规模猪场仔猪沙门氏菌病的诊断检测

2017年4月6日,云南省宣威市某规模化猪场新购进的部分仔猪开始出现呕吐、腹泻症状,接下来的数日发病数量不断增多并出现死亡。死亡仔猪皮肤发绀,解剖可见脾脏肿大呈深蓝色,有出血点,胃黏膜广泛性脱落、胃底部弥漫性出血,肝脏肿大,可见瘀血斑块。截至采集病料送检时,已死亡56头,仍有20多头处于发病状态中。为了尽快对疫情进行确诊,对送检病料进行猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳病、猪红斑丹毒丝菌、多杀性巴氏杆菌、刚地弓形虫及猪流行性腹泻RT-PCR/PCR/qRT-PCR检测,同时无菌采集肠系膜淋巴结样品进行致病菌的分离培养及鉴定。最终猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳病、猪红斑丹毒丝菌、多杀性巴氏杆菌、刚地弓形虫及猪流行性腹泻检测结果均为阴性,分离获得1株细菌,经细菌形态学分析、昆明小白鼠致病性试验、生化鉴定及16SrRNA序列分析,确诊引起此次疫情的病原体为沙门氏菌属细菌。药敏鉴定结果显示该菌株仅对头孢哌酮、氟甲喹、卡那霉素、奥索利酸、庆大霉素、依氟沙星、安普霉素、呋喃妥因敏感,对其余药物均耐药。笔者及时选用敏感药物对猪群进行预防和治疗,有效控制了死亡率,最大程度地减少了经济损失,并为猪沙门氏菌病的诊断及防治提供参考及借鉴。

规模化肉牛养殖场杂交肉牛顽固性水样腹泻的病原检测

2016年12月,云南省禄丰县某肉牛养殖场饲养的杂交肉牛相继发生顽固性水样腹泻,发病牛精神委顿,食欲减退,消瘦,下颌水肿,严重脱水。为了对该病进行诊断检测,遂采集水样腹泻粪便样品进行牛病毒性腹泻、牛冠状病毒、牛轮状病毒、牛细小病毒、隐孢子虫RTPCR/PCR检测,同时进行病原菌的分离培养及鉴定。结果牛病毒性腹泻、牛冠状病毒、牛轮状病毒、牛细小病毒、隐孢子虫检测均为阴性,但分离获得1株致病菌,经细菌形态学、昆明小白鼠致病性试验、细菌生化鉴定为致病性大肠埃希菌,因此推断引起该场杂交肉牛水样腹泻的病原为致病性大肠埃希菌。药敏实验结果显示该分离菌株对阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星敏感,对其余药物耐药。选用上述敏感药物对发病牛进行治疗,及时有效地控制了发病牛的死亡,并全部治愈。

夏秋季节牛病的预防和治疗

夏秋季节由于气候闷热潮湿,冷热交替,导致牛病流行的可能性加大。基于此,本文主要介绍夏秋季节常发牛病的主要类型及其防治措施,供参考。1夏秋季节常见牛病的类型1.1牛肺疫牛感染该病后,体温升高到42℃左右,食欲明显减退,出现气喘咳嗽、呼吸急促、身体虚弱等现象,严重时会形成腹部水肿,甚至导致病牛死亡,其死亡率主要取决于病牛肺部的水肿程度及发病情况。对牛肺疫,必须治疗及时,一旦错过治疗时机,会极大的增加治疗难度。

