组)与粪肠球菌共同培养,并于培养24 h后采用结晶紫染色法检测各组的生物膜形成量。然后再建立24 h粪肠球菌生物膜模型,并按上述分组加入相应浓度的D-Trp、D-Met、D-Leu、D-AA混合物2及不含药物的BHI液体培养基;继续培养2 h后用结晶紫染色法检测各组对粪肠球菌生物膜的离散作用。结果:不同浓度D-AA与粪肠球菌共培养24 h后,除2.5 mmol/L的D-Leu组生物膜的总生物量与阴性对照组相比无统计学差异(P> 0.05)外,其余各实验组生物膜的总生物量均显著低于阴性对照组(P<0.05);不同种类D-AA处理粪肠球菌生物膜2 h后,单一种类D-AA组可显著降低生物膜的总生物量(P<0.05),D-AA混合物组生物膜总生物量与阴性对照组相比无统计学差异(P> 0.05);不同种类D-AA影响生物膜形成及离散的最适浓度各不相同。结论:适当浓度的D-Trp、D-Met、D-Leu及D-AA混合物均具有抑制粪肠球菌生物膜形成的作用,单独应用D-Trp、DMet、D-Leu可促进24 h粪肠球菌生物膜的离散。

Spry1对脂肪细胞分化的调控作用

目的探讨利用siRNA下调骨髓基质细胞系ST2细胞中Spry1的内源性表达对脂肪细胞分化的调控作用。方法设计Spry1的靶向si RNA作为实验组,以转染Control si RNA作为对照组。在ST2细胞中转染Spry1si RNA和Control si RNA并进行成脂诱导,应用q RT-PCR检测2组细胞中的Spry1和成脂特异性因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α、脂肪细胞表征因子FABP4、脂肪因子adipsin的m RNA表达水平。脂肪细胞分化成熟后,进行油红O染色,显微镜下观察脂肪细胞的染色情况及Spry1 si RNA对ST2细胞成脂分化的影响。运用异丙醇萃取染色的脂肪细胞中的油红O并测定波长在520 nm处的光密度(OD)值。结果转染Spry1 si RNA于ST2细胞后,与转染Control si RNA的对照组相比,Spry1基因的表达水平明显下调,Spry1 si RNA可抑制脂肪细胞的分化,油红O染色显示实验组的脂肪细胞明显减少且OD值低于对照组;转染Spry1si RNA实验组的成脂特异性因子PPARγ、C/EBPα、FABP4、adipsin的m RNA表达水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Spry1 siRNA可有效抑制前体细胞向脂肪细胞分化。