皮肤淋巴瘤与EB病毒潜伏感染的关系及病毒亚型的分析

目的探讨EB病毒潜伏感染及其亚型与皮肤淋巴瘤的相关性。方法标本来源于41例淋巴瘤患者的皮肤组织和38例健康成人咽部洗漱液。采用原位杂交、PCR、巢式PCR、Southern杂交方法检测EB病毒及其亚型。通过Southern杂交对5例自然杀伤/T细胞淋巴瘤病例中EB病毒末端重复序列进行分析。结果8例自然杀伤/T细胞淋巴瘤、4例皮下脂膜炎型淋巴瘤、1例自然杀伤/T淋巴细胞增生症、1例血管免疫母细胞恶性淋巴瘤和1例组织细胞样淋巴瘤EB病毒原位杂交和PCR结果均阳性。38例正常人中有14例咽部携带有EB病毒。15例蕈样肉芽肿、5例Sézary综合征病例中,EB病毒原位杂交和EB病毒BMRF1基因PCR扩增均为阴性。除1例淋巴细胞增生症患者为EB病毒亚型1和2双重感染外,其它病例均为亚型1感染。正常人群咽部携带亚型1EB病毒。5例自然杀伤/T细胞淋巴瘤与EB病毒末端重复序列特异性探针杂交后,均只产生一条杂交带。结论EB病毒潜伏感染与皮肤自然杀伤/T细胞淋巴瘤及皮下脂膜炎型淋巴瘤相关,但与蕈样肉芽肿和Sézary综合征无明显相关性。肿瘤细胞中的EB病毒与正常人群咽部所携带的病毒亚型相同,均为亚型1。肿瘤细胞单克隆增殖发生于EB病毒感染之后,此结论支持EB病毒在自然杀伤/T细胞淋巴瘤中的致病作用。

聚合酶链反应Dig-dUTP掺入法制备桥粒芯蛋白1、3型探针

用聚合酶链反应(PCR)Dig-dUTP掺入法成功地制备出桥粒芯蛋白1、3型探针。Dig标记探针由于掺入Dig而使其片段增大,凝胶电泳显示其移动速率较未掺入Dig的PCR产物缓慢,斑点杂交结果表明制备的探针可用于RNA分析,且两种探针均具有较强的特异性。本实验为进一步开展原位杂交及Northern杂交等技术定位、定量分析桥粒芯蛋白在组织及细胞中的基因表达提供了条件。