牛腺病毒7型、牛支原体和细菌混合感染致外购肉牛呼吸系统疾病的确诊

2017年8月昆明寻甸某养殖户从山东郓城购进30头肉牛,在购进1周后陆续发生以呼吸道症状为主的疾病,部分牛只伴有腹泻。为了尽快确诊病因,本试验进行了牛常见传染病的病原学检测及序列分析,同时开展了牛支原体和细菌的分离鉴定。结果从牛肺脏组织和气管分泌物中检测出牛腺病毒7型及牛支原体核酸阳性,并分离鉴定出1株牛支原体,命名为XDJY-YN-2017株,还分离鉴定出2株细菌。测定出的牛腺病毒7型蛋白酶基因序列与NCBI上GenBank中的参考毒株(登录号:X53989)序列同源性达99%。基于16S rRNA序列构建的系统发育树显示,牛支原体XDJY-YN-2017株与以色列的72242株,英国的393B08、268B07株,中国的Ningxia-1、HB0801、CQ-W70、08M、Hubei-1、NM2012株同属于一个进化分支,古巴的422株和PG45株属于一个进化分支,Donetta株单独为一个进化分支。2株分离菌株经细菌生化鉴定为弗格森埃希菌(ID%=99.9%,T=0.8)和克吕沃尔菌属细菌(ID%=76.3%,T=0.61)。药敏试验结果显示,弗格森埃希菌对阿莫西林/克拉维酸、多黏菌素E、大观霉素、庆大霉素、安普霉素、呋喃妥因敏感,克吕沃尔菌属菌株对多黏菌素E、安普霉素、呋喃妥因、大观霉素敏感。试验结果表明外购肉牛由于长途运输、饲草饲料更换、饲养环境改变等应激因素,导致了牛腺病毒7型、牛支原体和细菌混合感染发病及死亡。

猪红斑丹毒丝菌云南YNKMYZS-2016株的分离鉴定

2016年10月,云南省昆明市某规模化猪场饲养的妊娠后期母猪频繁发生急性死亡,为了尽快确诊,采集病死猪及胎儿内脏组织病料进行PCR及real-time PCR检测,同时进行病毒及细菌分离培养鉴定。结果显示,从病死猪肺脏组织分离获得1株猪红斑丹毒丝菌,其16S rRNA序列与NCBI GenBank中的猪红斑丹毒丝菌参考菌株Fujisawa(登录号:NZ_015601.1)、GXBY-1(登录号:NZ_CP014861.1)、KG-BB1(登录号:AB055909.1)、KG-BB2(登录号:AB055910.1)、SY1027(登录号:NZ_021354.1)、WH13013(登录号:NZ_CP017116.1)的16SrRNA序列相似性达96.3%以上。该分离菌株对青霉素、红霉素、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、原始霉素、苯唑西林、泰落星、头孢噻吩、头孢哌酮、呋喃妥因敏感,对林可霉素、多粘菌素E、复方新诺明、链霉素、磺胺甲恶唑、大观霉素、氟甲喹、卡那霉素、庆大霉素、衣氟沙星、奥索利酸、安普霉素、夫西地酸、氯霉素、四环素、利福平、多西环素、甲硝唑耐药。本研究结果为该疫情的预防治疗提供了科学参考。

一例猪瘟与猪圆环病毒2型混合感染的诊治

在生猪养殖过程中,多种病原混合感染的情况较为常见,并这种混合感染也导致传统的临床诊断容易造成误诊或漏诊,继而延误诊断治疗从而造成经济损失。2020年8月初,孟连县某养猪场保育猪群零散发病,临床主要表现为发热、咳喘、打堆、被毛凌乱无光泽、局部皮肤发绀、消瘦、饮食欲下降、生长滞缓,个别猪只伴便秘和腹泻交替。病理剖检变化显示为肾脏点状出血,脾脏边缘梗死,胸腹腔淋巴结、肠系膜淋巴结、下颌淋巴结、腹股沟淋巴结肿大或伴有出血,肺炎伴局部肝变,回盲瓣或局部空回肠黏膜脱落、出血、坏死或溃疡。实验室诊断结果表明,该病由猪瘟病毒(CSFV)与猪圆环病毒2型(PCV2)混合感染所致,经过猪瘟及猪圆环病毒疫苗的加强免疫,辅助控制继发感染及对症治疗,该场保育猪群全部恢复健康。

一例猪瘟与圆环病毒2型混合感染的诊治

在生猪养殖过程中,其受到多种病原混合感染的情况较为常见,这种混合感染也容易导致传统的临床诊断的误诊或漏诊,继而延误猪场疾病的治疗,造成巨大的经历损失。2020年8月初,云南省昆明市某养殖场突发疑似猪瘟(CSF)疫情,猪群临床主要表现为呼吸困难、高热,病理变化为肾脏出血,脾脏边缘梗死等,且回盲瓣纽扣状溃疡。实验室诊断结果表明,该场疫情由猪瘟病毒(CSFV)与猪圆环病毒2型(PCV2)混合感染所致,经过针对性治疗与防控,该场猪群恢复健康。

安格斯种牛暴发牛巴贝斯虫病的诊断及防治

2015年12月,云南曲靖市马龙县某规模化肉牛场新引进的澳大利亚安格斯种牛发生以高热、血尿、消瘦、血液稀薄及可视黏膜黄染为主要临床表现的疫情,发病初期经抗生素类药物治疗无好转,死亡数量不断增加。为了对此次暴发的疫病进行确诊,遂采集发病牛新鲜血液制备生理盐水悬液及血涂片染色镜检,同时制备EDTA-K2抗凝血进行血液细胞分析,并抽提血液基因组DNA进行巴贝斯焦虫(Babesia bovis)、泰勒焦虫(Theileria annulata)、无浆体(A.marginale/ovis)及埃利希氏体(E.ruminantium)PCR检测。结果发病牛血细胞数量稀少,大部分红细胞呈不规则样变形,红细胞膜边缘有数量不一的脊状凸起,凸起部位经染色后呈蓝紫色,血细胞分析结果也提示呈贫血血象。牛巴贝斯虫PCR检测扩增出约750bp大小的目的基因片段,PCR产物经切胶回收纯化后测序,所得序列在NCBI GenBank中blast,结果与2012年我国北方采集获得的巴贝斯焦虫ZJK15参考株(Accession No.:KP710223.1)18SrRNA基因序列同源性达99%,而无浆体、泰勒焦虫及埃利希氏体PCR检测均未扩增出目的基因片段。结合此次疫情的临床症状、病理变化、血涂片和生理盐水悬滴液镜检、血细胞分析、牛巴贝斯虫PCR检测及序列分析结果,最终确诊此次肉牛暴发的疫病为牛巴贝斯虫病,发病牛群经三氮脒(血虫净)、高糖、维生素B12、牲血素(右旋糖酐铁)静脉输液治疗后均全部康复,康复后2个月采集血液进行血细胞分析,结果显示各项血象指标均恢复正常。

云南一规模化猪场猪流行性腹泻及其细菌继发感染的诊断检测

2017年4月中下旬至5月上旬,云南省昆明市某规模化猪场新生哺乳仔猪群体突发一种以呕吐、水样腹泻及严重脱水为特征的疫情,虽然该猪场所有生产母猪产前40、20d已免疫某疫苗厂家生产的猪流行性腹泻-传染性胃肠炎二联灭活疫苗,但新生哺乳仔猪发病率及病死率仍然高达100%。剖杀送检发病仔猪,采集肠内容物抽提病毒RNA,进行猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、Delta冠状病毒及轮状病毒A群RT-PCR检测及序列分析,同时无菌采集肠系膜淋巴结样品进行继发细菌的分离培养及鉴定。RT-PCR检测及序列分析最终确诊为猪流行性腹泻病毒,其N基因序列与NCBI GenBank中的2014年度广东参考毒株CH/GDZHDM/1401株(Accession KX016034.1)的序列同源性达99%,同时分离培养、鉴定出1株致病性大肠埃希菌。药敏试验结果显示,该分离菌株对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢西丁、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因敏感,对其余药物均耐药。遂选用敏感药物对发病新生哺乳仔猪进行辅助治疗,并结合提前断奶、口服补液盐、腹腔补液等措施,但疗效均不理想,提示该病的有效防控还得依赖严格的生物安全措施及新型、高效疫苗的研发与应用。

轮状病毒A群、产酸克雷伯菌及致病性大肠埃希菌共感染致哺乳仔猪腹泻的诊断

2017年8月,云南省宜良县某规模化养殖场哺乳仔猪发生大规模腹泻,并出现死亡。为尽快查出病因,遂采集病死猪内脏组织病料、肠内容物及部分腹泻仔猪粪便,进行猪流行性腹泻、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒2型、猪传染性胃肠炎、猪A群轮状病毒、Delta冠状病毒PCR检测,同时进行致病菌的分离鉴定。PCR检测结果显示从肠内容物及腹泻粪便样品中检测出猪A群轮状病毒,而其余病毒检测结果均为阴性。不过从病死猪肠系膜淋巴结分离培养出1株产酸克雷伯菌,从肺脏分离出1株致病性大肠埃希菌。药敏实验结果显示产酸克雷伯菌分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、替卡西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢孟多、头孢呋辛酯、头孢呋辛、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星、四环素、氯霉素、复方新诺明、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因均耐药,仅对替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星、磷霉素敏感。大肠埃希菌分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、替卡西林、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢孟多、头孢呋辛酯、头孢呋辛、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星、四环素、氯霉素、复方新诺明、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因均耐药,仅对头孢西丁、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、磷霉素敏感。

如何树立猪场疫病防控新观念

随着人们物质生活水平的提高,对于肉类的需求也在与日俱增,尤其是对于猪肉的需求。树立猪场疫病防控意识,不仅是养殖者防控病毒传播、保证养殖收入的重要因素,而且还关系到消费者们的食用安全问题。所以,对于养殖者而言,必须树立严格的猪场疫病防控观念,保障我国公民的肉食品安全。

云南一规模化猪场伪狂犬病及其细菌继发感染的诊断检测

2016年12月,云南昆明市郊某规模化养猪场饲养的断奶仔猪相继出现体温升高、呼吸困难、全身颤抖、眼睑浮肿等临床症状,并相继发病死亡。为了尽快对疫情进行确诊以便采取有效的防治措施,剖杀临床发病典型的病猪,采集大脑、脾脏、肺脏、肝脏、肾脏及淋巴结进行猪蓝耳病、伪狂犬、猪瘟、乙型脑炎、猪细小病毒病、猪圆环病毒II型、副猪嗜血杆菌及多杀性巴氏杆菌PCR检测和细菌分离培养鉴定。结果显示伪狂犬病毒(g E基因)PCR检测结果为阳性,扩增出约810 bp大小的特异目的条带,序列比对结果显示与NCBI Gen Bank中的HNX株(ACCESSION KM189912.1)的g E基因序列同源性达99%;同时也扩增出副猪嗜血杆菌16S rRNA基因约822 bp大小的特异目的条带,序列比对结果显示与NCBI Gen Bank中的副猪嗜血杆菌参考菌株AZ1-5株(ACCESSION GU226387.1)的16S rRNA基因序列的同源性达100%,其余病原检测结果均为阴性。并从肾脏分离培养鉴定出1株致病性大肠埃希氏菌,药敏试验结果显示该菌仅对多粘菌素E、大观霉素、呋喃妥因敏感,对青霉素、红霉素、阿莫西林、林可霉素、阿莫西林克拉维酸、原始霉素、苯唑西林、泰洛星、头孢噻吩、头孢哌酮、复方新诺明、链霉素、磺胺甲恶唑、氟甲喹、卡那霉素、奥索利酸、庆大霉素、依氟沙星、安普霉素、氯霉素、夫西地酸、四环素、得福平、多西环素、甲哨唑均耐药。本病例的检测结果提示,仔猪感染伪狂犬野毒后免疫力低下,极易继发感染各种病原菌和条件性致病菌,为有效防控该病,猪场应加强疫苗免疫工作或实施疫病净化。